中文摘要 | 第1-13页 |
ABSTRACT | 第13-15页 |
英文缩略词及中文对照表 | 第15-16页 |
第一章 纤维素酶的研究进展 | 第16-55页 |
引言 | 第16-17页 |
1. 纤维素的降解 | 第17-18页 |
2. 纤维素酶的研究进展 | 第18-53页 |
·纤维素酶系的组成 | 第19-21页 |
·纤维素酶的主要来源 | 第21-23页 |
·纤维素酶的来源 | 第21-22页 |
·产纤维素酶微生物的分泌特点 | 第22页 |
·产纤维素酶的微生物选育 | 第22-23页 |
·纤维素酶的生产 | 第23页 |
·纤维素酶的结构 | 第23-27页 |
·纤维素酶的分子结构 | 第24-26页 |
·纤维素酶的蛋白质结构 | 第26-27页 |
·纤维素酶的作用机理 | 第27-30页 |
·纤维素酶对不同基质的作用 | 第27-28页 |
·纤维素酶的降解机理 | 第28-30页 |
·纤维素酶的应用 | 第30-32页 |
·纤维素酶在农业上的应用 | 第30页 |
·纤维素酶在饲料工业上的应用 | 第30-31页 |
·纤维素酶在食品业上的应用 | 第31页 |
·纤维素酶在发酵、酿酒工业上的应用 | 第31页 |
·纤维素酶在环境保护方面的应用 | 第31页 |
·纤维素酶在植物遗传工程中的应用 | 第31-32页 |
·纤维素酶在纺织、洗涤剂、纸浆等其他工业上的应用 | 第32页 |
·纤维素酶的纯化研究 | 第32-33页 |
·纤维素酶的主要性质 | 第33-37页 |
·纤维素酶的分子量大小 | 第33-35页 |
·纤维素酶的等电点pI | 第35页 |
·纤维素酶的最适反应pH 值 | 第35页 |
·纤维素酶的最适反应温度与热稳定性 | 第35-36页 |
·金属离子对纤维素酶活性的影响 | 第36-37页 |
·纤维素酶的活力测定 | 第37-39页 |
·外切葡聚糖纤维二糖水解酶(CBH)活力测定 | 第38页 |
·β-葡萄糖苷酶(BG)的活力测定 | 第38-39页 |
·内切葡聚糖酶(EG)的活力测定 | 第39页 |
·纤维素酶基因的克隆 | 第39-45页 |
·纤维素酶基因的表达 | 第45-51页 |
·纤维素酶研究展望 | 第51-53页 |
3. 本研究的立题依据意义与研究内容 | 第53-55页 |
·研究的目的意义 | 第53页 |
·研究的主要的研究内容 | 第53-54页 |
·技术路线 | 第54-55页 |
第二章 疏绵状嗜热丝孢菌(THERMOMYCES LANUGINOSUS)热稳定外切Β-葡聚糖纤维二糖水解酶的纯化及特性 | 第55-80页 |
1. 材料和方法 | 第56-65页 |
·实验材料 | 第56-57页 |
·供试菌株 | 第56页 |
·培养基 | 第56页 |
·主要仪器和试剂 | 第56-57页 |
·实验方法 | 第57-65页 |
·培养条件 | 第57页 |
·酶活性测定 | 第57页 |
·酶的分离纯化 | 第57-58页 |
·蛋白质含量测定 | 第58-60页 |
·纯度鉴定 | 第60-62页 |
·蛋白质分子量的测定 | 第62-63页 |
·外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶的性质研究 | 第63-65页 |
2 结果与分析 | 第65-73页 |
·不同培养时间对外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶酶活性的影响 | 第65页 |
·疏绵状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶的分离纯化及鉴定 | 第65-68页 |
·DEAE-Sepharose 阴离子交换柱层析 | 第65-66页 |
·Phenyl-Sepharose 疏水柱层析 | 第66-67页 |
·外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶纯化过程总表 | 第67-68页 |
·外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶的主要性质 | 第68-73页 |
·外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶的分子量和纯度鉴定 | 第68页 |
·凝胶过滤层析测定酶的分子量 | 第68-69页 |
·外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶反应最适温度 | 第69-70页 |
·外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶反应最适pH 值 | 第70页 |
·外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶的热稳定性 | 第70-71页 |
·外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶的pH 稳定性 | 第71-72页 |
·不同金属离子对外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶活性的影响 | 第72页 |
·外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶的反应动力学曲线 | 第72-73页 |
3 讨论 | 第73-79页 |
·关于研究结果 | 第74-75页 |
·关于Thermomyces lanuginosus 外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶的纯化方法 | 第75-78页 |
·今后还应开展的工作 | 第78-79页 |
4 结论 | 第79-80页 |
第三章 疏绵状嗜热丝孢菌(THERMOMYCES LANUGINOSUS)热稳定Β-葡萄糖苷酶的纯化及特性 | 第80-96页 |
引言 | 第80-81页 |
1 材料与方法 | 第81-82页 |
·实验材料 | 第81页 |
·实验方法 | 第81-82页 |
·菌丝体的培养 | 第81页 |
·酶活力测定 | 第81页 |
·β-葡萄糖苷酶的分离纯化 | 第81页 |
·蛋白质含量测定 | 第81页 |
·蛋白质纯度的鉴定 | 第81页 |
·蛋白质分子量的测定 | 第81页 |
·β-葡萄糖苷酶的性质研究 | 第81-82页 |
2. 结果与分析 | 第82-90页 |
·不同培养时间对疏绵状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)产生β-葡萄糖苷酶的影响 | 第82-83页 |
·疏绵状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)β-葡萄糖苷酶的分离纯化及鉴定 | 第83-85页 |
·DEAE-Sepharose 阴离子交换柱层析 | 第83页 |
·Phenyl-Sepharose 疏水柱层析 | 第83-84页 |
·β-葡萄糖苷酶纯化过程总表 | 第84-85页 |
·β-葡萄糖苷酶的一般性质 | 第85-90页 |
3 讨论 | 第90-95页 |
·关于研究方法 | 第91-93页 |
·关于纯化研究结果 | 第93页 |
·关于Thermomyces lanuginosus β-葡萄糖苷酶的稳定性 | 第93-94页 |
·关于Thermomyces lanuginosus β-葡萄糖苷酶的活性与金属离子的关系 | 第94页 |
·今后还应开展的工作 | 第94-95页 |
4 结论 | 第95-96页 |
第四章 疏绵状嗜热丝孢菌THERMOMYCES LANUGINOSUS 热稳定外切Β-葡聚糖纤维二糖水解酶基因的CDNA 克隆及其序列分析 | 第96-129页 |
引言 | 第96-97页 |
1 材料与方法 | 第97-112页 |
·实验材料 | 第97-99页 |
·供试菌株 | 第97页 |
·菌株与质粒 | 第97页 |
·酶和生化试剂 | 第97页 |
·主要仪器 | 第97页 |
·培养基 | 第97-98页 |
·溶液配制 | 第98页 |
·PCR 引物设计 | 第98-99页 |
·实验方法 | 第99-112页 |
·总RNA 的提取(Trizol 法) | 第99页 |
·紫外检测RNA 产率和纯度 | 第99-100页 |
·反转录cDNA 第一链的合成 | 第100页 |
·目的基因cDNA 中间片段的分离 | 第100-107页 |
·目的基因5’末端的分离(5’-RACE) | 第107-111页 |
·目的基因全长cDNA 的克隆 | 第111-112页 |
·全长序列的生物信息学分析 | 第112页 |
2 结果与分析 | 第112-126页 |
·Thermomyces lanuginosus 总RNA 的提取 | 第112页 |
·Thermomyces lanuginosus 外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶基因的分离 | 第112-118页 |
·Thermomyces lanuginosus 外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶基因中间片段的分离 | 第112-114页 |
·Thermomyces lanuginosus外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶基因3’-末端cDNA的分离 | 第114-116页 |
·Thermomyces lanuginosus 外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶基因cDNA 5’-末端的分离 | 第116-117页 |
·Thermomyces lanuginosus外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶基因全长cDNA的分离及扩增片断的序列拼接 | 第117-118页 |
·外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第118-126页 |
·外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶基因的核苷酸序列分析 | 第120-121页 |
·外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶基因的氨基酸序列分析 | 第121-125页 |
·外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶氨基酸组成 | 第125-126页 |
3 讨论 | 第126-129页 |
·外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶cbh 的结构 | 第126页 |
·利用RACE 技术分离基因 | 第126-129页 |
第五章 结论和建议 | 第129-131页 |
结论 | 第129-130页 |
建议 | 第130-131页 |
参考文献 | 第131-151页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第151-152页 |
致谢 | 第152页 |