| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 1 绪论 | 第14-36页 |
| ·课题研究背景 | 第14页 |
| ·植物耐盐碱研究 | 第14-26页 |
| ·盐碱逆境的成因 | 第14-15页 |
| ·植物抵御盐碱胁迫的生理反应机制 | 第15-22页 |
| ·耐盐碱相关基因的克隆 | 第22-24页 |
| ·盐碱胁迫下植物抵御逆境的分子机制 | 第24-26页 |
| ·锌指蛋白转录因子在植物上的研究进展 | 第26-31页 |
| ·转录因子简述 | 第27页 |
| ·锌指蛋白的结构 | 第27-28页 |
| ·锌指蛋白的分类 | 第28-29页 |
| ·锌指蛋白转录因子的调控机理 | 第29页 |
| ·锌指蛋白转录因子在植物抗逆研究中的应用 | 第29-31页 |
| ·二维液相色谱及质谱技术在植物差异蛋白质组学中的应用 | 第31-34页 |
| ·差异蛋白质组样本制备处理技术 | 第31-32页 |
| ·二维液相色谱分离技术 | 第32-33页 |
| ·质谱技术的应用 | 第33-34页 |
| ·课题研究的目的和意义 | 第34-36页 |
| 2 露地小菊耐盐碱品系的筛选及抗逆性鉴定 | 第36-49页 |
| ·材料与方法 | 第36-42页 |
| ·试材 | 第36-39页 |
| ·实验方法 | 第39-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-47页 |
| ·露地小菊耐盐碱株系的筛选 | 第42-44页 |
| ·游离脯氨酸含量的差异 | 第44页 |
| ·丙二醛(MDA)含量的差异 | 第44-45页 |
| ·超氧物岐化酶(SOD)活性的差异 | 第45-46页 |
| ·过氧化氢酶(CAT)活性的差异 | 第46页 |
| ·过氧化物酶(POD)活性的差异 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-49页 |
| 3 碳酸钠胁迫下小菊逆境蛋白的表达分析 | 第49-56页 |
| ·试材与方法 | 第49-50页 |
| ·试材及处理 | 第49页 |
| ·仪器及试剂 | 第49页 |
| ·总蛋白的提取(TCA丙酮沉淀法) | 第49页 |
| ·样品缓冲液置换 | 第49页 |
| ·一维色谱聚焦分离 | 第49-50页 |
| ·二维反相HPLC色谱分离 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-55页 |
| ·总蛋白二维液相色谱分离 | 第50-51页 |
| ·碳酸钠胁迫下样品总蛋白差异性 | 第51-53页 |
| ·差异蛋白的质谱分析 | 第53-55页 |
| ·本章小结 | 第55-56页 |
| 4 小菊锌指蛋白基因的克隆及表达分析 | 第56-80页 |
| ·试材与方法 | 第56-64页 |
| ·植物材料 | 第56页 |
| ·实验所用试剂 | 第56-58页 |
| ·研究方法 | 第58-64页 |
| ·结果与分析 | 第64-79页 |
| ·半定量RT-PCR反应体系的确定 | 第64-65页 |
| ·碳酸钠胁迫下小菊锌指蛋白的表达差异 | 第65-66页 |
| ·小菊锌指蛋白基因全长克隆 | 第66-68页 |
| ·小菊锌指蛋白基因的结构分析 | 第68-69页 |
| ·小菊锌指蛋白的同源性分析 | 第69页 |
| ·小菊锌指蛋白三维结构预测及分析 | 第69-72页 |
| ·锌指蛋白基因原核表达载体的构建及其原核表达 | 第72-76页 |
| ·小菊锌指CmSTZF的菌群耐盐碱性 | 第76-79页 |
| ·本章小结 | 第79-80页 |
| 5 锌指蛋白基因CmSTZF表达载体的构建与遗传转化 | 第80-92页 |
| ·试材与方法 | 第80-88页 |
| ·基因材料及引物 | 第80页 |
| ·载体及试剂 | 第80页 |
| ·植物材料 | 第80页 |
| ·Gateway技术构建锌指表达载体 | 第80-84页 |
| ·农杆菌转化 | 第84-85页 |
| ·烟草离体再生培养基 | 第85页 |
| ·农杆菌遗传转化体系 | 第85-86页 |
| ·转基因株系的检测 | 第86-88页 |
| ·结果与分析 | 第88-91页 |
| ·attB adapter的连接及纯化 | 第88-89页 |
| ·通过BP反应获得Entry Clones | 第89页 |
| ·通过LR反应获得Expression Clones | 第89-90页 |
| ·烟草转基因植株的获得 | 第90页 |
| ·转基因株系的PCR-sourthern鉴定 | 第90-91页 |
| ·转基因株系的耐盐碱验证 | 第91页 |
| ·本章小结 | 第91-92页 |
| 6 讨论 | 第92-95页 |
| ·植物的耐盐机制与遗传背景的相关性 | 第92-93页 |
| ·逆境差异蛋白的分离分析与植物抗逆相关基因的筛选 | 第93-94页 |
| ·锌指蛋白基因在植物抗逆研究中的调控及应用 | 第94-95页 |
| 结论 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-106页 |
| 图版 | 第106-114页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
