中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-27页 |
·纳豆、纳豆菌和纳豆激酶 | 第11页 |
·纳豆激酶的酶学特性 | 第11-13页 |
·纳豆激酶的基因结构 | 第13-14页 |
·纳豆激酶的蛋白质结构 | 第14-15页 |
·纳豆激酶的溶栓机制 | 第15-18页 |
·血栓的形成 | 第15-16页 |
·纳豆激酶的直接溶血栓作用 | 第16页 |
·纳豆激酶刺激血管内皮细胞产生t-PA及催化尿激酶原转变成尿激酶的作用 | 第16-17页 |
·纳豆激酶通过降解和失活纤溶酶原激活剂的抑制剂(pAI-1)调节溶栓作用 | 第17-18页 |
·纳豆激酶的活性测定方法 | 第18-20页 |
·纤维蛋白平板法 | 第18页 |
·纤维蛋白块溶解时间法 | 第18-19页 |
·四肽底物法 | 第19页 |
·血清板法 | 第19-20页 |
·酶联免疫吸附法 | 第20页 |
·纳豆激酶的制备 | 第20-22页 |
·纳豆激酶的生产 | 第20-21页 |
·纳豆激酶的分离纯化 | 第21-22页 |
·纳豆激酶产品的现状 | 第22-23页 |
·溶栓剂研究发展的现状 | 第23-26页 |
·第一代溶栓剂 | 第23-24页 |
·第二代溶栓剂 | 第24-25页 |
·第三代溶栓剂 | 第25页 |
·现阶段溶栓剂存在的缺点 | 第25-26页 |
·纳豆激酶的开发前景 | 第26-27页 |
·本研究的意义和主要内容 | 第27页 |
2 材料与方法 | 第27-33页 |
·试验材料 | 第27-28页 |
·菌种与培养基 | 第27页 |
·其他试剂 | 第27-28页 |
·试验仪器 | 第28页 |
·实验方法 | 第28-33页 |
·纳豆枯草杆菌的保存、活化与培养 | 第28页 |
·粗酶液制备 | 第28页 |
·纳豆激酶酶活测定 | 第28-30页 |
·发酵液总氮量的测定 | 第30页 |
·发酵液残糖的测定 | 第30页 |
·生物量的测定 | 第30页 |
·纳豆激酶液体发酵条件的优化 | 第30页 |
·菌株的筛选 | 第30页 |
·液体发酵培养基的优化 | 第30页 |
·液体发酵条件的优化 | 第30页 |
·发酵罐放大试验 | 第30页 |
·盐析 | 第30-31页 |
·柱层析分离纳豆激酶 | 第31页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31-33页 |
·纳豆激酶酶学性质的研究 | 第33页 |
3 结果与讨论 | 第33-54页 |
·液体发酵条件的优化 | 第33-49页 |
·菌株的筛选 | 第33-34页 |
·种龄的确定 | 第34-35页 |
·发酵培养基的组成对产酶的影响 | 第35-43页 |
·不同氮源对产酶的影响 | 第35-36页 |
·不同碳源对产酶的影响 | 第36-37页 |
·碳源、氮源的不同浓度及碳氮比对产酶的影响 | 第37-39页 |
·无机盐离子组成对产酶的影响 | 第39-42页 |
·培养基pH值对产酶的影响 | 第42-43页 |
·发酵条件对产酶的影响 | 第43-47页 |
·发酵周期的确定 | 第43-44页 |
·不同温度对产酶的影响 | 第44-45页 |
·不同接种量对产酶的影响 | 第45-46页 |
·不同装液量对产酶的影响 | 第46-47页 |
·发酵罐放大试验 | 第47-49页 |
·纳豆激酶的分离纯化 | 第49-52页 |
·盐析剂用量的确定 | 第49-50页 |
·基本原理 | 第49页 |
·硫酸铵盐析的优点 | 第49-50页 |
·盐析曲线的制作 | 第50页 |
·SephadexG200柱层析 | 第50-51页 |
·SDS-PAGE电泳纯度鉴定 | 第51页 |
·纯化方案的评价 | 第51-52页 |
·纳豆激酶的性质 | 第52-54页 |
·纳豆激酶的分子量测定 | 第52-53页 |
·纳豆激酶的最适反应pH值 | 第53页 |
·纳豆激酶的最适反应温度 | 第53-54页 |
4 结论与建议 | 第54-57页 |
·结论 | 第54-55页 |
·建议 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-60页 |
致谢 | 第60页 |