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单核细胞增生性李斯特杆菌单克隆抗体的制备

中文摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 文献综述第10-35页
 1、李斯特杆菌的分类第10页
 2、生物学特性第10-13页
   ·形态与染色第10页
   ·培养特性第10-11页
   ·生化反应第11-12页
   ·分型第12页
     ·血清型第12页
     ·脉冲场凝胶电泳(PULSED FIELD GEL ELECTROPHP-RESIS,PFGE)分型第12页
   ·抵抗力第12-13页
   ·李斯特杆菌的主要抗原第13页
 3、流行病学第13页
 4、致病性第13-14页
 5、流行情况第14-15页
 6、发病机理第15页
 7、实验室毒力检测:动物模型与细胞模型第15-17页
   ·小鼠模型第15-16页
     ·胃肠道途径感染第15-16页
     ·神经系统感染模型第16页
   ·其他动物模型第16页
   ·细胞模型第16-17页
 8、国内外LM 检测方法研究现状第17-26页
   ·常规法第17-22页
     ·增菌培养第18页
     ·分离第18页
     ·鉴定步骤第18-19页
     ·李斯特杆菌属的区别第19页
     ·小鼠毒力试验第19-20页
     ·协同溶血(CAMP)试验第20页
     ·LM 在普通血平板上的溶血现象第20-22页
   ·免疫学方法第22-23页
   ·分子生物学方法第23-25页
   ·显色培养基快速鉴定技术第25页
   ·数值分类鉴定和新型计数技术第25-26页
   ·全自动微生物分析系统检测第26页
 9、现阶段检测单核细胞增生性李斯特杆菌存在的问题第26页
 10、日常生活中防止LM 污染的方法第26-27页
 11、抗体生成过程中的几大理论第27-28页
   ·抗体生成的侧链学说第27页
   ·抗体生成的模板学说第27页
     ·直接模板学说第27页
     ·间接模板学说第27页
   ·自然选择学说第27-28页
   ·克隆选择学说第28页
 12、抗体工程的发展历程第28-29页
   ·第一代抗体:多克隆抗体(POLYCLONAL ANTIBODY, PCAB,简称多抗)第28页
   ·第二代抗体:单克隆抗体(MONOCLONAL ANTIBODY, MCAB,简称单抗)第28-29页
   ·第三代抗体:基因工程抗体(GENETIC ENGINEERING ANTIBODY, GEAB)第29页
 13、抗体研究历史中发生的大事第29-30页
 14、单克隆抗体的原理第30-31页
 15、杂交瘤细胞(hybrid cell)的筛选原理第31-32页
 16、单克隆抗体的制备过程图第32页
 17、单克隆抗体在临床诊断上的应用第32-35页
   ·酶联免疫吸附试验(ENZYME-LINKED IMMUNOSORBNENT ASSAY ,第33页
   ·荧光免疫分析(FLUORESCENCE IMMUNOASSAY,FIA)第33页
   ·凝集实验第33页
   ·免疫印迹(WESTERN BLOTING)第33页
   ·免疫胶体金技术(IMMUNOCOLLOIDAL GOLD,ICG)第33-34页
   ·免疫放射分析(IMMUNORADIOMETRIC ASSAY,IRMA)第34页
   ·化学发光免疫分析(CHEMILUMINESENCE IMMUNOASSAY , CLIA)第34页
     ·流式细胞术第34页
   ·免疫-聚合酶链反应(IMMUNO-POLYMERASE CHINA REACTION, IM-PCR)第34-35页
第二章 前言第35-37页
第三章 材料和方法第37-55页
 1 材料第37-39页
   ·菌种第37页
   ·细胞株第37页
   ·动物第37页
   ·主要仪器和设备第37-38页
   ·主要试剂第38页
   ·试剂配制第38-39页
 2 方法第39-47页
   ·单核细胞增生性李斯特杆菌(LM)培养基的制备第39页
   ·菌种提纯第39-40页
   ·LM 扩大培养第40页
   ·抗原制备第40-41页
   ·小鼠免疫第41页
   ·间接ELISA 方法的建立第41-42页
   ·SP2/0 骨髓瘤细胞第42页
   ·细胞融合第42-43页
   ·杂交瘤细胞筛选培养第43页
   ·杂交瘤细胞的扩大培养第43-44页
   ·杂交瘤细胞的冻存第44页
   ·单克隆抗体的大量制备第44页
   ·单克隆抗体的纯化第44-45页
   ·单克隆抗体亚类鉴定第45页
   ·杂交瘤细胞培养上清及腹水效价检测第45页
   ·配对实验第45页
   ·交叉反应第45-46页
   ·杂交瘤细胞的染色体鉴定第46页
   ·单克隆抗体的稳定性鉴定第46-47页
 3 结果第47-50页
   ·确定抗原包被浓度和酶标二抗浓度(见表2)第47页
   ·杂交瘤细胞株的建立第47-48页
   ·杂交瘤细胞筛选结果(见表3)第48页
   ·杂交瘤细胞分泌抗体亚类(见表4)第48页
   ·细胞培养上清及腹水效价(见表5)第48-49页
   ·配对实验叠加率(见表6)第49页
   ·交叉实验(见表7)第49-50页
   ·杂交瘤细胞染色体计数结果(见表8)第50页
 4 讨论第50-54页
   ·动物免疫第50-52页
     ·动物选择第51页
     ·免疫剂量第51页
     ·免疫途径第51页
     ·免疫抗原第51-52页
     ·抗原的最大注射体积(见表9)第52页
   ·小鼠杂交瘤单克隆抗体制备的技术要点及注意事项第52-53页
   ·融合率的提高第53页
   ·革兰氏染色的注意事项第53页
   ·关于单抗亚类鉴定第53-54页
   ·筛选过程中的注意事项第54页
     ·吹细胞第54页
     ·细胞计数第54页
     ·混匀细胞第54页
 5 结论第54-55页
参考文献第55-62页
在校期间发表的论文第62-63页
致谢第63页

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