| 第一章 绪论 | 第1-51页 |
| ·神经系统和神经性疾病 | 第13-24页 |
| ·神经活动基本过程 | 第13-15页 |
| ·神经系统的发育 | 第15-19页 |
| ·临床神经性疾病的种类特点和治疗的困惑 | 第19-23页 |
| ·神经性疾病治疗的方法和困惑 | 第23-24页 |
| ·神经生长因子 | 第24-40页 |
| ·NGF的发现史 | 第24-26页 |
| ·NGF的基因和分子结构 | 第26-28页 |
| ·NGF的分布 | 第28-29页 |
| ·NGF的多种生物学功能 | 第29-40页 |
| ·立题依据 | 第40-42页 |
| ·参考文献 | 第42-51页 |
| 第二章 重组人神经生长因子的工程菌构建及其表达 | 第51-74页 |
| ·引言 | 第51-52页 |
| ·仪器与材料 | 第52-56页 |
| ·仪器 | 第52-53页 |
| ·实验材料 | 第53页 |
| ·溶液配制 | 第53-56页 |
| ·实验方法 | 第56-66页 |
| ·目的基因的合成和扩增 | 第56-57页 |
| ·PCR产物的酶切和纯化 | 第57-58页 |
| ·表达载体的构建 | 第58-60页 |
| ·目的基因与载体的连接 | 第60-62页 |
| ·工程菌的筛选和检定 | 第62页 |
| ·目的蛋白的表达和鉴定 | 第62-66页 |
| ·结果和讨论 | 第66-71页 |
| ·基因序列测定 | 第66-67页 |
| ·工程菌的形态和特性 | 第67页 |
| ·质粒酶切图谱分析 | 第67-68页 |
| ·表达的目的产物的特异性鉴别 | 第68-69页 |
| ·表达的目的产物N末端氨基酸序列分析 | 第69-70页 |
| ·表达的目的产物的氨基酸组成分析 | 第70页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE结果 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| ·参考文献 | 第72-74页 |
| 第三章 重组人神经生长因子的发酵工艺研究 | 第74-97页 |
| ·引言 | 第74-75页 |
| ·仪器与材料 | 第75-78页 |
| ·主要仪器 | 第75页 |
| ·实验材料 | 第75-76页 |
| ·溶液的配制 | 第76-78页 |
| ·实验方法 | 第78-82页 |
| ·SDS-PAGE电泳方法 | 第78页 |
| ·种子液制备 | 第78页 |
| ·发酵过程 | 第78-79页 |
| ·发酵条件 | 第79-80页 |
| ·工程菌的传代稳定性 | 第80页 |
| ·接种量 | 第80页 |
| ·诱导时机、时间和诱导剂的浓度 | 第80-81页 |
| ·补料成分和速度 | 第81页 |
| ·葡萄糖和乳酸的测定 | 第81页 |
| ·发酵工艺的放大和发酵动力学 | 第81-82页 |
| ·结果和讨论 | 第82-94页 |
| ·工程菌的原始、主代和工作批的检定结果 | 第82-84页 |
| ·rhNGF工程菌在贮存复苏条件下的稳定性试验 | 第84-85页 |
| ·rhNGF工程菌用平板连续传代的稳定性 | 第85-87页 |
| ·rhNGF生产用种子库外源因子检查 | 第87-88页 |
| ·培养条件的确定 | 第88-90页 |
| ·诱导条件确定结果 | 第90-92页 |
| ·发酵动力学曲线分析 | 第92-94页 |
| ·小结 | 第94-95页 |
| ·参考文献 | 第95-97页 |
| 第四章 重组人神经生长因子的纯化和理化性质的研究 | 第97-124页 |
| ·引言 | 第97-98页 |
| ·仪器与材料 | 第98-100页 |
| ·主要仪器 | 第98页 |
| ·实验材料 | 第98-99页 |
| ·溶液的配制 | 第99-100页 |
| ·实验方法 | 第100-106页 |
| ·粗提 | 第100-101页 |
| ·精提 | 第101-103页 |
| ·目的蛋白的纯度 | 第103-104页 |
| ·目的蛋白的特异性 | 第104页 |
| ·N端氨基酸序列分析 | 第104页 |
| ·目的蛋白的其它理化性质分析 | 第104-105页 |
| ·目的蛋白的相关结构分析 | 第105-106页 |
| ·结果和讨论 | 第106-121页 |
| ·各步纯化条件的确定 | 第106-108页 |
| ·主要纯化步骤的SDS-PAGE的结果分析 | 第108-110页 |
| ·各步纯化后蛋白纯度、收率 | 第110-112页 |
| ·目的蛋白的纯度分析 | 第112-114页 |
| ·目的蛋白的分子量和等电点 | 第114-115页 |
| ·目的蛋白其它的检定结果 | 第115-119页 |
| ·制剂的配方研究结果 | 第119-121页 |
| ·小结 | 第121-123页 |
| ·参考文献 | 第123-124页 |
| 第五章 重组人神经生长因子体内及体外生物活性的研究 | 第124-158页 |
| ·引言 | 第124页 |
| ·仪器与材料 | 第124-127页 |
| ·主要仪器 | 第124-125页 |
| ·实验材料 | 第125-126页 |
| ·溶液配制 | 第126-127页 |
| ·实验方法 | 第127-139页 |
| ·MTT法 | 第127-128页 |
| ·鸡胚神经节法 | 第128-131页 |
| ·化学中毒造成大鼠中毒性周围神经病变 | 第131-136页 |
| ·家兔尺神经机械损伤小鼠周围神经病变法 | 第136页 |
| ·大鼠缺氧缺血性病变造模 | 第136-137页 |
| ·大鼠老年性痴呆模型的建立和给药方案 | 第137-138页 |
| ·rhNGF在小鼠体内的动力学、组织分布实验方法 | 第138-139页 |
| ·结果与讨论 | 第139-154页 |
| ·体外生物活性测定方法 MTT的结果 | 第139-140页 |
| ·体外生物活性测定方法鸡胚神经节的结果 | 第140-143页 |
| ·NGF治疗化学中毒性围神经病变结果 | 第143-149页 |
| ·rhNGF治疗新生大鼠缺氧性病变结果 | 第149-151页 |
| ·rhNGF治疗小鼠机械性损伤周围神经病变结果 | 第151页 |
| ·rhNGF延缓大鼠老年性痴呆的结果 | 第151-152页 |
| ·rhNGF药代动力学实验结果 | 第152-154页 |
| ·小结 | 第154-155页 |
| ·参考文献 | 第155-158页 |
| 附录 | 第158-161页 |
| 作者简介 | 第158页 |
| 博士期间工作 | 第158-161页 |
| 中文摘要 | 第161-165页 |
| 英文摘要 | 第165-173页 |
| 致谢 | 第173页 |