| 目录 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一部分 前言 | 第10-23页 |
| 1.DNA重复序列在大肠杆菌中复制的不稳定性 | 第10-12页 |
| ·DNA重复序列的类型 | 第10页 |
| ·无特殊二级结构的DNA重复序列在大肠杆菌中复制不稳定性的研究 | 第10-11页 |
| ·富含鸟嘌呤(G)的特殊重复序列在大肠杆菌中复制的不稳定性 | 第11-12页 |
| 2.端粒研究进展 | 第12-15页 |
| ·真核生物体内端粒的结构和复制 | 第12-13页 |
| ·端粒序列克隆的构建方法和在大肠杆菌中复制时的缺失现象的研究 | 第13-14页 |
| ·端粒无模板PCR产物复杂的大分子复合体形式 | 第14-15页 |
| 3.着丝粒区域研究进展 | 第15-19页 |
| ·模式植物拟南芥的着丝粒卫星DNA序列 | 第16页 |
| ·着丝粒区域反转录转座子序列 | 第16-17页 |
| ·着丝粒蛋白质 | 第17页 |
| ·十字花科植物的着丝粒卫星序列 | 第17-18页 |
| ·着丝粒区域基因的有无、新着丝粒的形成和着丝粒进化的可能机制 | 第18-19页 |
| 4.自主复制因子 | 第19-20页 |
| 5.人工染色体研究进展 | 第20页 |
| 6.质粒简介 | 第20-21页 |
| 7.问题的提出及实验的目的和意义 | 第21-23页 |
| ·问题的提出 | 第21页 |
| ·本人实验的实验目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第23-26页 |
| 1.实验材料 | 第23-24页 |
| ·所用载体和大肠杆菌菌株 | 第23页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·试剂及仪器 | 第23-24页 |
| 2.实验方法 | 第24-26页 |
| ·采用分子克隆上的CTAB方法提取拟南芥和油菜基因组的DNA | 第24页 |
| ·载体构建 | 第24页 |
| ·大肠杆菌的培养基及培养条件 | 第24页 |
| ·质粒DNA分离及操作 | 第24页 |
| ·PCR反应条件 | 第24-25页 |
| ·PCR产物和酶切产物的检测 | 第25页 |
| ·核酸序列分析 | 第25-26页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第26-41页 |
| 1.对能否直接利用1KB长的端粒无模板的PCR产物构建TA克隆的可能性的探讨 | 第26-29页 |
| ·拟南芥端粒无模板PCR反应体系的确定 | 第26-28页 |
| ·利用1Kb长的端粒无模板的PCR产物构建TA克隆 | 第28-29页 |
| 2.包含拟南芥端粒序列的质粒的重新获得和其在大肠杆菌中30℃条件下复制稳定性的研究 | 第29-38页 |
| ·利用T4 DNA聚合酶法获得包含有拟南芥端粒序列插入的质粒 | 第29-35页 |
| ·技术路线 | 第29-30页 |
| ·载体的处理 | 第30页 |
| ·PCR引物的改造： | 第30-31页 |
| ·将外源DNA连接入载体DNA过程中的2个不同的处理方式 | 第31页 |
| ·平滑化的端粒重复序列与钝端载体连接后的产物生成端粒克隆的情况 | 第31-35页 |
| ·包含拟南芥端粒序列的质粒于30℃条件下在大肠杆菌中复制稳定性的初步研究 | 第35-38页 |
| 3.油菜着丝粒序列的分离和克隆构建 | 第38-41页 |
| 第四部分 讨论 | 第41-48页 |
| 1.拟南芥端粒克隆的不稳定性规律 | 第41-45页 |
| ·端粒序列克隆方法和检测方法的讨论 | 第41-43页 |
| ·端粒序列克隆方法的讨论 | 第41-42页 |
| ·端粒序列克隆检测方法的讨论 | 第42-43页 |
| ·端粒序列在30℃条件下复制稳定性的探讨 | 第43-44页 |
| ·有关大肠杆菌端粒单克隆中质粒拷贝的长度多态性讨论 | 第44-45页 |
| 2.不同油菜品种的亚家族着丝粒序列分离的意义 | 第45-46页 |
| 3.植物人工染色体的构建 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
