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人体细胞绵羊卵细胞克隆胚的构建及类ESc的分离

1 引言第1页
2 综述第7-22页
   ·动物核移植研究进展第7-9页
     ·胚胎细胞来源的动物核移植第7-8页
     ·体细胞来源的动物核移植进展第8-9页
   ·异质动物细胞核移植的研究第9-12页
     ·异种动物细胞核移植的研究进展第9页
     ·异种动物细胞核移植存在的问题第9-11页
     ·异质核移植研究前景第11-12页
   ·体细胞克隆技术第12-15页
     ·成熟卵母细胞的去核第12-13页
     ·移核的方法第13页
     ·融合与激活第13-14页
     ·重构胚的培养第14-15页
   ·供核细胞基因组的再程序化机制的研究现状第15-18页
     ·核移植选择的细胞周期分子机理研究现状第15-17页
     ·延迟活化第17页
     ·基因组表观遗传修饰的影响第17-18页
   ·胚胎干细胞的研究第18-22页
     ·胚胎干细胞研究进展第18-19页
     ·胚胎干细胞分子特征及自我更新的信号通路第19-20页
     ·伦理问题第20-22页
实验研究第22-36页
 Ⅰ供体细胞的准备第22-27页
  1 材料与方法第22-24页
   ·实验试剂第22页
   ·实验仪器第22页
   ·主要液体的配制第22页
   ·实验方法第22-24页
     ·人胚胎皮肤组织的采集第22-23页
     ·组织块原代培养第23页
     ·人皮肤成纤维细胞的传代培养及冷冻与复苏第23-24页
     ·细胞生长曲线的绘制第24页
     ·细胞染色体核型分析第24页
  2 结果第24-25页
   ·建立人胎儿皮肤成纤维细胞系第24页
   ·人皮肤成纤维细胞的生长曲线第24-25页
   ·人皮肤成纤维细胞的染色体检查第25页
  3 讨论第25-26页
  4 小结第26-27页
 Ⅱ人胎儿皮肤成纤维细胞与去核绵羊卵母细胞构建克隆胚第27-33页
  1 材料与方法第27-30页
   ·实验试剂第27页
   ·实验仪器第27页
   ·实验液体的配制第27页
   ·实验方法第27-30页
     ·受体细胞的准备第27-29页
     ·核供体的准备第29页
     ·核移植第29页
     ·融合第29-30页
     ·重组胚的激活及体外培养第30页
     ·数据处理第30页
  2 结果第30-31页
   ·用 DMAP 延迟成熟时间与直接成熟比较第30页
   ·不同去核方法去核率比较的影响第30-31页
   ·电融合参数对融合率及胚胎发育的影响第31页
   ·不同注核方法重构胚的发育比较第31页
  3 讨论第31-33页
  4 小结第33页
 Ⅲ类干细胞的初步研究探讨第33-36页
  1 材料与方法第33-34页
   ·实验试剂第33页
   ·实验仪器第33页
   ·实验液体的配制第33页
   ·实验方法第33-34页
     ·滋养层细胞的制备第33-34页
     ·桑椹胚内细胞的分离培养第34页
     ·胚胎干细胞形态观察第34页
     ·AKP 染色第34页
  2 结果第34页
   ·类胚胎干细胞的形态观察第34页
   ·AKP 染色第34页
  3 讨论第34-35页
  4 小结第35-36页
致谢第36-37页
参考文献第37-47页
附图第47-49页
英文缩略词第49-50页
作者简介第50页

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