| 独创性说明 | 第1-3页 |
| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-40页 |
| ·染料的分类、结构与发色机理 | 第12页 |
| ·染料的分类 | 第12页 |
| ·染料结构与发色机理 | 第12页 |
| ·偶氮染料的生产应用以及对环境的危害 | 第12-17页 |
| ·我国现阶段染料生产以及使用状况 | 第13页 |
| ·偶氮染料的其他应用方式 | 第13-14页 |
| ·偶氮染料的危害以及对策 | 第14-16页 |
| ·各国对于偶氮染料的相关政策 | 第16-17页 |
| ·含偶氮染料废水的处理方法 | 第17-29页 |
| ·物理吸附法 | 第17页 |
| ·化学法 | 第17-18页 |
| ·生物法 | 第18页 |
| ·环境因素对偶氮染料生物脱色的影响 | 第18-20页 |
| ·偶氮染料厌氧脱色机理以及偶氮还原酶 | 第20-22页 |
| ·编码偶氮还原酶基因的克隆与表达 | 第22-24页 |
| ·本实验室前期对偶氮还原酶的研究进展 | 第24-29页 |
| ·红假单胞菌属在污染治理中的应用 | 第29-32页 |
| ·球形红细菌(Rhodobacter sphaeroides) | 第29-30页 |
| ·部分污水处理应用研究 | 第30页 |
| ·产氢及其与污水处理的结合 | 第30-31页 |
| ·产氢机理以及抑制因素 | 第31-32页 |
| ·基因工程菌 | 第32-37页 |
| ·基因工程菌概述 | 第32-33页 |
| ·基因工程菌在环境领域的应用 | 第33-35页 |
| ·基因工程应用实例 | 第35-36页 |
| ·基因工程菌的稳定性 | 第36-37页 |
| ·基因工程菌的安全问题 | 第37页 |
| ·本论文研究内容及意义 | 第37-40页 |
| ·前期工作有待解决的问题及工程菌构建的提出 | 第37-38页 |
| ·受体菌、穿梭载体的确定 | 第38页 |
| ·本文的研究目的 | 第38页 |
| ·本文的研究内容 | 第38-40页 |
| 2 球形红细菌及其胞内粗酶对模拟染料废水的脱色研究 | 第40-57页 |
| ·材料与方法 | 第40-47页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·培养基的配制及接种方法 | 第41-42页 |
| ·菌体生长及染料吸光度和脱色率的测定 | 第42页 |
| ·偶氮还原酶粗酶的提取 | 第42-43页 |
| ·Red Sepharose CL-6B凝胶纯化粗酶 | 第43-44页 |
| ·偶氮还原酶的凝胶电泳 | 第44-46页 |
| ·蛋白含量测定 | 第46页 |
| ·酶活分析体系 | 第46-47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-56页 |
| ·球形红细菌对偶氮染料的脱色 | 第47-50页 |
| ·粗酶的提取和简单纯化 | 第50-51页 |
| ·温度对酶活的影响 | 第51-53页 |
| ·pH对酶活的影响 | 第53-54页 |
| ·粗酶动力学 | 第54-56页 |
| ·本章小结 | 第56-57页 |
| 3 沼泽红假单胞菌对模拟染料废水的脱色研究 | 第57-66页 |
| ·材料与方法 | 第57-58页 |
| ·实验材料 | 第57页 |
| ·菌体生长及染料吸光度和脱色率的测定 | 第57页 |
| ·阴离子表面活性剂测定方法 | 第57-58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-65页 |
| ·菌体在染料废水中的生长、脱色情况 | 第58-62页 |
| ·阴离子表面活性剂对该菌影响 | 第62-65页 |
| ·本章小结 | 第65-66页 |
| 4 沼泽红假单胞菌野生质粒的提取与鉴定 | 第66-75页 |
| ·材料与方法 | 第66-67页 |
| ·菌种来源 | 第66页 |
| ·实验仪器与试剂 | 第66页 |
| ·沼泽红假单胞菌质粒提取方法 | 第66-67页 |
| ·引物合成、反向PCR及质粒测序 | 第67页 |
| ·Genbank序列号 | 第67页 |
| ·结果与讨论 | 第67-74页 |
| ·Rhodopseudomonas palustris AS1.2352质粒提取方法的改进 | 第68-69页 |
| ·Rhodopseudomonas palustris AS1.2352野生质粒的提取和鉴定 | 第69-74页 |
| ·本章小结 | 第74-75页 |
| 5 表达偶氮还原酶穿梭质粒的构建 | 第75-93页 |
| ·材料与方法 | 第75-82页 |
| ·实验材料 | 第75-76页 |
| ·基本实验操作 | 第76-79页 |
| ·穿梭克隆载体的获取以及保存 | 第79页 |
| ·目的基因片段的构建 | 第79-81页 |
| ·载体的鉴定与定点突变 | 第81-82页 |
| ·结果与讨论 | 第82-92页 |
| ·穿梭质粒构建路线 | 第82-84页 |
| ·插入片段的设计与获取 | 第84-85页 |
| ·穿梭克隆载体的获取以及保存 | 第85-86页 |
| ·穿梭表达质粒的构建 | 第86-88页 |
| ·质粒鉴定 | 第88-90页 |
| ·定点突变 | 第90-92页 |
| ·本章小结 | 第92-93页 |
| 6 偶氮染料降解基因工程菌的构建及其对模拟染料废水的脱色研究 | 第93-106页 |
| ·材料与方法 | 第93-95页 |
| ·实验材料 | 第93-94页 |
| ·实验方法 | 第94-95页 |
| ·结果与讨论 | 第95-105页 |
| ·基因工程菌的构建：导入质粒载体 | 第95-97页 |
| ·染料浓度对工程菌生长与脱色的影响 | 第97-100页 |
| ·pH对工程菌生长与脱色的影响 | 第100-101页 |
| ·温度对工程菌生长与脱色的影响 | 第101-102页 |
| ·SDS对工程菌生长与脱色的影响 | 第102-104页 |
| ·工程菌胞内粗酶的偶氮还原酶活性 | 第104-105页 |
| ·本章小节 | 第105-106页 |
| 7 结论与展望 | 第106-109页 |
| ·主要结论 | 第106-107页 |
| ·本论文的创新之处 | 第107-108页 |
| ·有待进一步研究的内容 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-120页 |
| 创新点摘要 | 第120-121页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第121-122页 |
| 附录A Rhodopseudomonas palustris野生质粒pRPSZY测序图 | 第122-128页 |
| 附录B Rhodopseudomonas palustris野生质粒pRPSZY登陆GeneBank | 第128-130页 |
| 附录C Rhodobacter sphaeroides偶氮还原酶基因 | 第130-131页 |
| 附录D 沼泽红假单胞菌cbbM基因的核苷酸序列及编码的氨基酸序列 | 第131-133页 |
| 致谢 | 第133-134页 |
| 大连理工大学学位论文版权使用授权书 | 第134页 |
