| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-32页 |
| 1 GDNF的分子结构 | 第13-15页 |
| 2 GDNF的产生来源及组织分布 | 第15-17页 |
| ·GDNF的产生来源 | 第15页 |
| ·GDNF的组织分布 | 第15-17页 |
| 3 GDNF的生物学功能 | 第17-21页 |
| ·对多巴胺能神经元的作用 | 第17-19页 |
| ·对运动神经元的作用 | 第19-20页 |
| ·对自主神经元和感觉神经元的作用 | 第20页 |
| ·其他生物学活性 | 第20-21页 |
| 4 GDNF在PD和其它某些病理情况下的表达及临床应用前景 | 第21-24页 |
| ·帕金森病 | 第21-22页 |
| ·运动神经元变性疾病 | 第22-23页 |
| ·脊髓损伤 | 第23-24页 |
| 5 GDNF家族的其他因子 | 第24-25页 |
| ·Neurturin(NTN) | 第24-25页 |
| ·Persephin(PSP) | 第25页 |
| ·Artemin(ART) | 第25页 |
| 6 GDNF作用机制的研究进展 | 第25-29页 |
| ·GDNF受体系统 | 第25-27页 |
| ·GDNF与其受体系统作用机制的研究 | 第27-29页 |
| 7 问题与展望 | 第29-31页 |
| ·目前存在的问题 | 第30页 |
| ·展望 | 第30-31页 |
| 8 本研究的目的与意义 | 第31-32页 |
| 第二章 研究内容 | 第32-68页 |
| 实验一 大鼠GDNF基因的克隆和原核表达 | 第32-48页 |
| 引言 | 第32页 |
| 1 材料与方法 | 第32-40页 |
| ·材料 | 第32-35页 |
| ·方法 | 第35-40页 |
| 2 结果 | 第40-46页 |
| ·GDNF cDNA片段的RT-PCR扩增结果 | 第40-42页 |
| ·鉴定结果 | 第42-43页 |
| ·GDNF基因序列测定图 | 第43-44页 |
| ·重组表达质粒pET32a-GDNF的鉴定结果 | 第44-45页 |
| ·GDNF表达产物的SDS-PAGE和Western-blot分析结果 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-48页 |
| 实验二 GDNF基因真核表达载体的构建及表达 | 第48-59页 |
| 引言 | 第48页 |
| 1 材料与方法 | 第48-53页 |
| ·材料 | 第48-50页 |
| ·方法 | 第50-53页 |
| 2 结果 | 第53-56页 |
| ·真核表达质粒的构建 | 第53页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第53-54页 |
| ·质粒的含量和纯度 | 第54-55页 |
| ·转染效果观察 | 第55页 |
| ·RT-PCR结果 | 第55-56页 |
| ·GDNF免疫组化检测 | 第56页 |
| 3 讨论 | 第56-59页 |
| ·基因转染试剂的选择 | 第56-57页 |
| ·pEGFP-GDNF在哺乳动物细胞内的表达 | 第57-59页 |
| 实验三 GDNF基因在小鼠肌肉中的表达 | 第59-68页 |
| 引言 | 第59页 |
| 1 材料与方法 | 第59-61页 |
| ·质粒 | 第59页 |
| ·试剂及配制 | 第59-60页 |
| ·实验动物 | 第60页 |
| ·重组表达质粒的纯化与鉴定 | 第60页 |
| ·基因注入方法 | 第60页 |
| ·组织切片制备 | 第60-61页 |
| ·荧光显微镜观察 | 第61页 |
| ·免疫组化 | 第61页 |
| ·图象处理系统分析图片 | 第61页 |
| 2 结果 | 第61-65页 |
| ·重组表达质粒的纯度 | 第61页 |
| ·荧光显微镜观察 | 第61-62页 |
| ·免疫组化结果 | 第62-63页 |
| ·图象分析结果 | 第63-65页 |
| 3 讨论 | 第65-68页 |
| ·重组表达质粒的纯度 | 第65页 |
| ·注射接种的途径、方法及剂量 | 第65-66页 |
| ·肌肉组织中的表达 | 第66-68页 |
| 第三章 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 附录 | 第78-79页 |
| 符号说明 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |