机体保护肽的固相合成、分离纯化及制备研究
| 第一章 文献综述 | 第1-22页 |
| ·固相多肽合成简介 | 第8-14页 |
| ·固相多肽合成技术 | 第8-12页 |
| ·固相多肽合成中连接效率检测方法 | 第12-13页 |
| ·影响固相多肽合成效率的β-折叠现象及解决方法 | 第13页 |
| ·固相多肽合成中新技术的应用 | 第13-14页 |
| ·多肽的分离纯化与鉴定 | 第14-16页 |
| ·多肽的分离纯化方法 | 第14-15页 |
| ·多肽的鉴定 | 第15-16页 |
| ·生物活性肽类药物 | 第16-21页 |
| ·生物活性肽概述 | 第16-17页 |
| ·生物活性肽类药物的功能特性 | 第17页 |
| ·生物活性肽类药物的分类 | 第17-18页 |
| ·生物活性肽类药物的研究开发 | 第18-19页 |
| ·生物活性肽类药物的临床应用及发展趋势 | 第19-21页 |
| ·本课题研究目的意义和内容 | 第21-22页 |
| ·课题研究目的和意义 | 第21页 |
| ·课题研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 机体保护肽的固相合成 | 第22-49页 |
| ·前言 | 第22页 |
| ·实验部分 | 第22-31页 |
| ·仪器和设备 | 第22-23页 |
| ·试剂 | 第23-24页 |
| ·多肽合成实验装置图 | 第24-25页 |
| ·机体保护肽的Wang树脂固相合成 | 第25-30页 |
| ·树脂的活化 | 第27页 |
| ·连结第一个氨基酸到树脂(DIC/DMAP法) | 第27页 |
| ·偶连率的测定方法 | 第27-28页 |
| ·树脂上残余反应基团的封闭 | 第28页 |
| ·Fmoc基团的脱除 | 第28-29页 |
| ·茚三酮定性显色 | 第29页 |
| ·连接其余氨基酸(HOBt/TBTU法) | 第29页 |
| ·残余氨基的乙酰化封闭 | 第29页 |
| ·肽的切割 | 第29-30页 |
| ·合成粗肽的MALDI-TOF mass鉴定 | 第30页 |
| ·机体保护肽的2-氯三苯甲基树脂固相合成 | 第30-31页 |
| ·树脂的活化 | 第30页 |
| ·连结第一个氨基酸到树脂(DIEA法) | 第30-31页 |
| ·其余合成环节 | 第31页 |
| ·放大规模的机体保护肽合成 | 第31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-48页 |
| ·多肽合成中树脂的选择 | 第31-32页 |
| ·树脂的活化 | 第32-35页 |
| ·多肽合成中保护基的选择 | 第35-36页 |
| ·树脂与氨基酸的偶连效率 | 第36-37页 |
| ·不同偶连率测定方法的比较 | 第36页 |
| ·不同树脂的偶连效率 | 第36-37页 |
| ·氨基酸连接策略的选择 | 第37-39页 |
| ·氨基酸之间的连接效率 | 第39-41页 |
| ·脱保护试剂的选择 | 第41-42页 |
| ·切割试剂的选择 | 第42-46页 |
| ·不同切割方案的切割效率 | 第43页 |
| ·切割后粗肽的MADI-TOF mass分析 | 第43-45页 |
| ·切割温度及时间对切割效果的影响 | 第45-46页 |
| ·机体保护肽合成结果 | 第46-48页 |
| ·合成结果的定性表征 | 第46页 |
| ·不同树脂的合成产率 | 第46页 |
| ·放大规模的机体保护肽合成 | 第46-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 第三章 机体保护肽的纯化与制备 | 第49-59页 |
| ·前言 | 第49页 |
| ·实验部分 | 第49-51页 |
| ·仪器和设备 | 第49-50页 |
| ·试剂及药品 | 第50页 |
| ·机体保护肽粗品的RP-HPLC分析 | 第50页 |
| ·分离纯化的条件优化 | 第50页 |
| ·RP-HPLC的制备研究 | 第50-51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-57页 |
| ·不同树脂合成的肽粗品的RP-HPLC分析 | 第51-54页 |
| ·分离纯化的条件优化 | 第54-55页 |
| ·洗脱梯度的优化 | 第54页 |
| ·TFA含量对于分离效果的影响 | 第54-55页 |
| ·色谱柱填料粒径对分离效果的影响 | 第55页 |
| ·纯化结果分析 | 第55页 |
| ·半制备规模机体保护肽的RP-HPLC纯化 | 第55-57页 |
| ·小结 | 第57-59页 |
| 第四章 结论与展望 | 第59-61页 |
| ·结论 | 第59页 |
| ·展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
