中文摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-17页 |
第1篇 前言 | 第17-19页 |
第2篇 实验研究 | 第19-81页 |
第1章 重组家蚕素Ⅱ对哺乳细胞胰岛素样作用的研究 | 第19-57页 |
第1节 重组家蚕素Ⅱ对 HepG2 细胞胰岛素样作用的研究 | 第19-42页 |
·实验材料与仪器 | 第19-21页 |
·主要材料 | 第19-20页 |
·主要仪器 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-35页 |
·细胞培养 | 第21-22页 |
·重组真核表达载体 pcDNA3.1(+)-BbxⅡ/His 稳定转染 HepG2 细胞 | 第22-24页 |
·重组家蚕素Ⅱ基因在细胞内 mRNA 水平表达的检测 | 第24-26页 |
·免疫细胞化学检测细胞中重组家蚕素Ⅱ蛋白的表达 | 第26-27页 |
·Western blot 检测细胞和上清中重组家蚕素Ⅱ在蛋白水平的表达 | 第27-31页 |
·MTT 方法检测细胞增殖 | 第31-32页 |
·流式细胞术检测细胞周期 | 第32-33页 |
·重组家蚕素Ⅱ基因对 HepG2 细胞葡萄糖消耗的影响 | 第33页 |
·重组家蚕素Ⅱ基因对 HepG2 细胞糖原合成作用的影响 | 第33-34页 |
·统计学分析 | 第34-35页 |
·实验结果 | 第35-42页 |
·本研究所用质粒载体基本框架 | 第35页 |
·稳定基因转染细胞的筛选结果 | 第35-36页 |
·重组家蚕素Ⅱ基因在 HepG2 细胞中 mRNA 水平表达的检测结果 | 第36页 |
·重组家蚕素Ⅱ基因在 HepG2 蛋白水平的表达检测结果 | 第36-38页 |
·重组家蚕素Ⅱ对 HepG2 增殖影响的结果 | 第38页 |
·重组家蚕素Ⅱ对 HepG2 细胞周期影响的结果 | 第38-39页 |
·重组家蚕素Ⅱ基因对 HepG2 细胞葡萄糖消耗的影响 | 第39-40页 |
·重组家蚕素Ⅱ基因对 HepG2 细胞糖原合成作用的影响 | 第40-42页 |
第2节 重组家蚕素Ⅱ对 3T3-L1 细胞胰岛素样作用的研究 | 第42-52页 |
·实验材料与仪器 | 第42页 |
·主要材料 | 第42页 |
·主要仪器 | 第42页 |
·实验方法 | 第42-46页 |
·3T3-L1 细胞培养 | 第42页 |
·重组真核表达载体 pcDNA3.1(+)-BbxⅡ/His 稳定转染 3T3-L1 细胞 | 第42-43页 |
·重组家蚕素Ⅱ基因在 3T3-L1 细胞内 mRNA 水平表达检测 | 第43页 |
·免疫细胞化学检测 3T3-L1 细胞中重组家蚕素Ⅱ基因蛋白表达 | 第43-44页 |
·Western blot 检测细胞和上清中重组家蚕素Ⅱ基因蛋白水平的表达 | 第44页 |
·重组家蚕素Ⅱ对 3T3-L1 细胞增殖的影响 | 第44-45页 |
·重组家蚕素Ⅱ基因对 3T3-L1 细胞周期的影响 | 第45页 |
·重组家蚕素Ⅱ基因对 3T3-L1 成脂细胞葡萄糖消耗情况的影响 | 第45-46页 |
·统计学分析 | 第46页 |
·实验结果 | 第46-52页 |
·稳定基因转染细胞的筛选结果 | 第46页 |
·重组家蚕素Ⅱ基因在 3T3-L1 细胞中 mRNA 水平的表达 | 第46-47页 |
·重组家蚕素Ⅱ基因在 3T3-L1 细胞内蛋白水平的表达 | 第47-48页 |
·MTT 方法检测细胞增殖结果 | 第48-49页 |
·流式细胞术检测细胞周期结果 | 第49-50页 |
·油红 O 脂滴染色检测成脂分化结果 | 第50页 |
·重组家蚕素Ⅱ对 3T3-L1 成脂细胞葡萄糖消耗情况的影响 | 第50-52页 |
第3节 讨论 | 第52-56页 |
·重组家蚕素Ⅱ基因在细胞内的稳定表达 | 第52-53页 |
·重组家蚕素Ⅱ对肝细胞糖代谢影响 | 第53-54页 |
·重组家蚕素Ⅱ对脂肪细胞糖代谢影响 | 第54页 |
·重组家蚕素Ⅱ对细胞增殖的影响 | 第54-56页 |
第4节 小结 | 第56-57页 |
第2章 重组家蚕素Ⅱ对哺乳动物细胞胰岛素样作用通路的研究 | 第57-81页 |
第1节 重组家蚕素Ⅱ对哺乳动物细胞糖代谢 PI3K 通路作用的研究 | 第57-70页 |
·材料与仪器 | 第57-58页 |
·主要材料 | 第57-58页 |
·主要仪器 | 第58页 |
·实验方法 | 第58-61页 |
·细胞培养及诱导 | 第58-59页 |
·PI3K 抑制剂对重组家蚕素Ⅱ作用细胞葡萄糖消耗的影响 | 第59页 |
·PI3K 抑制剂对重组家蚕素Ⅱ作用 HepG2 细胞糖原合成的影响 | 第59-60页 |
·PI3K 抑制剂对重组家蚕素Ⅱ胰岛素样作用通路中分子蛋白磷酸化水平的影响 | 第60-61页 |
·统计学分析 | 第61页 |
·实验结果 | 第61-70页 |
·PI3K 抑制剂对重组家蚕素Ⅱ作用细胞葡萄糖消耗的影响 | 第61-64页 |
·PI3K 抑制剂对 HepG2 细胞糖原合成作用的影响 | 第64-65页 |
·重组家蚕素Ⅱ对 PI3K 通路中分子蛋白磷酸化水平的影响 | 第65-70页 |
第2节 重组家蚕素Ⅱ对 MAPK 通路作用的研究 | 第70-77页 |
·材料与仪器 | 第70-71页 |
·主要材料 | 第70页 |
·主要仪器 | 第70-71页 |
·实验方法 | 第71-72页 |
·MAPK 抑制剂对 3T3-L1 细胞增殖的影响 | 第71-72页 |
·流式细胞术检测 MAPK 抑制剂对各组 3T3-L1 细胞周期的影响 | 第72页 |
·重组家蚕素Ⅱ对 MAPK 通路中分子蛋白磷酸化水平的影响 | 第72页 |
·统计学分析 | 第72页 |
·实验结果 | 第72-77页 |
·MAPK 抑制剂对各组 3T3-L1 细胞增殖的影响 | 第72-73页 |
·MAPK 抑制剂对各组 3T3-L1 细胞周期的影响 | 第73-75页 |
·重组家蚕素Ⅱ对 MAPK 通路中蛋白磷酸化水平的影响 | 第75-77页 |
第3节 讨论 | 第77-80页 |
·重组家蚕素Ⅱ对 PI3K 通路作用 | 第77-78页 |
·重组家蚕素Ⅱ对 MAPK 通路作用 | 第78-80页 |
第4节 小结 | 第80-81页 |
第3篇 实验结论 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-87页 |
综述 | 第87-112页 |
参考文献 | 第100-112页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第112-114页 |
致谢 | 第114页 |