| 缩略词表 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-23页 |
| ·MSC的基础研究 | 第11-13页 |
| ·MSC的发现及其特征 | 第11-12页 |
| ·MSC的成骨分化 | 第12-13页 |
| ·MSC的应用研究 | 第13-18页 |
| ·MSC的应用领域 | 第13-14页 |
| ·骨组织工程的研究进展 | 第14-16页 |
| ·种子细胞 | 第15页 |
| ·生物材料及细胞因子 | 第15-16页 |
| ·组织工程中的生物相容性研究 | 第16-18页 |
| ·干细胞生物反应器体外培养的研究进展 | 第18-21页 |
| ·动物细胞培养生物反应器 | 第19-20页 |
| ·通气搅拌式(stir tank) | 第19页 |
| ·中空纤维管式(hollow fiber) | 第19页 |
| ·气升式(air lift) | 第19-20页 |
| ·填充床(packed bed) | 第20页 |
| ·透析式(dialysis) | 第20页 |
| ·干细胞的生物反应器培养 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-29页 |
| ·主要实验材料 | 第23-25页 |
| ·主要实验仪器 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-29页 |
| ·细胞培养 | 第26页 |
| ·MSC成骨诱导 | 第26页 |
| ·生物材料接种细胞的方法 | 第26页 |
| ·相差显微镜观察 | 第26页 |
| ·扫描电镜观察 | 第26页 |
| ·生长曲线 | 第26-27页 |
| ·细胞群体倍增时间 | 第27页 |
| ·MTT法分析增殖能力 | 第27页 |
| ·流式细胞术检测 | 第27页 |
| ·细胞生长代谢情况的离线检测方法 | 第27页 |
| ·胞内碱性磷酸酶定量分析 | 第27页 |
| ·矿化结节茜素红染色 | 第27-28页 |
| ·材料及浸提液的制备和元素分析 | 第28页 |
| ·统计方法 | 第28-29页 |
| 第三章 MSC灌注生物反应器培养的初步研究 | 第29-57页 |
| ·灌注生物反应器的设计、构建与测试 | 第29-42页 |
| ·灌注生物反应器的设计与构建 | 第29-34页 |
| ·设计采用的基本生物反应器类型 | 第29-30页 |
| ·设计的思路与方法 | 第30-31页 |
| ·灌注生物反应器系统流程与部件 | 第31-34页 |
| 1) 主体培养部件 | 第32页 |
| 2) 流速控制部件 | 第32-33页 |
| 3) 系统气体交换与温度的控制 | 第33页 |
| 4) 附属支架系统 | 第33-34页 |
| ·灌注生物反应器性能测试实验 | 第34-36页 |
| ·实验目的 | 第34-35页 |
| ·测试步骤 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-36页 |
| ·灌注生物反应器功能评价实验 | 第36-42页 |
| ·实验目的 | 第36页 |
| ·实验策略与路线 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-42页 |
| 1) 细胞形态的相差显微镜观察 | 第37页 |
| 2) 生长曲线(包括倍增时间) | 第37-38页 |
| 3) 生长代谢情况 | 第38-42页 |
| 3-1) 葡萄糖浓度的变化情况 | 第38-39页 |
| 3-2) 乳酸浓度的变化情况 | 第39-40页 |
| 3-3) 乳酸脱氢酶活性的变化情况 | 第40-41页 |
| 3-4) 碱性磷酸酶活性的变化情况 | 第41-42页 |
| ·MSC灌注生物反应器培养 | 第42-49页 |
| ·实验目的 | 第42页 |
| ·策略与路线 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-49页 |
| ·MSC灌注生物反应器培养 | 第42-47页 |
| 1) 细胞形态的相差显微镜观察 | 第42页 |
| 2) 生长曲线(包括倍增时间) | 第42-43页 |
| 3) 生长代谢情况 | 第43-47页 |
| 3-1) 葡萄糖浓度的变化情况 | 第43-44页 |
| 3-2) 乳酸浓度的变化情况 | 第44-45页 |
| 3-3) 乳酸脱氢酶活性的变化情况 | 第45-46页 |
| 3-4) 碱性磷酸酶活性的变化情况 | 第46-47页 |
| ·经灌注生物反应器培养子一代MSC细胞增殖、分化潜能检测 | 第47-49页 |
| 1) 经灌注生物反应器培养子一代MSC细胞的增殖能力 | 第47-48页 |
| 2) 经灌注生物反应器培养子一代MSC细胞的成骨分化潜能 | 第48-49页 |
| 2-1) 细胞分化检测Ⅰ(碱性磷酸酶定量分析) | 第48页 |
| 2-2) 细胞分化检测Ⅱ(矿化结节茜素红染色) | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·关于C2C12细胞群体倍增时间与细胞密度峰值 | 第49-50页 |
| ·关于MSC细胞群体倍增时间与细胞密度峰值 | 第50页 |
| ·流速控制 | 第50-51页 |
| ·在线监测细胞代谢的问题 | 第51页 |
| ·关于取样方式 | 第51页 |
| ·关于灌注生物反应器的安全性与高效性 | 第51页 |
| ·本章小结 | 第51-53页 |
| ·附图 | 第53-57页 |
| 第四章 MSC与新型可降解材料生物相容性的体外实验研究 | 第57-68页 |
| ·实验目的 | 第57页 |
| ·实验策略与路线 | 第57-58页 |
| ·结果 | 第58-61页 |
| ·浸提液元素分析 | 第58页 |
| ·直接接触法的相差显微镜观察 | 第58-59页 |
| ·直接接触法的扫描电镜观察 | 第59页 |
| ·浸提液法细胞增殖的流式细胞术检测 | 第59-60页 |
| ·浸提液法细胞分化检测Ⅰ(碱性磷酸酶定量分析) | 第60页 |
| ·浸提液法细胞分化检测Ⅱ(矿化结节茜素红染色) | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| ·生物材料对MSC形态学、增殖与分化的影响 | 第61-62页 |
| ·浸提液元素含量与实验结果的关系 | 第62页 |
| ·全量换液与半量换液两种培养方式的比较 | 第62-63页 |
| ·本章小结 | 第63-64页 |
| ·附图 | 第64-68页 |
| 第五章 结论与展望 | 第68-71页 |
| ·结论 | 第68-69页 |
| ·展望 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 附录 | 第80-81页 |
| 在学期间发表的论文及科研成果清单 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
