非洲猪瘟病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-22页 |
| ·非洲猪瘟病毒分子生物学研究进展 | 第11-14页 |
| ·概述 | 第11页 |
| ·病毒结构 | 第11页 |
| ·基因特征 | 第11-12页 |
| ·主要蛋白 | 第12页 |
| ·侵入机理 | 第12-13页 |
| ·免疫逃避机制 | 第13-14页 |
| ·小结 | 第14页 |
| ·非洲猪瘟病毒检测技术的研究进展 | 第14-16页 |
| ·免疫学检测技术 | 第15页 |
| ·核酸检测技术 | 第15页 |
| ·小结 | 第15-16页 |
| ·环介导等温扩增技术 | 第16-21页 |
| ·技术特点 | 第16页 |
| ·反应原理 | 第16-18页 |
| ·引物设计 | 第18-19页 |
| ·具体操作 | 第19页 |
| ·应用实例 | 第19-20页 |
| ·小结 | 第20-21页 |
| ·本研究的意义 | 第21-22页 |
| 第二章 目的基因序列分析及 LAMP 引物设计 | 第22-28页 |
| ·非洲猪瘟病毒P72 蛋白基因序列分析 | 第22页 |
| ·引物设计 | 第22-24页 |
| ·软件使用 | 第23页 |
| ·参数调整 | 第23页 |
| ·引物筛选 | 第23-24页 |
| ·酶切位点分析 | 第24-25页 |
| ·总结与讨论 | 第25-28页 |
| ·总结 | 第25页 |
| ·讨论 | 第25-28页 |
| 第三章 引物验证及 LAMP 重要参数的优化 | 第28-40页 |
| ·材料与方法 | 第28-34页 |
| ·质粒与菌株 | 第28页 |
| ·引物 | 第28页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28-29页 |
| ·质粒模板的准备 | 第29-31页 |
| ·引物的验证 | 第31页 |
| ·反应温度的优化 | 第31-32页 |
| ·镁离子浓度的优化 | 第32页 |
| ·引物浓度的优化 | 第32-33页 |
| ·甜菜碱的作用 | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-36页 |
| ·引物验证结果 | 第34-35页 |
| ·温度优化结果 | 第35页 |
| ·镁离子浓度优化结果 | 第35-36页 |
| ·甜菜碱的效果 | 第36页 |
| ·结论与讨论 | 第36-40页 |
| ·结论 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-40页 |
| 第四章 ASFV-LAMP 检测方法的验证 | 第40-49页 |
| ·材料与方法 | 第40-44页 |
| ·质粒与病毒基因组 | 第40页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第40页 |
| ·主要仪器设备 | 第40-41页 |
| ·引物 | 第41页 |
| ·产物酶切鉴定 | 第41页 |
| ·灵敏度检测及标准PCR 方法的对比 | 第41-42页 |
| ·反应时间检测 | 第42-43页 |
| ·环引物 Loop 的验证 | 第43页 |
| ·特异性检测 | 第43页 |
| ·重复性和稳定性实验 | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44-47页 |
| ·酶切鉴定结果 | 第44页 |
| ·灵敏度检测结果 | 第44-45页 |
| ·反应时间检测结果 | 第45页 |
| ·环引物 Loop 的作用 | 第45-46页 |
| ·特异性检测结果 | 第46-47页 |
| ·结论与讨论 | 第47-49页 |
| ·结论 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 全文结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简历 | 第56页 |
