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纳豆激酶液体发酵的优化和分离纯化及酶学性质的研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 前言第11-27页
   ·纳豆、纳豆菌和纳豆激酶第11页
   ·纳豆激酶的酶学特性第11-13页
   ·纳豆激酶的基因结构第13-14页
   ·纳豆激酶的蛋白质结构第14-15页
   ·纳豆激酶的溶栓机制第15-18页
     ·血栓的形成第15-16页
     ·纳豆激酶的直接溶血栓作用第16页
     ·纳豆激酶刺激血管内皮细胞产生t-PA及催化尿激酶原转变成尿激酶的作用第16-17页
     ·纳豆激酶通过降解和失活纤溶酶原激活剂的抑制剂(pAI-1)调节溶栓作用第17-18页
   ·纳豆激酶的活性测定方法第18-20页
     ·纤维蛋白平板法第18页
     ·纤维蛋白块溶解时间法第18-19页
     ·四肽底物法第19页
     ·血清板法第19-20页
     ·酶联免疫吸附法第20页
   ·纳豆激酶的制备第20-22页
     ·纳豆激酶的生产第20-21页
     ·纳豆激酶的分离纯化第21-22页
   ·纳豆激酶产品的现状第22-23页
   ·溶栓剂研究发展的现状第23-26页
     ·第一代溶栓剂第23-24页
     ·第二代溶栓剂第24-25页
     ·第三代溶栓剂第25页
     ·现阶段溶栓剂存在的缺点第25-26页
   ·纳豆激酶的开发前景第26-27页
   ·本研究的意义和主要内容第27页
2 材料与方法第27-33页
   ·试验材料第27-28页
     ·菌种与培养基第27页
     ·其他试剂第27-28页
     ·试验仪器第28页
   ·实验方法第28-33页
     ·纳豆枯草杆菌的保存、活化与培养第28页
     ·粗酶液制备第28页
     ·纳豆激酶酶活测定第28-30页
     ·发酵液总氮量的测定第30页
     ·发酵液残糖的测定第30页
     ·生物量的测定第30页
     ·纳豆激酶液体发酵条件的优化第30页
       ·菌株的筛选第30页
       ·液体发酵培养基的优化第30页
       ·液体发酵条件的优化第30页
     ·发酵罐放大试验第30页
     ·盐析第30-31页
     ·柱层析分离纳豆激酶第31页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第31-33页
     ·纳豆激酶酶学性质的研究第33页
3 结果与讨论第33-54页
   ·液体发酵条件的优化第33-49页
     ·菌株的筛选第33-34页
     ·种龄的确定第34-35页
     ·发酵培养基的组成对产酶的影响第35-43页
       ·不同氮源对产酶的影响第35-36页
       ·不同碳源对产酶的影响第36-37页
       ·碳源、氮源的不同浓度及碳氮比对产酶的影响第37-39页
       ·无机盐离子组成对产酶的影响第39-42页
       ·培养基pH值对产酶的影响第42-43页
     ·发酵条件对产酶的影响第43-47页
       ·发酵周期的确定第43-44页
       ·不同温度对产酶的影响第44-45页
       ·不同接种量对产酶的影响第45-46页
       ·不同装液量对产酶的影响第46-47页
     ·发酵罐放大试验第47-49页
   ·纳豆激酶的分离纯化第49-52页
     ·盐析剂用量的确定第49-50页
       ·基本原理第49页
       ·硫酸铵盐析的优点第49-50页
       ·盐析曲线的制作第50页
     ·SephadexG200柱层析第50-51页
     ·SDS-PAGE电泳纯度鉴定第51页
     ·纯化方案的评价第51-52页
   ·纳豆激酶的性质第52-54页
     ·纳豆激酶的分子量测定第52-53页
     ·纳豆激酶的最适反应pH值第53页
     ·纳豆激酶的最适反应温度第53-54页
4 结论与建议第54-57页
   ·结论第54-55页
   ·建议第55-57页
参考文献第57-60页
致谢第60页

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