| 原创性声明 | 第1页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第3-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 上篇 | 第14-47页 |
| 文献综述 | 第14-47页 |
| 第一章 植物对病原菌的非寄主抗性 | 第15-30页 |
| 1 已知非寄主抗性组成 | 第15-19页 |
| ·预存性的或被动的防卫机制 | 第15-16页 |
| ·诱导的植物防卫机制 | 第16-17页 |
| ·植物防卫信号 | 第17-18页 |
| ·抗病基因 | 第18-19页 |
| 2 非寄主抗性的类型 | 第19-21页 |
| ·Ⅰ型非寄主抗性 | 第20-21页 |
| ·Ⅱ型非寄主抗性 | 第21页 |
| 3 非寄主抗性与基因对基因抗性的相似之处 | 第21-22页 |
| 4 讨论与展望 | 第22-23页 |
| 参考文献 | 第23-30页 |
| 第二章 植物病原菌激发子及其和植物互作机制研究 | 第30-47页 |
| 一、植物病原菌激发子的种类和性质 | 第30-34页 |
| 1 生物激发子 | 第30-34页 |
| ·寡糖 | 第30-31页 |
| ·糖蛋白 | 第31-32页 |
| ·多肽和蛋白质 | 第32-34页 |
| 2 非生物激发子和物理刺激因子 | 第34页 |
| 二、激发子诱导植物抗病性机制 | 第34-37页 |
| 1 激发子信号识别和信号传导 | 第34-36页 |
| ·信号识别(signal recognition) | 第34-35页 |
| ·信号传导(signal transduction) | 第35-36页 |
| 2 防卫基因的表达调控及抗病反应 | 第36-37页 |
| 三、疫霉菌激发子基因的克隆 | 第37-39页 |
| 四、棉疫病菌与非寄主植物研究 | 第39页 |
| 参考文献 | 第39-47页 |
| 下篇 | 第47-116页 |
| 研究内容 | 第47-116页 |
| 第一章 棉疫病菌诱导非寄主过敏反应激发子基因的克隆 | 第48-65页 |
| 1.材料和方法 | 第50-55页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·供试菌株 | 第50页 |
| ·供试药剂和培养基 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-53页 |
| ·棉疫病菌培养 | 第51页 |
| ·菌丝体RNA的提取(TRIzol法) | 第51页 |
| ·cDNA文库的构建 | 第51-53页 |
| ·电转化方法 | 第53-54页 |
| ·电转化感受态细菌的制备 | 第53-54页 |
| ·电击穿孔转化 | 第54页 |
| ·质粒提取方法 | 第54页 |
| ·PCR验证阳性克隆 | 第54页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备和转化方法 | 第54-55页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第54页 |
| ·农杆菌感受态细胞的转化方法 | 第54-55页 |
| ·诱导烟草过敏反应激发子基因克隆的筛选 | 第55页 |
| ·阳性克隆的测序和序列分析 | 第55页 |
| 2 结果 | 第55-59页 |
| ·cDNA表达文库的构建 | 第55-56页 |
| ·诱导烟草过敏反应的激发子基因阳性克隆筛选 | 第56-57页 |
| ·序列比对及生物信息学分析 | 第57-59页 |
| 3 讨论 | 第59-62页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
| 第二章 棉疫病菌elicitin基因功能研究 | 第65-82页 |
| 1.材料和方法 | 第66-72页 |
| ·供试棉疫病菌菌株 | 第66-67页 |
| ·基因组DNA的提取方法 | 第67页 |
| ·Southern杂交分析 | 第67-69页 |
| ·大肠杆菌JM109、BL21感受态细胞的制备 | 第69页 |
| ·elicitin基因原核表达 | 第69-70页 |
| ·供试烟草及激发子处理 | 第70页 |
| ·诱导系统抗病性分析 | 第70页 |
| ·烟草PR基因表达分析方法 | 第70-71页 |
| ·棉疫病菌与棉花亲和互作中Pbelicitin基因的表达情况 | 第71-72页 |
| 2 结果 | 第72-78页 |
| ·棉疫病菌elicitin基因的序列分析 | 第72-73页 |
| ·Pbelicitin原核表达的生物活性 | 第73-74页 |
| ·Pbelicitin原核表达产物诱导抗性 | 第74-75页 |
| ·水杨酸参与Pbelicitin的诱导抗性而不参与其诱导过敏反应 | 第75-76页 |
| ·乙烯不参与Pbelicitin的诱导抗性和过敏反应 | 第76-77页 |
| ·Pbelicitin基因在亲和性互作中的表达情况 | 第77-78页 |
| 3 讨论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-82页 |
| 第三章 棉疫病菌RAB基因功能研究 | 第82-95页 |
| 1 材料和方法 | 第83-86页 |
| ·供试棉疫病菌菌株和烟草 | 第83页 |
| ·棉疫病菌菌株DNA和RNA的提取方法 | 第83页 |
| ·棉疫病菌PbRAB基因的克隆及序列分析 | 第83-84页 |
| ·Southern杂交分析方法 | 第84页 |
| ·大肠杆菌JM109、BL21感受态细胞的制备 | 第84页 |
| ·PbRAB基因原核表达 | 第84-85页 |
| ·H_2O_2的原位测定 | 第85页 |
| ·烟草PR基因表达分析方法 | 第85页 |
| ·RAB基因的功能域研究 | 第85页 |
| ·突变体RABⅠ,RABⅡ,RABⅢ,RABⅣ功能分析 | 第85-86页 |
| 2 结果 | 第86-91页 |
| ·棉疫病菌Rab基因克隆与序列分析 | 第86页 |
| ·RAB基因的Southern杂交分析 | 第86页 |
| ·RAB基因原核表达蛋白引起烟草H_2O_2积累和坏死反应 | 第86-90页 |
| ·RAB基因原核表达蛋白注射烟草引起烟草PR1基因的表达 | 第90-91页 |
| ·RAB基因的功能域研究 | 第91页 |
| 3 讨论 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-95页 |
| 第四章 H_2O_2介导PB90诱导的不结球白菜细胞死亡和防卫反应 | 第95-116页 |
| 1.材料与方法 | 第97-100页 |
| ·供试植物与菌株及接种 | 第97-98页 |
| ·H_2O_2的测定 | 第98页 |
| ·PAL活性测定 | 第98页 |
| ·脂质过氧化测定 | 第98页 |
| ·电镜分析 | 第98-99页 |
| ·H_2O_2的原位测定 | 第99页 |
| ·细胞死亡测定 | 第99页 |
| ·离子渗漏测定 | 第99页 |
| ·PR基因表达分析 | 第99-100页 |
| 2 结果 | 第100-108页 |
| ·PB90诱导不结球白菜程序性细胞死亡 | 第100-102页 |
| ·PB90诱导不结球白菜H_2O_2的进发 | 第102-103页 |
| ·PB90诱导的H_2O_2动态平衡的改变先于PCD | 第103-105页 |
| ·PB90处理后PR-1和chitinase表达 | 第105-106页 |
| ·PB90诱导不结球白菜对C. higginsianum和E. carotovora var. carotovora的抗性 | 第106-107页 |
| ·激发子PB90诱导PAL和MDA活性提高 | 第107页 |
| ·抗氧化剂和DPI抑制PR-1和Chitinase基因的表达 | 第107-108页 |
| 3 讨论 | 第108-111页 |
| 参考文献 | 第111-116页 |
| 博士期间发表的论文 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
