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百合LLAG1和LLGLO1基因--功能分析及RNAi载体构建

致谢第1-4页
摘要第4-5页
Abstract第5-10页
第一章 植物花发育基因研究进展第10-19页
 1 成花诱导第10-12页
   ·环境外因及自身内因第11页
   ·相关基因的调控第11-12页
 2 花分生组织的形成第12页
 3 花器官形成第12-17页
   ·MADS-box 基因第12-13页
   ·ABC 模型第13-14页
   ·ABCD 模型第14-15页
   ·ABCDE 模型及四因子模型第15-17页
 4 百合MADS-BOX 基因的克隆第17-18页
 5 小结第18-19页
第二章 植物基因功能研究方法第19-27页
 1 生物信息学在基因功能研究中的应用第19-20页
   ·基因功能初步发掘过程中生物信息学的应用第19页
   ·分子进化的研究第19-20页
   ·表达序列标签(expressed sequence tag, EST)第20页
 2 基因功能的转录和翻译水平的研究第20-22页
   ·基因表达系列分析第20-22页
   ·DNA 微阵列第22页
 3 从遗传学角度分析基因功能第22-26页
   ·基因诱变第23页
   ·基因功能敲除第23-25页
   ·基因超表达第25页
   ·RNA 干扰技术(RNA interfereing, RNAi)第25-26页
 4 展望第26-27页
第三章 RNAi 技术在植物研究中的运用第27-37页
 1 RNAi 研究历史第27-28页
 2 RNA 沉默的的机理第28-29页
 3 RNAi 技术的要点和流程第29-32页
   ·实现RNA 沉默的方法第30页
   ·植物中常用的RNAi 载体第30-31页
   ·ihpRNA 中intron 片段的作用第31-32页
 4 RNAi 在植物研究中的应用第32-36页
   ·RNAi 是植物功能基因组学研究的有效工具第32-33页
   ·RNAi 作为作物改良和增产的有效工具第33-35页
   ·RNAi 用于植物病毒研究第35-36页
 5 小节第36-37页
   ·RNAi 技术与反义技术的区别第36页
   ·RNAi 技术的前景第36-37页
第四章 百合花发育相关基因LLAG1 和LLGLO1 的功能分析第37-53页
 1 实验材料第37-38页
   ·植物材料第37页
   ·菌种及质粒第37页
   ·引物第37-38页
 2 实验方法第38-44页
   ·实验流程第38页
   ·总RNA 的提取第38-39页
   ·RNA 的检测第39页
   ·反转录第39-40页
   ·PCR 扩增LLAG1 和LLGLO1 cDNA 片断第40页
   ·目的片断的回收纯化第40页
   ·回收产物与T-Vecor 的连接第40-41页
   ·连接产物的转化第41页
   ·转化子的筛选和鉴定第41-43页
   ·序列测定和分析第43页
   ·表达载体的构建第43页
   ·农杆菌的转化第43页
   ·烟草的转化第43-44页
   ·转基因烟草的阳性检测和表型变异第44页
 3 结果分析第44-50页
   ·总RNA 的提取第44-45页
   ·反转录及基因cDNA 片断的扩增第45-46页
   ·T.vector-gene 的PCR 验证和酶切验证第46页
   ·测序分析第46-48页
   ·表达载体的构建第48页
   ·烟草转化第48页
   ·LLGLO1-pBI121 转基因烟草的PCR 检测及表型分析第48-50页
 4 讨论第50-53页
第五章 百合LLAG1 和LLGLO1 基因的RNAI 载体构建第53-64页
 1 材料第53页
 2 实验方法第53-56页
   ·实验流程第53页
   ·总RNA 的提取等方法第53页
   ·ihpRNA 片断的克隆第53-56页
   ·RNAi 载体构建第56页
 3 结果分析第56-60页
   ·总RNA 的提取第56页
   ·质粒图第56-57页
   ·LLAGMLIKE-P1/P1 和LLGLO1-P1/P2 cDNA 片断的扩增第57-58页
   ·序列分析第58页
   ·RNA 干扰载体的PCR 及酶切验证第58-60页
 4 讨论第60-62页
   ·植物RNA 干扰载体中ihpRNA 片断的选择第60-61页
   ·ihpRNA 片断的获得第61页
   ·实验中的对照第61-62页
   ·RNAi 效应检测第62页
 5 下一步研究展望第62-64页
参考文献第64-75页
详细摘要第75-78页

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