| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 引言 | 第14-31页 |
| 1 草鱼呼肠孤病毒的特性 | 第14-20页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒的分类地位及形态特征 | 第14-15页 |
| ·病毒的结构 | 第15-16页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒的致病性 | 第16-17页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒的检测 | 第17-18页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒的免疫防治 | 第18-20页 |
| 2 鱼用疫苗研究现状 | 第20-29页 |
| ·常规疫苗 | 第20-21页 |
| ·基因工程亚单位疫苗 | 第21-24页 |
| ·基因缺失活疫苗或突变苗 | 第24-25页 |
| ·活载体疫苗 | 第25-26页 |
| ·DNA 疫苗 | 第26-29页 |
| 3 本研究目的与意义 | 第29-31页 |
| 第一章 南方养殖草鱼呼肠孤病毒分子特性分析及双重PCR 检测方法的建立 | 第31-42页 |
| 1 材料与方法 | 第31-35页 |
| ·实验鱼及病毒 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·引物设计与合成 | 第31-32页 |
| ·病毒分离 | 第32-33页 |
| ·病毒RNA 提取 | 第33页 |
| ·RT-PCR | 第33-34页 |
| ·病毒核酸序列比较 | 第34页 |
| ·双重PCR 检测方法的建立 | 第34-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-40页 |
| ·病毒感染实验结果 | 第35页 |
| ·各样品病毒分子特性分析 | 第35-38页 |
| ·病毒组织特异性分析 | 第38页 |
| ·双重PCR 扩增方法的建立 | 第38-40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| 第二章 草鱼呼肠孤病毒广东株(GCRV-GD108) M6 基因的克隆、原核表达及免疫原性分析 | 第42-60页 |
| 1 材料与方法 | 第42-55页 |
| ·供试鱼、菌株、宿主菌和质粒 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42-47页 |
| ·M6 基因的克隆与序列分析 | 第47页 |
| ·M6 基因编码蛋白的抗原性分析 | 第47页 |
| ·重组质粒的构建及表达 | 第47-50页 |
| ·重组质粒的构建 | 第50-51页 |
| ·重组质粒pET32a-VP4 和表达菌株pET32a-VP4-BL21(DE3)的获得 | 第51-52页 |
| ·重组蛋白pET32a-VP4 的诱导、表达、纯化 | 第52-53页 |
| ·免疫兔制备多克隆抗体及Elisa 测定抗体效价 | 第53-54页 |
| ·重组蛋白pET32a-VP4 的免疫保护试验 | 第54-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-58页 |
| ·基因序列分析 | 第55页 |
| ·抗原性分析 | 第55-57页 |
| ·重组蛋白的表达纯化 | 第57页 |
| ·多克隆抗体制备及ELISA 检测 | 第57页 |
| ·融合蛋白对草鱼的免疫保护作用 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 总结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 附录A 缩略词表 | 第67-68页 |
| 附录B pET32a 载体图谱 | 第68-69页 |
| 附录C 在读期间发表文章 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
