| 致谢 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-29页 |
| 引言 | 第12页 |
| 1. 激光显微切割技术简介 | 第12-17页 |
| ·激光显微切割技术的发展和原理 | 第12-16页 |
| ·激光显微切割技术的发展历史 | 第12-13页 |
| ·激光捕获显微切割系统 | 第13-14页 |
| ·PALM Microbeam 激光显微切割系统 | 第14页 |
| ·Leica AS LMD 激光显微切割系统 | 第14-16页 |
| ·激光显微切割技术的特点 | 第16-17页 |
| 2 激光显微切割技术下使用的组织切片技术 | 第17-20页 |
| ·总述 | 第17-18页 |
| ·样品固定的目的 | 第17页 |
| ·固定液的选择 | 第17-18页 |
| ·冰冻切片法 | 第18-19页 |
| ·石蜡切片法 | 第19页 |
| ·其他制片方法 | 第19页 |
| ·加强目标细胞识别的准确性 | 第19-20页 |
| 3. 与激光显微切割相结合的技术发展与应用 | 第20-23页 |
| ·激光显微切割技术的应用概述 | 第20-21页 |
| ·RNA 线性扩增 | 第21-22页 |
| ·SMART 技术 | 第22-23页 |
| 4 激光显微切割技术在植物研究中的应用进展 | 第23-27页 |
| ·RNA 水平基因表达分析 | 第23-24页 |
| ·研究植物与病原体的相互作用 | 第24-25页 |
| ·用激光显微切割技术进行DNA 分析 | 第25-26页 |
| ·用激光显微切割技术进行蛋白质分析 | 第26-27页 |
| 5. 展望 | 第27页 |
| 6. 本实验的研究目的和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 杉木和杨树组织冰冻切片技术 | 第29-45页 |
| 1. 材料、仪器与试剂 | 第29页 |
| 2. 实验方法 | 第29-31页 |
| ·冰冻切片的一般步骤与方法 | 第29-30页 |
| ·适合杨树、杉木组培苗的冰冻切片方法研究 | 第30页 |
| ·脱水方法 | 第30-31页 |
| ·杉木、杨树田间植株的冰冻切片方法 | 第31页 |
| 3. 结果与分析 | 第31-42页 |
| ·植物冰冻切片条件的优化 | 第31-33页 |
| ·杨树、杉木组培苗的冰冻切片方法 | 第33-41页 |
| ·脱水的效果 | 第41页 |
| ·杉木、杨树田间植株的冰冻切片 | 第41-42页 |
| 4. 讨论 | 第42-44页 |
| 5. 冰冻切片机日常使用和保养 | 第44-45页 |
| 第三章 激光显微切割收集目标细胞 | 第45-51页 |
| 1. 材料、仪器及试剂 | 第45页 |
| 2. 实验步骤 | 第45-47页 |
| ·开启Leica AS LMD 系统 | 第45页 |
| ·校准 | 第45-46页 |
| ·正式切割 | 第46-47页 |
| ·图像和数据收集 | 第47页 |
| ·取出收集管 | 第47页 |
| ·关闭系统 | 第47页 |
| 3. 结果与分析 | 第47-49页 |
| 4. 讨论 | 第49-50页 |
| 5. 激光显微切割仪器的保养和使用 | 第50-51页 |
| 第四章 提取RNA 及检测 | 第51-59页 |
| 1. 材料和试剂 | 第51页 |
| ·植物细胞 | 第51页 |
| ·生化试剂 | 第51页 |
| 2. 实验方法 | 第51-53页 |
| ·实验前的试剂准备 | 第51-52页 |
| ·实验步骤 | 第52-53页 |
| 3. 结果与分析 | 第53-56页 |
| ·RT-PCR 结果分析 | 第53-55页 |
| ·Agilent 2100 bioanalyzer 分析RNA | 第55-56页 |
| 4. 讨论 | 第56-57页 |
| ·影响RNA 产量和质量的因素 | 第56页 |
| ·检测 RNA 的方法 | 第56-57页 |
| 5. 防止RNA 降解的措施 | 第57-59页 |
| 第五章 总结与展望 | 第59-62页 |
| 1. 总结 | 第59页 |
| ·冰冻切片技术要点 | 第59页 |
| ·激光显微切割技术要点 | 第59页 |
| ·提取RNA 的技术要点 | 第59页 |
| 2. 下一步研究展望 | 第59-62页 |
| ·植物发育遗传学领域 | 第59-60页 |
| ·建立杉木形成层文库 | 第60-61页 |
| ·杨树表达谱基因芯片杂交 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |