第一章 文献综述 | 第1-34页 |
·稻瘟病与稻瘟病菌 | 第13页 |
·稻瘟病菌的病害和侵染循环 | 第13-15页 |
·稻瘟病菌附着胞形成过程的信号传导和调控 | 第15-29页 |
·诱导稻瘟病菌芽管生长和附着胞形成的环境因子 | 第15-17页 |
·孢子形成基因 | 第17-18页 |
·稻瘟病菌对外界信号的识别 | 第18-20页 |
·参与稻瘟病菌附着胞形成的信号传导途径 | 第20-29页 |
·其他相关基因 | 第29-33页 |
·本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
第二章 材料与方法 | 第34-55页 |
·MgS11、MgATG5、MgATG8基因的确定与序列比对 | 第34页 |
·实验材料 | 第34-37页 |
·细菌菌株以及稻瘟病菌菌株 | 第34页 |
·培养基配制 | 第34-37页 |
·菌株的保存与培养 | 第37页 |
·DNA相关操作 | 第37-48页 |
·常规 PCR、长片段 PCR(>4kb) | 第37-39页 |
·PCR产物的克隆 | 第39页 |
·序列测定 | 第39页 |
·DNA克隆程序 | 第39-44页 |
·基因组 DNA提取 | 第44-45页 |
·Southern杂交 | 第45-48页 |
·MgS11、MgATG5、MgATG8基因敲除及突变子功能分析 | 第48-50页 |
·基因置换载体的构建 | 第48页 |
·互补载体的构建 | 第48-49页 |
·稻瘟病菌原生质体的制备与转化 | 第49-50页 |
·MgS11和MgATG5基因的 GFP表达分析 | 第50-51页 |
·融合载体的构建 | 第50页 |
·稻瘟病菌eGFP转化子的荧光观察 | 第50-51页 |
·稻瘟病菌突变体的形态学观察 | 第51-52页 |
·生长速度与产孢量 | 第51页 |
·附着胞的诱导 | 第51页 |
·大麦叶片致病性测定 | 第51-52页 |
·疏水性测定 | 第52页 |
·蛋白原核表达测试 | 第52-55页 |
·原核表达载体的构建 | 第52页 |
·基因表达 | 第52页 |
·SDS-PAGE蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第52-55页 |
第三章 MgS11基因的克隆与功能分析 | 第55-65页 |
·MgS11基因的克隆和序列分析 | 第55页 |
·MgS11基因敲除载体的构建及目标置换过程 | 第55-57页 |
·载体构建策略 | 第55-56页 |
·基因的目标置换过程 | 第56-57页 |
·△MgS11突变子的获得 | 第57-58页 |
·△MgS11突变子表型分析 | 第58-61页 |
·△MgS11突变子的菌落形态 | 第58-59页 |
·△MgS11突变子的生长速度 | 第59页 |
·△MgS11突变子的产孢量 | 第59页 |
·△MgS11菌丝产生附着胞 | 第59-60页 |
·△MgS11突变子的疏水性测定 | 第60-61页 |
·MgS11基因时空表达分析 | 第61-63页 |
·载体构建 | 第61-62页 |
·转化子的荧光表达 | 第62-63页 |
·△MgS11突变子的互补分析 | 第63-65页 |
第四章 MgATG5基因的克隆与功能分析 | 第65-73页 |
·MgATG5基因的克隆和序列分析 | 第65页 |
·MgATG5基因置换载体的构建 | 第65-66页 |
·△MgATG5突变子的获得 | 第66-67页 |
·△MgATG5突变子表型分析 | 第67-70页 |
·△MgATG5突变子的菌落形态与生长速度 | 第67页 |
·△MgATG5突变子的产孢量 | 第67-68页 |
·△MgATG5突变子的分生孢子萌发、附着胞形成 | 第68-69页 |
·突变子△MgATG5对大麦的致病性测定 | 第69-70页 |
·MgATG5基因时空表达分析 | 第70页 |
·△MgATG5突变子的互补分析 | 第70-71页 |
·MgATG5基因原核表达测试 | 第71-73页 |
第五章 MgATG8基因的克隆与分析 | 第73-75页 |
·MgATG8置换载体的构建 | 第73页 |
·△MgATG8突变子的获得 | 第73-74页 |
·△MgATG8突变子表型分析 | 第74-75页 |
第六章 讨论与总结 | 第75-78页 |
参考文献 | 第78-85页 |