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稻瘟病菌致病相关基因MgS11、MgATG5和MgATG8的克隆与功能分析

第一章 文献综述第1-34页
   ·稻瘟病与稻瘟病菌第13页
   ·稻瘟病菌的病害和侵染循环第13-15页
   ·稻瘟病菌附着胞形成过程的信号传导和调控第15-29页
     ·诱导稻瘟病菌芽管生长和附着胞形成的环境因子第15-17页
     ·孢子形成基因第17-18页
     ·稻瘟病菌对外界信号的识别第18-20页
     ·参与稻瘟病菌附着胞形成的信号传导途径第20-29页
   ·其他相关基因第29-33页
   ·本研究的目的和意义第33-34页
第二章 材料与方法第34-55页
   ·MgS11、MgATG5、MgATG8基因的确定与序列比对第34页
   ·实验材料第34-37页
     ·细菌菌株以及稻瘟病菌菌株第34页
     ·培养基配制第34-37页
     ·菌株的保存与培养第37页
   ·DNA相关操作第37-48页
     ·常规 PCR、长片段 PCR(>4kb)第37-39页
     ·PCR产物的克隆第39页
     ·序列测定第39页
     ·DNA克隆程序第39-44页
     ·基因组 DNA提取第44-45页
     ·Southern杂交第45-48页
   ·MgS11、MgATG5、MgATG8基因敲除及突变子功能分析第48-50页
     ·基因置换载体的构建第48页
     ·互补载体的构建第48-49页
     ·稻瘟病菌原生质体的制备与转化第49-50页
   ·MgS11和MgATG5基因的 GFP表达分析第50-51页
     ·融合载体的构建第50页
     ·稻瘟病菌eGFP转化子的荧光观察第50-51页
   ·稻瘟病菌突变体的形态学观察第51-52页
     ·生长速度与产孢量第51页
     ·附着胞的诱导第51页
     ·大麦叶片致病性测定第51-52页
     ·疏水性测定第52页
   ·蛋白原核表达测试第52-55页
     ·原核表达载体的构建第52页
     ·基因表达第52页
     ·SDS-PAGE蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳第52-55页
第三章 MgS11基因的克隆与功能分析第55-65页
   ·MgS11基因的克隆和序列分析第55页
   ·MgS11基因敲除载体的构建及目标置换过程第55-57页
     ·载体构建策略第55-56页
     ·基因的目标置换过程第56-57页
   ·△MgS11突变子的获得第57-58页
   ·△MgS11突变子表型分析第58-61页
     ·△MgS11突变子的菌落形态第58-59页
     ·△MgS11突变子的生长速度第59页
     ·△MgS11突变子的产孢量第59页
     ·△MgS11菌丝产生附着胞第59-60页
     ·△MgS11突变子的疏水性测定第60-61页
   ·MgS11基因时空表达分析第61-63页
     ·载体构建第61-62页
     ·转化子的荧光表达第62-63页
   ·△MgS11突变子的互补分析第63-65页
第四章 MgATG5基因的克隆与功能分析第65-73页
   ·MgATG5基因的克隆和序列分析第65页
   ·MgATG5基因置换载体的构建第65-66页
   ·△MgATG5突变子的获得第66-67页
   ·△MgATG5突变子表型分析第67-70页
     ·△MgATG5突变子的菌落形态与生长速度第67页
     ·△MgATG5突变子的产孢量第67-68页
     ·△MgATG5突变子的分生孢子萌发、附着胞形成第68-69页
     ·突变子△MgATG5对大麦的致病性测定第69-70页
   ·MgATG5基因时空表达分析第70页
   ·△MgATG5突变子的互补分析第70-71页
   ·MgATG5基因原核表达测试第71-73页
第五章 MgATG8基因的克隆与分析第73-75页
   ·MgATG8置换载体的构建第73页
   ·△MgATG8突变子的获得第73-74页
   ·△MgATG8突变子表型分析第74-75页
第六章 讨论与总结第75-78页
参考文献第78-85页

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