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柑橘原生质体融合及体细胞杂种核质遗传研究

摘要第1-8页
Abstract第8-11页
缩略词表第11-12页
第一章 文献综述第12-26页
 1 问题的提出第12-13页
 2 前人研究进展第13-25页
   ·柑橘原生质体融合研究进展第13-17页
     ·柑橘原生质体融合方法第14页
     ·柑橘原生质体融合方式第14-16页
       ·柑橘对称融合研究第14-15页
       ·柑橘非对称融合研究第15-16页
       ·柑橘亚原生质体融合研究第16页
     ·柑橘体细胞杂种在育种上的应用第16-17页
   ·柑橘体细胞杂种核质遗传研究进展第17-22页
     ·柑橘体细胞杂种核遗传第17-21页
     ·柑橘体细胞杂种胞质遗传第21-22页
       ·柑橘体细胞杂种线粒体遗传第21页
       ·柑橘体细胞杂种叶绿体遗传第21-22页
   ·植物亚原生质体分离及融合研究进展第22-25页
     ·植物胞质体分离及融合第22-23页
       ·植物胞质体分离第22-23页
       ·“胞质体-原生质体”融合第23页
     ·植物微原生质体分离及融合第23-25页
       ·植物微原生质体分离第24页
       ·微原生质体融合第24-25页
 3 本研究的目的和内容第25-26页
第二章 柑橘胞质体分离与融合研究第26-47页
 1 前言第26页
 2 材料与方法第26-33页
   ·材料第26页
   ·试验方法第26-33页
     ·原生质体分离与纯化第26-27页
     ·胞质体分离第27页
     ·胞质体鉴定第27-28页
     ·“胞质体-原生质体”融合,培养及再生第28页
     ·再生产物鉴定第28-33页
       ·再生材料的FCM分析第28页
       ·细胞学检查第28-29页
       ·总DNA的提取第29页
       ·RAPD分析第29页
       ·SSR分析第29-30页
       ·AFLP分析第30-32页
       ·CAPS分析第32-33页
 3 结果与分析第33-44页
   ·温州蜜柑胞质体分离体系的建立第33-38页
     ·离心后胞质体分离层的形成第33页
     ·分离参数的优化第33-37页
       ·离心转速第33-35页
       ·离心时间第35页
       ·离心温度第35-36页
       ·梯度组成及体积第36-37页
     ·胞质体的鉴定与培养第37-38页
   ·“胞质体-原生质体”融合和再生体系建立第38-40页
     ·电融合参数的优化第38页
     ·融合再生情况第38-40页
   ·“国庆1号+默科特橘橙”再生物的杂种鉴定第40-44页
     ·倍性分析第40-41页
     ·核来源第41-42页
     ·再生胚状体的胞质来源第42-44页
 4 讨论第44-47页
   ·甘露醇-蔗糖梯度超速离心方法用于分离胞质体的可行性第44页
   ·分离大量高纯度的植物胞质体可采用的模式程序第44-45页
   ·本研究中未能得到再生植株的可能原因第45-46页
   ·“胞质体-原生质体”融合体系应用于胞质基因转移的前景第46-47页
第三章 柑橘转移CMS性状的非对称融合第47-62页
 1 前言第47页
 2 材料与方法第47-49页
   ·材料第47页
   ·试验方法第47-49页
     ·原生质体分离与纯化第48页
     ·原生质体预处理第48页
       ·紫外线(UV)辐射第48页
       ·碘乙酸(IA)处理第48页
     ·原生质体活力测定和核形态观察第48页
     ·紫外线照射原生质体的DNA片段化检测第48页
     ·紫外线处理原生质体做饲养层培养原生质体第48-49页
     ·原生质体融合、培养及再生第49页
     ·再生产物鉴定第49页
 3 结果与分析第49-59页
   ·紫外线(UV)对原生质体的影响第49-51页
     ·紫外线对原生质体活力和再生的影响第49-50页
     ·紫外线照射原生质体引起的DNA片断化第50-51页
   ·紫外线处理的原生质体做饲养层培养目标原生质体的效果第51-52页
   ·FDA和H33258双染色统计原生质体活力第52-54页
   ·非对称融合再生与鉴定第54-59页
     ·非对称融合再生情况第54-55页
     ·“国庆1号+锦橙”再生物的杂种鉴定第55-59页
       ·倍性分析第55-56页
       ·核组成分析第56-57页
       ·胞质DNA分析第57-59页
 4 讨论第59-62页
   ·紫外线用于植物非对称体细胞杂交的前景第59-60页
   ·植物体细胞杂种的再生优势现象第60-62页
第四章 柑橘体细胞杂种核质遗传分析第62-81页
 1 前言第62页
 2 材料与方法第62-64页
   ·材料第62页
   ·试验方法第62-64页
     ·倍性分析第62页
     ·总DNA的提取、SSR分析、CAPS分析第62-64页
     ·SRAP分析第64页
 3 结果与分析第64-77页
   ·属间体细胞杂种组合核质分析第64-71页
     ·澳洲指橘+酸橙第64-68页
       ·倍性分析第66页
       ·核DNA来源第66-68页
       ·胞质DNA来源第68页
     ·丹西红橘+长寿金柑第68-71页
       ·倍性分析第68-69页
       ·核DNA来源第69-70页
       ·胞质DNA来源第70-71页
   ·种间体细胞杂种组合核质分析第71-77页
     ·沙漠蒂甜橙+酸橙第71-74页
       ·倍性分析第71-72页
       ·核DNA来源第72-73页
       ·胞质DNA来源第73-74页
     ·丹西红橘+红江橙第74-77页
       ·倍性分析第74页
       ·核DNA来源第74-76页
       ·胞质DNA来源第76-77页
 4 讨论第77-81页
   ·对称融合产生二倍体叶肉亲本型胞质杂种的原因第77-79页
   ·柑橘对称融合方式产生非对称体细胞杂种的现象第79-80页
   ·体细胞杂种的SRAP标记鉴定第80-81页
参考文献第81-94页
致谢第94-95页
附录 攻读博士学位期间发表论文第95页

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