| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 1.前言 | 第8-15页 |
| ·引言 | 第8-9页 |
| ·转录辅助复合体SAGA在转录起始的作用 | 第9-11页 |
| ·SAGA复合体成分蛋白的作用 | 第11-13页 |
| ·Tra1蛋白的功能 | 第13-14页 |
| ·研究目标及意义： | 第14-15页 |
| 2.材料与方法 | 第15-37页 |
| ·实验材料 | 第15-20页 |
| ·质粒及菌种 | 第15页 |
| ·酶及化学试剂： | 第15页 |
| ·主要仪器设备： | 第15-16页 |
| ·培养基： | 第16-20页 |
| ·实验方法： | 第20-37页 |
| ·引物设计与PCR扩增 | 第20-21页 |
| ·DH5a、BL21(DB)pLysS感受态细胞的制备与转化 | 第21-22页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第22-23页 |
| ·细菌诱导 | 第23页 |
| ·提取酵母基因组DNA | 第23-24页 |
| ·克隆酵母的Mad1及Mad2基因 | 第24-26页 |
| ·克隆表达SAGA或NuA4复合体中的11个成分蛋白 | 第26-31页 |
| ·酵母转化 | 第31-32页 |
| ·在体外构建Tra1基因点突变 | 第32-33页 |
| ·利用同源重组构建内源Tra1基因缺失的突变酵母菌种 #14 | 第33-34页 |
| ·plasmid shuffling | 第34-35页 |
| ·Spotting assay | 第35-37页 |
| 3.实验结果 | 第37-49页 |
| ·内源Tra1基网缺失的酵母菌种#14的构建 | 第37-38页 |
| ·将突变的Tra1基因导入基冈组中缺失内源Tra1基因的酵母菌株#14中 | 第38-39页 |
| ·利用spotting assay方法检测Tra1突变对细胞生长的影响 | 第39-42页 |
| ·克隆可能受Tra1蛋白调控的目标基因 | 第42-43页 |
| ·克隆表达SAGA和NuA4等复合体中的11个成分蛋白 | 第43-49页 |
| 讨论 | 第49-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
