| 中文目录 | 第1-8页 |
| 英文目录 | 第8-11页 |
| 中文摘要 | 第11-13页 |
| 英文摘要 | 第13-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-34页 |
| ·Axin一种在多个信号通路中起着调节作用的构架蛋白 | 第15-22页 |
| ·概述 | 第15页 |
| ·Axin的发现 | 第15-16页 |
| ·Axin1与Axin2相比较 | 第16-17页 |
| ·Axin是一种多功能的构架蛋白 | 第17-21页 |
| ·Axin的生物学功能 | 第21-22页 |
| ·结束语 | 第22页 |
| ·JNK MAPKs信号传导途径 | 第22-31页 |
| ·简介 | 第22-23页 |
| ·JNK MAPKs家族 | 第23页 |
| ·JNK的发现 | 第23页 |
| ·JNK的分子结构 | 第23-24页 |
| ·JNK信号通路的传导模式及机制 | 第24页 |
| ·JNK的二级激酶MKK4和MKK7 | 第24-26页 |
| ·JNK的作用底物 | 第26-27页 |
| ·JNK信号通路中的构架蛋白 | 第27-29页 |
| ·JNK家族中的新成员 | 第29页 |
| ·JNK的生物学功能 | 第29-31页 |
| ·立题背景和立题意义 | 第31-34页 |
| ·Axin1能激活JNK | 第31页 |
| ·Axin1激活JNK所需要的条件 | 第31-33页 |
| ·立题意义 | 第33-34页 |
| 第二章 材料和方法 | 第34-57页 |
| ·常用药品和试剂 | 第34页 |
| ·DNA相关实验方法 | 第34-47页 |
| ·质粒载体 | 第34-36页 |
| ·pBluescript SK(-) | 第34-35页 |
| ·pCMV5 | 第35页 |
| ·pSUPER | 第35-36页 |
| ·pGEX | 第36页 |
| ·大肠杆菌(E.coli)感受态细胞的制备和DNA转化 | 第36-37页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
| ·DNA转化 | 第37页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第37-40页 |
| ·小规模质粒DNA的提取(STET煮沸法) | 第37-38页 |
| ·中等规模质粒DNA的提取 | 第38-39页 |
| ·大规模质粒DNA的提取(CsCl超速离心法) | 第39-40页 |
| ·质粒DNA的工具酶处理 | 第40-41页 |
| ·DNA的限制性内切酶消化 | 第40-41页 |
| ·线性DNA的末端平滑化 | 第41页 |
| ·线性DNA 5′端的磷酸化 | 第41页 |
| ·线性DNA 5′端磷酸基团的去除 | 第41页 |
| ·纯化DNA片段 | 第41-43页 |
| ·DNA的琼脂糖电泳 | 第42页 |
| ·从琼脂糖凝胶中回收DNA | 第42-43页 |
| ·从溶液中回收DNA | 第43页 |
| ·DNA连接反应 | 第43页 |
| ·PCR相关实验 | 第43-44页 |
| ·PCR反应 | 第43-44页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第44页 |
| ·哺乳动物细胞表达质粒的构建 | 第44-47页 |
| ·Axin1全长及D19和M8缺失突变体表达质粒的构建 | 第44-45页 |
| ·Axin2全长及各种缺失突变体表达质粒的构建 | 第45-47页 |
| ·MKK4和MKK7全长表达质粒的构建 | 第47页 |
| ·MEKK2、MEKK3全长表达质粒的构建 | 第47页 |
| ·MEKK1、MEKK4C端表达质粒的构建 | 第47页 |
| ·细胞培养及转染 | 第47-50页 |
| ·细胞培养 | 第47-48页 |
| ·细胞培养及相关溶液的配制 | 第47-48页 |
| ·细胞的传代和接种 | 第48页 |
| ·瞬时转染 | 第48-50页 |
| ·磷酸钙转染 | 第48-49页 |
| ·Lipofectamine 2000转染试剂转染 | 第49-50页 |
| ·蛋白质相关实验方法 | 第50-55页 |
| ·免疫共沉淀反应实验 | 第50-51页 |
| ·蛋白质的SDS-PAGE电泳与Western blotting分析 | 第51-53页 |
| ·免疫激酶反应实验 | 第53-54页 |
| ·GST-c-Jun融合蛋白的表达和纯化 | 第54-55页 |
| ·RNA干扰实验 | 第55页 |
| ·MKK4和MKK7 RNA干扰试验所用表达质粒的构建 | 第55页 |
| ·RNA干扰试验 | 第55页 |
| ·细胞凋亡分析 | 第55-57页 |
| 第三章 结果和讨论 | 第57-84页 |
| ·MKK4和MKK7都参与了Axin1激活JNK信号通路 | 第57-77页 |
| ·Axin1不与MKK4和MKK7直接相互结合 | 第57-58页 |
| ·利用pSUPER-MKK4和pSUPER-MKK7特异而有效地干MKK4和MKK7的表达 | 第58-59页 |
| ·MKK4和MKK7都参与了Axin1激活JNK | 第59-62页 |
| ·Axin1主要通过MKK7激活JNK | 第62-65页 |
| ·在激活JNK的过程中,Axin1对MKK7的依赖性不同于LMP-1,Sorbitol和Dishevelled | 第65-70页 |
| ·Axin1激活JNK诱导细胞凋亡主要是通过MKK7 | 第70-74页 |
| ·小结 | 第74-77页 |
| ·Axin2(Conductin)激活JNK的分子机制 | 第77-84页 |
| ·Axin2具有与Axin1相类似的分子结构 | 第77-78页 |
| ·Axin2也能激活JNK | 第78页 |
| ·Axin2分别能与MEKK1和MEKK4相互结合 | 第78-79页 |
| ·Axin2激活JNK可以被MEKK1和MEKK4显性负作用的突变体所抑制 | 第79-80页 |
| ·Axin2结合MEKK1区域的定位 | 第80-82页 |
| ·缺失MEKK1结合区域的Axin2突变体仍能与MEKK4结合 | 第82-83页 |
| ·未来的工作 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-105页 |
| 图表索引 | 第105-107页 |
| 缩略语及中英文对照 | 第107-111页 |
| 在学期间发表论文 | 第111页 |
