中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
文献综述 | 第8-17页 |
一. 藻类基因工程的意义 | 第8页 |
二. 藻类基因工程模式系统 | 第8-15页 |
三. 海带基因工程研究进展 | 第15-16页 |
四. 本文研究内容和目标 | 第16-17页 |
第一章 :裙带菜的再生途径的研究 | 第17-21页 |
1. 实验材料及方法 | 第17-19页 |
1.1 裙带菜雌雄配子体无性繁殖系的建立 | 第17-18页 |
1.1.1 裙带菜材料 | 第17页 |
1.1.2 方法 | 第17-18页 |
1.2 裙带菜的孤雌生殖及孤雄生殖的研究 | 第18-19页 |
1.2.1 材料 | 第18页 |
1.2.2 方法 | 第18-19页 |
1.3 裙带菜的雌雄受精途径的效率研究 | 第19页 |
1.3.1 材料 | 第19页 |
1.3.2 方法 | 第19页 |
2. 实验结果 | 第19-20页 |
2.1 雌雄配子体无性繁殖系的建立 | 第19页 |
2.2 孤雌生殖、孤雄生殖及雌雄受精效率的研究 | 第19-20页 |
3. 讨论 | 第20-21页 |
第二章 :报告基因在裙带菜组织块中的瞬间表达研究 | 第21-29页 |
1. 不同阶段裙带菜GUS和LacZ本底的研究 | 第21-22页 |
1.1 材料 | 第29-21页 |
1.2 染液的配制 | 第21-22页 |
1.3 染色方法 | 第22页 |
1.4 结果与讨论 | 第22页 |
2. LacZ基因和GUS基因对裙带菜组织块的基因枪转化 | 第22-29页 |
2.1 材料与试剂 | 第22-23页 |
2.1.1 菌株 | 第22页 |
2.1.2 裙带菜材料 | 第22-23页 |
2.1.3 细菌培养基 | 第23页 |
2.1.4 溶液配置 | 第23页 |
2.2 方法 | 第23-27页 |
2.2.1 转化供体质粒的制备 | 第23-26页 |
2.2.1.1 供体质粒 | 第23-24页 |
2.2.1.2 大肠杆菌感受态的制备 | 第24页 |
2.2.1.3 大肠杆菌的转化 | 第24页 |
2.2.1.4 质粒DNA的提取 | 第24-25页 |
2.2.1.5 质粒的电泳鉴定 | 第25-26页 |
2.2.2 裙带菜的基因枪转化 | 第26-27页 |
2.2.2.1 材料的预处理 | 第26页 |
2.2.2.2 基因枪子弹的制作 | 第26页 |
2.2.2.3 裙带菜组织块的基因枪转化 | 第26页 |
2.2.2.4 表达产物的检测 | 第26-27页 |
2.3. 结果 | 第27页 |
2.4. 讨论 | 第27-29页 |
第三章 :LacZ基因在裙带菜中的稳定表达 | 第29-35页 |
1. 材料 | 第29页 |
1.1 质粒菌株 | 第29页 |
1.2 材料 | 第29页 |
1.3 特殊生化试剂 | 第29页 |
2. 方法 | 第29-33页 |
2.1 质粒pSV40-lacZ的制备 | 第29页 |
2.2 裙带菜受体的制备 | 第29页 |
2.3 裙带菜雄配子体的转化 | 第29页 |
2.4 LacZ活性的组织化学检测 | 第29-30页 |
2.5 PCR检测转基因裙带菜中的LacZ基因 | 第30-32页 |
2.5.1 裙带菜总DNA的提取 | 第30页 |
2.5.2 PCR引物的设计 | 第30-31页 |
2.5.3 PCR检测 | 第31-32页 |
2.6 PCR-Southern印迹杂交 | 第32-33页 |
3. 结果 | 第33-34页 |
3.1 LacZ基因在裙带菜中的稳定表达的组织化学染色法检测 | 第33-34页 |
3.2 LacZ基因在裙带菜中的稳定表达的PCR检测 | 第34页 |
3.3 PCR-Southern印迹杂交结果 | 第34页 |
4. 讨论 | 第34-35页 |
第四章 :裙带菜幼孢子体及配子体对不同筛选压力的敏感性研究 | 第35-51页 |
1. 文献综述 | 第35-40页 |
1.1 选择标记研究概述 | 第35-37页 |
1.2 选择性试剂的毒性与抗性机理 | 第37-40页 |
1.3 藻类基因工程选择标记的研究现状 | 第40页 |
2. 材料与方法 | 第40-43页 |
2.1 实验材料 | 第40页 |
2.2 试剂 | 第40-41页 |
2.3 实验方法 | 第41-43页 |
3. 结果与讨论 | 第43-48页 |
3.1 预实验结果 | 第43页 |
3.2 裙带菜对草丁膦的敏感性研究结果 | 第43-45页 |
3.3 裙带菜对氯霉素的敏感性 | 第45-46页 |
3.4 裙带菜对潮霉素的敏感性研究 | 第46-47页 |
3.5 裙带菜雌配子体对草丁膦的敏感性研究 | 第47-48页 |
4. 小结 | 第48-51页 |
图版 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
勘误表 | 第63页 |