| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-23页 |
| ·微生物与重金属的相互作用 | 第8-11页 |
| ·重金属在生物体中的作用与毒害 | 第8页 |
| ·微生物对重金属的抗性及其解毒机制 | 第8-11页 |
| ·铜在生物体内的作用和毒性 | 第11页 |
| ·铜在生物体内的平衡及代谢 | 第11-17页 |
| ·细菌中铜离子的代谢模式 | 第11-13页 |
| ·真核细胞中铜离子的代谢 | 第13-17页 |
| ·铜转运P-type ATPase研究进展 | 第17-22页 |
| ·P-type ATPase结构和功能 | 第17-18页 |
| ·P_(1B)-ATPase的分类 | 第18页 |
| ·P_(1B)-ATPase在生物体中的作用 | 第18-19页 |
| ·P_(1B)-ATPase的分布 | 第19-20页 |
| ·P_(1B)-ATPase重要的结构特征 | 第20-22页 |
| ·本研究的目的意义 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-36页 |
| ·材料 | 第23-26页 |
| ·菌株和载体质粒 | 第23页 |
| ·抗菌素及使用浓度 | 第23页 |
| ·培养基及培养条件 | 第23-25页 |
| ·使用的试剂 | 第25页 |
| ·本研究所使用的引物 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-36页 |
| ·Penicillium janthinillum GXCR总RNA提取和RQ DNase处理 | 第26-27页 |
| ·以Penicillium janthinillum GXCR总RNA为模板合成cDNA第一链 | 第27页 |
| ·P-type ATPase基因cDNA部分序列扩增引物的设计 | 第27-28页 |
| ·P-type ATPase基因cDNA部分序列扩增 | 第28页 |
| ·Penicillium janthinillum GXCR P-type ATPase 3′RACE | 第28-29页 |
| ·PCR产物的克隆、筛选及鉴定 | 第29页 |
| ·质粒DNA提取 | 第29-30页 |
| ·DNA片段的酶切、回收、连接 | 第30页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第30-31页 |
| ·Northern杂交分析 | 第31-33页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第33-34页 |
| ·野生型Penicillium janthinillum GXCR与干扰后突变体抗重金属能力的检测 | 第34页 |
| ·生物信息学分析 | 第34-35页 |
| ·前人工作 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-55页 |
| ·微紫青霉菌Penicillium janthinillum GXCR铜转运P-type ATPase基因cDNA部分序列的扩增、拼接 | 第36-50页 |
| ·引物的设计 | 第36页 |
| ·Penicillium janthinillum GXCR第一链cDNA的获得 | 第36-37页 |
| ·铜转运P-type ATPase基因cDNA部分序列的扩增 | 第37-39页 |
| ·铜转运P-type ATPase基因3′RACE序列的扩增 | 第39-40页 |
| ·铜转运P-type ATPase基因全长cDNA序列及推导的氨基酸序列 | 第40-43页 |
| ·铜转运P-type ATPase功能结构域分析 | 第43-44页 |
| ·铜转运P-type ATPase氨基酸序列比对分析 | 第44-49页 |
| ·铜转运P-type ATPase系统进化分析 | 第49-50页 |
| ·铜转运P-type ATPase基因的表达分析 | 第50-53页 |
| ·Cu~(2+)诱导不同时间下菌株GXCR中铜转运P-type ATPase基因的表达 | 第50页 |
| ·不同Cu~(2+)浓度诱导时菌株GXCR中铜转运P-type ATPase基因的表达 | 第50-51页 |
| ·不同Cd~(2+)浓度诱导时菌株GXCR中铜转运P-type ATPase基因的表达 | 第51-52页 |
| ·不同Ag~+浓度诱导时GXCR中铜转运P-type ATPase基因的表达 | 第52-53页 |
| ·野生型GXCR与干扰后突变体抗重金属能力的分析 | 第53-55页 |
| ·在不同金属离子培养条件下生长情况 | 第53-54页 |
| ·不同重金属对菌株生长量影响的分析 | 第54-55页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间论文发表情况 | 第64页 |
