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应用多重PCR技术和基因芯片技术区分伪狂犬病病毒强弱毒和胸膜肺炎放线杆菌血清型2菌株荚膜多糖的初步研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
第1章 鉴别猪伪狂犬病强弱毒多重PCR方法的建立第9-21页
 1 文献综述第9-13页
   ·伪狂犬病概述第9页
   ·病毒结构第9-10页
   ·病毒的基因组结构第10页
   ·伪狂犬病病毒的基因及编码的糖蛋白第10页
   ·伪狂犬病的疫苗研究第10-11页
   ·伪狂犬病的诊断第11-13页
 2 研究的目的和意义第13-14页
 3 材料和方法第14-17页
   ·材料第14-15页
   ·方法第15-17页
 4 结果与分析第17-19页
   ·多重PCR扩增条件的优化第17页
   ·多重PCR特异性扩增第17-18页
   ·多重PCR的敏感性试验第18-19页
   ·重复性试验第19页
 5 讨论第19-20页
 6 小结第20-21页
第2章 应用基因芯片技术区分伪狂犬病强弱毒的研究第21-42页
 1 基因芯片技术综述第21-26页
   ·基因芯片的分类第21-22页
   ·载体材料第22页
   ·载体的活化第22页
   ·基因芯片的制作方法第22-23页
   ·点样后处理第23页
   ·DNA样品的来源第23-24页
   ·基因芯片的应用第24-26页
 2 研究的目的和意义第26-27页
 3 材料与方法第27-34页
   ·实验材料第27-30页
   ·实验方法第30-34页
 4 结果与分析第34-39页
   ·含目的片段重组质粒的获得第34页
   ·捕获探针序列的确定第34-35页
   ·捕获探针的制备第35-36页
   ·PrV(gD,gB,gE and gE~-)的多重PCR和杂交反应第36页
   ·PrV野毒株和gE~-突变株的检测第36页
   ·敏感性检测第36页
   ·特异性检测第36-39页
 5 讨论第39-41页
   ·伪狂犬病第39页
   ·阳性内参的选择第39-40页
   ·芯片的扫描和数据分析第40页
   ·芯片的质量第40页
   ·芯片的检测与应用第40-41页
 6 小结第41-42页
第3章 猪胸膜肺炎放线杆菌荚膜多糖基因的克隆表达第42-57页
 1 文献综述第42-45页
   ·荚膜多糖第42-43页
   ·其它致病相关因子第43-45页
   ·致病机理第45页
   ·嗜中性粒细胞及其功能第45页
 2 目的和意义第45-46页
 3 材料和方法第46-50页
   ·材料第46-48页
   ·方法第48-50页
 4 结果与分析第50-54页
   ·CpsA、CpsB、CpsC基因的PCR扩增第50-51页
   ·CpsA、CpsB、CpsC基因的序列分析第51-52页
   ·重组表达质粒的构建及鉴定结果第52-53页
   ·CpsA、CpsB、CpsC三个基因的表达及Western blot检测第53-54页
   ·真核表达质粒的酶切鉴定第54页
 5 讨论第54-56页
 6 小结第56-57页
参考文献第57-65页
致谢第65页

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