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猪瘟病毒E2基因部分片段的克隆和原核表达及其抗体制备

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-9页
插图和附表清单第9-10页
常用中英文缩写第10-11页
文献综述第11-23页
引言第23-25页
1 材料与方法第25-43页
   ·实验动物第25页
   ·质粒和菌种第25页
   ·主要工具酶及试剂第25页
   ·主要溶液的配制第25-30页
   ·实验仪器第30页
   ·猪瘟病毒TE2基因PCR扩增第30-32页
   ·猪瘟病毒TE2基因的克隆第32-34页
   ·猪瘟病毒TE2基因的原核表达质粒的构建第34-38页
   ·猪瘟病毒TE2基因的原核表达与鉴定第38-39页
   ·GST—TE2融合蛋白的大量提取第39-40页
   ·GST—TE2融合蛋白的定量第40页
   ·鼠抗猪瘟病毒TE2多克隆抗体的制备及鉴定第40-43页
2 结果与分析第43-50页
   ·猪瘟病毒TE2基因的克隆与鉴定第43-45页
     ·PCR扩增目的基因TE2第43页
     ·TE2基因PCR产物的单酶切鉴定第43-44页
     ·TE2基因的克隆与鉴定第44-45页
   ·猪瘟病毒TE2基因的原核表达与鉴定第45-46页
     ·原核表达重组质粒PGEX-4T-1-TE2的双酶切鉴定第45页
     ·SDS-PAGE检测诱导表达的GST-TE2融合蛋白第45-46页
     ·GST-TE2融合蛋白的可溶性鉴定第46页
   ·GST-TE2融合蛋白的提取第46-48页
     ·PGEX-4T-1-TE2诱导表达的条件优化第46-48页
     ·GST-TE2融合蛋白的大量提取结果第48页
     ·GST-TE2融合蛋白的浓度测定第48页
   ·鼠抗猪瘟病毒TE2多克隆抗体的鉴定结果第48-49页
   ·Western-blotting检测鼠抗猪瘟病毒TE2多克隆抗体特异性第49-50页
3 讨论第50-57页
   ·PCR产物的克隆与鉴定第50页
   ·原核表达重组载体的构建及鉴定第50-51页
   ·猪瘟病毒TE2基因的原核表达第51-55页
     ·表达系统的选择第51页
     ·宿主菌的选择第51-52页
     ·表达载体的选择第52-53页
     ·猪瘟病毒TE2基因的诱导表达第53-54页
     ·信号肽序列对TE2基因原核表达的影响第54-55页
     ·密码子的使用对TE2基因原核表达的影响第55页
   ·鼠抗猪瘟病毒TE2多克隆抗体的制备第55-57页
4 结论第57-58页
参考文献第58-62页
致谢第62-64页
作者简介第64页
在读期间发表的学术论文第64页

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