| 1 引言 | 第1-16页 |
| ·杆状病毒侵染机制 | 第8页 |
| ·杆状病毒表达载体 | 第8-11页 |
| ·线性化 | 第9页 |
| ·大肠杆菌-昆虫细胞穿梭载体(Bac to Bac系统) | 第9-10页 |
| ·酵母-昆虫细胞穿梭载体 | 第10页 |
| ·tk基因 | 第10页 |
| ·体外Cre酶促定位 | 第10页 |
| ·Neo基因 | 第10-11页 |
| ·昆虫细胞培养及其应用 | 第11-14页 |
| ·昆虫细胞系 | 第11页 |
| ·细胞株 | 第11-12页 |
| ·培养基 | 第12页 |
| ·昆虫细胞培养的应用 | 第12-14页 |
| ·抗细胞调亡基因P35的研究 | 第14-15页 |
| ·立题的依据及意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-22页 |
| ·试验材料 | 第16-17页 |
| ·昆虫细胞系 | 第16页 |
| ·昆虫细胞培养基 | 第16页 |
| ·供试昆虫与病毒 | 第16页 |
| ·仪器设备 | 第16-17页 |
| ·试验方法 | 第17-22页 |
| ·培养基的配制 | 第17页 |
| ·细胞传代培养的方法 | 第17页 |
| ·细胞冻存与复苏的方法 | 第17页 |
| ·MsNPV毒原的制备 | 第17-18页 |
| ·AcNPV毒原的活化 | 第18页 |
| ·病毒敏感性测定 | 第18页 |
| ·活化AcNPV毒原的50％组织培养感染剂量(TCID_50／ml)的测定 | 第18-19页 |
| ·细胞的克隆及敏感性细胞株的筛选 | 第19页 |
| ·毒原的离体传代 | 第19-20页 |
| ·营养抗性(抗PBS)测定 | 第20页 |
| ·细胞生长曲线的测定 | 第20-22页 |
| 3 结果与分析 | 第22-31页 |
| ·细胞冻存方法的选择 | 第22页 |
| ·毒原的制备 | 第22页 |
| ·病毒敏感性的测定 | 第22-23页 |
| ·转基因细胞克隆株的获得 | 第23页 |
| ·转基因细胞克隆株的筛选 | 第23-24页 |
| ·转基因细胞的传代 | 第23页 |
| ·转基因细胞的感染率、OB产量和抗PBS筛选 | 第23-24页 |
| ·活化的AcNPV毒原的TCID50测定 | 第24-25页 |
| ·病毒离体传代过程中敏感性及OB产量比较 | 第25-26页 |
| ·细胞株CT-7生物学测定 | 第26-31页 |
| ·细胞形态观察 | 第26-27页 |
| ·细胞生长曲线测定 | 第27页 |
| ·毒原的离体传代 | 第27-31页 |
| 4 讨论 | 第31-34页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第31页 |
| ·转基因原始细胞的选取 | 第31-32页 |
| ·转基因细胞的构建和克隆 | 第32页 |
| ·病毒在细胞克隆株CT-7中传代培养 | 第32-34页 |
| 5 结论 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-41页 |
| 附录 | 第41-43页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第43-44页 |
| 作者简介 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45页 |