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卵巢上皮癌耐铂类和非耐铂类细胞间差异表达蛋白与基因的筛选鉴定研究

致谢第1-10页
英文缩略词第10-13页
中文摘要第13-15页
英文摘要第15-18页
第一章 卵巢上皮癌多药耐药研究进展第18-121页
 1.卵巢上皮癌化疗概述第18-39页
   ·一线化疗药物及方案的选择第18-30页
     ·一线化疗的指征第18页
     ·一线化疗药物的选择第18-21页
       ·常规药物第18-20页
       ·新应用的药物第20-21页
     ·一线化疗方案的选择第21-30页
       ·常用的一线化疗方案第21-23页
       ·实验中的一线化疗第23-27页
       ·腹腔化疗第27-28页
       ·维持或巩固化疗的临床价值第28-29页
       ·新辅助化疗第29-30页
   ·影响化疗疗效的临床病理因素第30-35页
     ·手术分期第30页
     ·细胞分化程度第30-31页
     ·病理类型第31页
     ·残余灶的大小第31页
     ·化疗的用药剂量第31-34页
       ·化疗剂量强度的影响第31-33页
       ·化疗总剂量的影响第33页
       ·化疗剂量密度的影响第33-34页
     ·肿瘤细胞产生耐药性第34页
     ·其它因素第34-35页
     ·影响腹腔化疗临床应用的因素第35页
   ·影响化疗疗效的分子病理因素第35-39页
 2.卵巢上皮癌多药耐药概述第39-80页
   ·卵巢癌多药耐药的分子机理第39-50页
     ·细胞内化疗药物浓度降低第39-44页
     ·细胞内化疗药物代谢解毒增加第44-45页
     ·DNA损伤修复能力增加第45-46页
     ·抗凋亡能力增加第46页
     ·p53基因突变第46-47页
     ·信号传导通路第47-48页
     ·其它机制第48-50页
   ·卵巢癌多药耐药的诊断第50-52页
   ·卵巢癌多药耐药的治疗第52-77页
     ·卵巢癌多药耐药的分型及治疗原则和目的第52-54页
       ·卵巢癌多药耐药的分型第53页
       ·卵巢癌多药耐药的治疗原则第53-54页
       ·治疗的目标及价值第54页
     ·多药耐药的化疗第54-66页
       ·二线化疗药物及方案的选择及疗效评价第54-63页
       ·常规化疗药物疗效预测分子靶向化疗第63-65页
       ·自体骨髓移植加大剂量化疗在卵巢癌多药耐药治疗中的应用第65-66页
     ·多药耐药的逆转耐药治疗第66-69页
     ·多药耐药的增敏治疗第69-73页
     ·多药耐药的手术治疗第73-74页
     ·多药耐药的的基因治疗第74-75页
     ·多药耐药的综合治疗方案筛选及临床验证第75-77页
     ·多药耐药的预防第77-80页
 3.卵巢癌多药耐药差异表达基因与蛋白的筛选鉴定第80-121页
   ·卵巢癌多药耐药差异表达基因与蛋白筛选鉴定的主要方法第80-103页
     ·卵巢癌多药耐药差异表达基因筛选鉴定的主要方法第80-95页
       ·基因芯片技术第81页
       ·DDRT—PCT第81-84页
       ·比较基因组杂交法第84-86页
       ·表达序列标签第86-87页
       ·基因表达的系列分析第87-88页
       ·消减杂交基因克隆技术第88-92页
       ·差异显示技术衍生的方法第92-94页
       ·差异基因的鉴定技术第94-95页
     ·卵巢癌多药耐药差异表达蛋白筛选鉴定的主要方法第95-103页
       ·噬菌体全套抗体库技术第95-96页
       ·双向凝胶电泳第96-97页
       ·差异凝胶电泳泳第97页
       ·蛋白芯片表面增强激光解析/电离飞行时间质谱法第97-99页
       ·二维液相色谱法第99-100页
       ·同位素编码亲和标签第100-101页
       ·毛细管电泳技术第101页
       ·蛋白质鉴定分析技术第101-103页
   ·卵巢癌多药耐药差异表达基因与蛋白筛选鉴定现况第103-120页
     ·卵巢癌多药耐药差异表达基因筛选鉴定现况第104-114页
       ·cDNA微阵列的应用第104-112页
       ·DD-PCR的应用第112-113页
       ·CGH的应用第113-114页
       ·SSH的应用第114页
     ·卵巢癌多药耐药差异表达蛋白筛选鉴定现况第114-120页
       ·2-DE的应用第114-117页
       ·DIGE的应用第117-118页
       ·Protein Chip/SELDT-TOF-MS的应用第118-119页
       ·ICAT的应用第119-120页
   ·结语第120-121页
第二章 卵巢上皮癌铂类耐药细胞株相关生物学指标的检测验证第121-138页
 1.前言第121页
 2.材料与方法第121-128页
   ·实验材料第121-123页
     ·细胞来源第121页
     ·主要药物及试剂第121-123页
     ·主要仪器及设备第123页
   ·实验方法第123-125页
     ·细胞株的培养第123-124页
     ·耐药细胞株耐药指数的检测验证第124-125页
   ·交叉耐药性的检测验证第125-126页
   ·细胞生长曲线及倍增时间的检测第126页
   ·细胞生长周期的检测第126页
   ·细胞凋亡的检测第126-128页
     ·流式细胞仪检测细胞凋亡的原理第126-127页
     ·细胞凋亡率的检测第127页
     ·细胞凋亡的形态学观察第127-128页
   ·统计学处理第128页
 3.结果与分析第128-136页
   ·耐药株的形态学改变第128-129页
   ·耐药细胞的IC50及RI第129-130页
   ·耐药细胞交叉耐药的IC50及RI第130-131页
   ·细胞的生长曲线及倍增时间第131-132页
   ·细胞生长周期第132-134页
   ·细胞的凋亡率第134-135页
   ·细胞凋亡的形态学改变第135-136页
 4.讨论第136-138页
第三章 卵巢上皮癌耐铂类和非耐铂类细胞间差异表达蛋白筛选鉴定研究第138-192页
 1.前言第138页
 2.材料与方法第138-147页
   ·实验材料第138-141页
     ·细胞系第138页
     ·试剂第138-141页
     ·设备与仪器第141页
   ·实验方法第141-147页
     ·总蛋白的提取第141-142页
     ·Bradford法测定蛋白浓度第142-143页
     ·差异蛋白的分离第143-146页
     ·差异蛋白的筛选第146-147页
     ·差异蛋白的鉴定第147页
 3.结果与分析第147-185页
   ·SKOV3/CB细胞和SKOV3细胞总蛋白的浓度测定结果第147-148页
     ·BSA标准曲线的绘制第147-148页
     ·SKOV3/CB细胞和SKOV3细胞总蛋白的浓度第148页
   ·SKOV3/CB细胞和SKOV3细胞总蛋白一维分离结果第148-159页
     ·SKOV3细胞总蛋白一维分离结果第148-154页
     ·SKOV3/CB细胞总蛋白一维分离结果第154-158页
     ·SKOV3/CB-1和SKOV3-1一维分离结果对比第158-159页
   ·SKOV3/CB细胞和SKOV3细胞总蛋白二维分离结果第159-163页
     ·总蛋白的二维分离结果记录图第159-161页
     ·蛋白二维分离的良好重复性第161-163页
   ·SKOV3/CB细胞和SKOV3细胞间差异表达蛋白筛选第163-169页
     ·SKOV3/CB细胞和SKOV3细胞间差异蛋白记录图第163-164页
     ·SKOV3/CB细胞和SKOV3细胞间的差异蛋白第164-169页
   ·SKOV3/CB细胞和SKOV3细胞间差异表达蛋白鉴定第169-185页
 4.讨论第185-192页
第四章 卵巢上皮癌耐铂类和非耐铂类细胞间差异表达基因筛选鉴定研究第192-221页
 1.前言第192页
 2.材料与方法第192-202页
   ·实验材料第192-194页
     ·细胞系第192页
     ·试剂第192-193页
     ·仪器及用具处理第193-194页
   ·实验方法第194-202页
     ·SKOV3/CB和SKOV3细胞间差异表达基因的筛选及生物信息学分析第194-195页
     ·SKOV3/CB细胞和SKOV3细胞间差异表达基因的验证第195-202页
 3.结果与分析第202-216页
   ·SKOV3/CB细胞与SKOV3细胞的基因芯片结果第202-206页
     ·基因芯片荧光标记图分析结果第202-203页
     ·基因芯片结果的直方图分析结果第203-204页
     ·基因芯片杂交信强度散点图分析结果第204页
     ·基因芯片MA plot图分析结果第204-205页
     ·基因芯片分层聚类图分析结果第205-206页
   ·SKOV3/CB细胞和SKOV3细胞间差异表达基因的筛选及生物信息学分析结果第206-211页
     ·SKOV3/CB细胞比SKOV3细胞上调的差异基因第206-208页
     ·SKOV3细胞比SKOV3/CB细胞上调的差异基因第208-210页
     ·SKOV3/CB细胞耐药相关基因的功能分类第210-211页
     ·进行RT-PCR验证的差异基因的确定第211页
   ·半定量RT-PCR验证差异表达基因mRNA在卵巢上皮癌耐铂类和非耐铂类细胞间的表达结果分析第211-216页
     ·提取细胞RNA的浓度及质量检测第211-212页
     ·PCR循环次数的确定第212-213页
     ·ANXA6、UGDH、ZNFl98、ERCC5、TWIST2和BIRC3在SKOV3和SKOV3/CB中的表达第213-216页
 4.讨论第216-221页
全文小结第221-223页
参考文献第223-259页

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