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一维微流控微珠阵列芯片在核酸和蛋白质分析中的应用

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-15页
第1章 绪 论第15-34页
   ·核酸和蛋白质分析的意义第15-16页
   ·核酸和蛋白质分析经典方法第16-18页
     ·核酸分析经典方法第16-18页
     ·蛋白质分析经典方法第18页
   ·核酸和蛋白质经典分析方法的局限性第18-19页
   ·微阵列芯片及其在核酸和蛋白质分析中的应用第19-24页
     ·微阵列芯片概述第19-20页
     ·微阵列芯片在核酸及蛋白质分析中的应用第20-24页
   ·微流控芯片及其在核酸和蛋白质分析中的应用第24-28页
     ·微流控芯片概述第24-26页
     ·微流控芯片在核酸和蛋白质分析中的应用第26-28页
   ·微珠技术在核酸和蛋白质分析中的应用第28-30页
   ·一维微流控微珠阵列芯片的发展第30-31页
   ·本文拟开展的研究工作第31-34页
第2章 一维微流控微珠阵列芯片用于转录水平的多基因表达检测第34-48页
   ·前言第34-35页
   ·实验部分第35-40页
     ·试剂和仪器第35-37页
     ·实验方法第37-40页
   ·结果与讨论第40-46页
     ·PDMS 芯片的制作和一维微流控核酸微珠阵列的构建第40-41页
     ·微通道的PB/DS 改性处理第41-42页
     ·芯片内短链及长链P53 CDNA 的杂交和检测第42-43页
     ·基于三明治杂交原理的一维核酸微珠阵列的灵敏度和响应范围.第43页
     ·基于一维核酸微珠阵列的多目标 CDNA 同时检测第43-45页
     ·一维微珠阵列用于多基因转录水平表达分析第45-46页
     ·RT-PCR 对芯片分析结果的验证第46页
   ·小结第46-48页
第3章 一维微流控微珠阵列芯片用于肿瘤转移相关基因表达检测第48-59页
   ·前言第48-49页
   ·实验部分第49-53页
     ·试剂和仪器第49-51页
     ·实验方法第51-53页
   ·结果与讨论第53-58页
     ·检测原理第53页
     ·一维微珠阵列对单一DNA 样品的检测第53-54页
     ·一维微珠阵列对多目标DNA 的同时检测第54-55页
     ·一维微珠阵列用于SW480 和LoVo 细胞第55-56页
     ·一维微珠阵列用于1E8 和2B4 细胞第56-57页
     ·RT-PCR 对基于一维微珠阵列的基因表达谱的验证第57-58页
   ·小结第58-59页
第4章 一维微流控微珠阵列芯片用于乙型肝炎病毒基因分型第59-67页
   ·前言第59-60页
   ·实验部分第60-62页
     ·试剂和仪器第60-61页
     ·实验方法第61-62页
   ·结果与讨论第62-66页
     ·一维微珠阵列用于HBV 基因分型原理第62-63页
     ·HBV 基因分型探针的设计第63页
     ·HBV 基因分型微珠阵列洗脱条件考察第63-64页
     ·HBV 基因分型微珠阵列灵敏度考察第64-65页
     ·HBV 基因分型微珠阵列对不同基因型目标 DNA 检测第65-66页
   ·小结第66-67页
第5章 金纳米颗粒结合酶催化荧光标记原位信号放大的高灵敏核酸检测第67-84页
   ·前言第67-68页
   ·实验部分第68-73页
     ·仪器和试剂第68-70页
     ·实验方法第70-73页
   ·结果与讨论第73-83页
     ·实验原理第73-74页
     ·金纳米颗粒的生物修饰第74-75页
     ·琼脂糖微珠和 Si02 微珠性能比较第75-76页
     ·不同 DNA1/DNA2 修饰比例的金纳米颗粒考察第76-77页
     ·Klenow 和exo- Klenow 聚合酶性能对比第77页
     ·不同 Cy3-dCTP/dCTP 比例对信号的影响第77-78页
     ·不同DNA 模板对信号的影响第78-79页
     ·聚合延伸时间考察第79-80页
     ·微珠与平面性能比较第80-81页
     ·基于一维微珠阵列的三种分析方法的比较第81页
     ·信号放大的一维微珠阵列的灵敏度、响应范围第81-82页
     ·芯片内对细胞m RNA 样品的检测第82-83页
   ·小结第83-84页
第6章 基于一维微流控微珠阵列芯片的端粒酶信号放大的蛋白表达谱分析第84-98页
   ·前言第84-85页
   ·实验部分第85-89页
     ·仪器和试剂第85-86页
     ·实验方法第86-89页
   ·结果与讨论第89-96页
     ·实验原理第89-90页
     ·鼠单克隆抗体在微珠表面的修饰第90-91页
     ·基于端粒酶作用的荧光探针制备第91-92页
     ·鲑鱼精 DNA 对荧光探针在微珠表面非特异性吸附的抑制考察..第92-93页
     ·一维微珠阵列内双抗体夹心法检测p53 蛋白第93页
     ·基于一维微珠阵列的端粒酶荧光探针检测p53 蛋白第93-95页
     ·基于一维微珠阵列端粒酶荧光探针检测细胞样品中p53 蛋白第95页
     ·基于一维微珠阵列的荧光信号放大多蛋白表达检测第95-96页
   ·小结第96-98页
第7章 微流体驱动泵在一维微流控微珠阵列芯片中的集成第98-106页
   ·前言第98-99页
   ·实验部分第99-101页
     ·仪器和试剂第99页
     ·实验方法第99-101页
   ·结果与讨论第101-105页
     ·集成微驱动泵的一维微流控微珠阵列的设计及工作原理第101-102页
     ·微通道内流体速度的监测第102页
     ·温度对流体流速的影响第102-103页
     ·蒸发面积对流体流速的影响第103-104页
     ·湿度对流体流速的影响第104页
     ·微驱动泵长时间运行时性能考察第104-105页
   ·小结第105-106页
结论第106-108页
参考文献第108-128页
附录 攻读学位期间所发表的学术论文目录第128-130页
致谢第130页

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