| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-30页 |
| ·马铃薯概述 | 第15-17页 |
| ·马铃薯病毒病 | 第17-21页 |
| ·马铃薯病毒简介 | 第17-21页 |
| ·苜蓿花叶病毒 | 第18页 |
| ·黄瓜花叶病毒 | 第18-19页 |
| ·马铃薯卷叶病毒 | 第19页 |
| ·马铃薯A 病毒和马铃薯Y 病毒 | 第19页 |
| ·马铃薯M 病毒和马铃薯S 病毒 | 第19-20页 |
| ·马铃薯X 病毒 | 第20页 |
| ·烟草花叶病毒 | 第20页 |
| ·烟草环斑病毒 | 第20-21页 |
| ·病毒病导致马铃薯退化的原因及防治措施 | 第21页 |
| ·马铃薯病毒的检测研究进展 | 第21-28页 |
| ·传统的生物学方法 | 第21-22页 |
| ·指示植物检测法 | 第21-22页 |
| ·电镜技术 | 第22页 |
| ·以蛋白为基础的免疫学方法 | 第22-23页 |
| ·ELISA | 第22-23页 |
| ·DIBA | 第23页 |
| ·核酸介导的分子生物学检测方法 | 第23-28页 |
| ·dsRNA 电泳技术 | 第23-24页 |
| ·PCR 检测技术 | 第24-26页 |
| ·普通PCR 检测技术 | 第24页 |
| ·多重PCR 检测技术 | 第24-25页 |
| ·荧光定量PCR 检测 | 第25-26页 |
| ·核酸分子杂交技术 | 第26-28页 |
| ·核酸斑点杂交技术 | 第26页 |
| ·基因芯片技术 | 第26-28页 |
| ·研究的目的和意义 | 第28页 |
| ·研究的内容 | 第28页 |
| ·技术路线 | 第28-29页 |
| ·研究的创新点、重点、难点和关键问题 | 第29-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-45页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·毒源及其田间样品 | 第30页 |
| ·主要酶和试剂 | 第30页 |
| ·引物与寡核苷酸设计 | 第30-34页 |
| ·特异性引物的设计 | 第30-31页 |
| ·鉴别探针的设计 | 第31-32页 |
| ·Zip-code 和通用序列的筛选 | 第32页 |
| ·LDR 探针序列的确定 | 第32-34页 |
| ·十种马铃薯病毒的总RNA 提取及其检测 | 第34页 |
| ·LDR 反应模板的获得 | 第34-36页 |
| ·单个病毒PCR 目的片段模板获得 | 第34-35页 |
| ·PCR 目的片段的连接与转化 | 第35页 |
| ·重组质粒的转化、提取及其鉴定 | 第35页 |
| ·RT 模板的获得 | 第35-36页 |
| ·LDR-PCR 反应体系的建立 | 第36-43页 |
| ·单重LDR-PCR 基因芯片检测的特异性 | 第38-39页 |
| ·单病毒多重LDR-PCR 优化 | 第39-40页 |
| ·单病毒多重LDR-PCR 不同酶量优化 | 第39-40页 |
| ·单病毒多重LDR-PCR 不同浓度探针优化 | 第40页 |
| ·单病毒多重LDR-PCR 不同循环数优化 | 第40页 |
| ·单病毒多重LDR-PCR 不同退火时间优化 | 第40页 |
| ·单病毒多重LDR-PCR 不同退火温度优化 | 第40页 |
| ·单病毒多重LDR-PCR 基因芯片检测特异性 | 第40-42页 |
| ·单病毒多重LDR-PCR 基因芯片最低检测模板量测定 | 第42页 |
| ·两种病毒模板的多重LDR-PCR 基因芯片反应灵敏度检测 | 第42页 |
| ·十种病毒模板的多重LDR-PCR 基因芯片检测 | 第42-43页 |
| ·芯片的制备 | 第43页 |
| ·点样 | 第43页 |
| ·烘干 | 第43页 |
| ·玻片杂交与分析 | 第43-44页 |
| ·预杂交 | 第43页 |
| ·杂交 | 第43页 |
| ·扫描分析 | 第43-44页 |
| ·田间样本的检测 | 第44-45页 |
| 第三章 结果与分析 | 第45-58页 |
| ·十种马铃薯病毒总RNA 提取 | 第45页 |
| ·十种马铃薯病毒RT-PCR 扩增 | 第45-46页 |
| ·单重LDR-PCR 特异性检测 | 第46-47页 |
| ·不同酶量单病毒多重LDR-PCR | 第47页 |
| ·不同浓度探针单病毒多重LDR-PCR | 第47-48页 |
| ·不同循环数单病毒多重LDR-PCR | 第48-49页 |
| ·不同退火时间单病毒多重LDR-PCR | 第49页 |
| ·不同退火温度单个病毒多重LDR-PCR | 第49-50页 |
| ·单病毒多重LDR-PCR 特异性检测 | 第50-51页 |
| ·单病毒多重LDR-PCR 模板灵敏度检测 | 第51-53页 |
| ·两种混合病毒多重LDR-PCR 基因芯片的检测灵敏度 | 第53页 |
| ·十种病毒多重LDR-PCR 基因芯片检测 | 第53-54页 |
| ·田间样本检测 | 第54-58页 |
| 第四章 讨论与分析 | 第58-66页 |
| ·多重LDR-PCR 检测方法的选择 | 第58-60页 |
| ·通用寡核苷芯片杂交技术的选择 | 第60-62页 |
| ·Cy5-dCTP 荧光标记不对称PCR 检测方法的选择 | 第62-63页 |
| ·田间样品的检测 | 第63-64页 |
| ·存在的问题及其展望 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 攻读硕士期间发表（投稿）的论文 | 第74页 |
