| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-19页 |
| ·抗菌肽的分类、作用机理和特点 | 第9-10页 |
| ·抗菌肽的特点 | 第9页 |
| ·抗菌肽的类别 | 第9-10页 |
| ·抗菌肽的作用机理及作用特点 | 第10页 |
| ·抗菌肽的制备方法 | 第10-12页 |
| ·提取法 | 第10-11页 |
| ·固相合成法 | 第11页 |
| ·基因工程表达 | 第11-12页 |
| ·抗菌肽应用 | 第12-16页 |
| ·在医药工业中的应用 | 第12-15页 |
| ·抗细菌作用 | 第12-13页 |
| ·抗真菌作用 | 第13-14页 |
| ·抗病毒作用 | 第14页 |
| ·抗寄生虫 | 第14页 |
| ·抗肿瘤 | 第14-15页 |
| ·在食品工业中的应用 | 第15页 |
| ·饲料工业 | 第15-16页 |
| ·鲇鱼抗菌肽 | 第16-17页 |
| ·分子量和氨基酸序列分析 | 第16页 |
| ·抗菌和溶血现象 | 第16-17页 |
| ·课题研究意义及内容 | 第17-19页 |
| 第二章 仿生鲶鱼抗菌肽PaH2A 编码序列的设计与克隆 | 第19-31页 |
| ·材料与方法 | 第19-23页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·菌株及质粒 | 第19页 |
| ·酶及主要试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20页 |
| ·培养基和培养条件 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-23页 |
| ·目的基因的扩增 | 第20-21页 |
| ·回收后的PCR 产物的纯化 | 第21页 |
| ·限制性内切酶切作用与连接 | 第21页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第21-22页 |
| ·一元表达载体的构建 | 第22页 |
| ·三元表达载体的构建 | 第22页 |
| ·重组载体的验证 | 第22页 |
| ·测序 | 第22页 |
| ·融合蛋白的分子量鉴定 | 第22页 |
| ·质粒的稳定性检验 | 第22-23页 |
| ·结果与讨论 | 第23-29页 |
| ·目的序列与相应引物的设计 | 第23-24页 |
| ·序列XH1、XH2、XH3的PCR扩增结果 | 第24页 |
| ·重组质粒的构建 | 第24页 |
| ·重组质粒的连接与转化 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第25-26页 |
| ·测序结果分析 | 第26-27页 |
| ·融合蛋白的初步表达 | 第27页 |
| ·融合蛋白在细胞内的存在形式 | 第27-28页 |
| ·质粒的稳定性检验 | 第28-29页 |
| ·本章小结 | 第29-31页 |
| 第三章 仿生鲶鱼抗菌肽PaH2A 低温诱导及提取与纯化 | 第31-43页 |
| ·材料与方法 | 第31-33页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·菌种 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-33页 |
| ·蛋白含量测定方法 | 第32页 |
| ·SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第32页 |
| ·菌体破碎前的预处理 | 第32页 |
| ·超声波法破碎菌体 | 第32页 |
| ·盐析 | 第32-33页 |
| ·融合蛋白的CNBr 切割 | 第33页 |
| ·离子交换柱的制备及离子交换柱 | 第33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-42页 |
| ·低温下重组菌诱导条件的研究 | 第33-36页 |
| ·不同诱导温度对融合蛋白在胞内存在形式的影响 | 第33-35页 |
| ·低温条件下不同时间融合蛋白的表达量 | 第35-36页 |
| ·粗产物的预处理 | 第36-41页 |
| ·蛋白定量 | 第36页 |
| ·超声波对细胞破碎的研究 | 第36-39页 |
| ·破碎时间对菌体破碎效果的影响 | 第36-37页 |
| ·菌悬液浓度对菌体破碎效果的影响 | 第37-38页 |
| ·菌悬液体积对破碎效果的影响 | 第38-39页 |
| ·融合蛋白的初步分离 | 第39页 |
| ·PaH2A 与融合蛋白肽段的分割 | 第39-41页 |
| ·PaH2A的初步纯化分离 | 第41-42页 |
| ·本章小结 | 第42-43页 |
| 第四章 仿生鲶鱼抗菌肽PaH2A 抗菌活性的测定 | 第43-50页 |
| ·材料与方法 | 第43-45页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·检测菌种 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·检测培养基 | 第43-44页 |
| ·指示菌悬液的制备 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-45页 |
| ·双层平板的制备 | 第44页 |
| ·Amp标准溶液 | 第44页 |
| ·样品的制备 | 第44页 |
| ·空白对照样品的制备 | 第44-45页 |
| ·实验结果 | 第45-49页 |
| ·PaH2A 对大肠杆菌 BL21(DE3)的抑制 | 第45-46页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第45页 |
| ·PaH2A 对大肠杆菌的活性检测 | 第45-46页 |
| ·PaH2A 对枯草芽孢杆菌的抑制 | 第46-47页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第46页 |
| ·PaH2A 对枯草芽孢杆菌的活性检测 | 第46-47页 |
| ·PaH2A 对金黄色葡萄球菌的抑制 | 第47-48页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第47-48页 |
| ·目的蛋白对金黄色葡萄球菌的活性检测 | 第48页 |
| ·PaH2A 对几种不同菌株抑制效果的比较 | 第48-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 结论与展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 硕士研究生期间在科学技术期刊上发表的论文 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-57页 |
| 附录 | 第57-59页 |
