| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-31页 |
| 1.草菇概况 | 第11-13页 |
| ·草菇的分类地位 | 第11页 |
| ·草菇栽培的起源与发展 | 第11-12页 |
| ·草菇菌丝的生态与习性 | 第12页 |
| ·草菇的生殖和生活史 | 第12页 |
| ·草菇的营养价值与药用价值 | 第12-13页 |
| 2.纤维素酶合成的调控 | 第13-15页 |
| 3.葡聚糖内切酶(Endoglucanase) | 第15-18页 |
| 4.真菌的蛋白质分泌途径的研究 | 第18-28页 |
| ·蛋白质分泌途径中可能涉及的超微结构 | 第18-21页 |
| ·内质网(The endoplasmic reticulum) | 第18-20页 |
| ·高尔基体(Golgi apparatus) | 第20页 |
| ·液泡(Vesicles) | 第20-21页 |
| ·真菌蛋白质分泌研究意义及国内外研究现状和分析 | 第21-27页 |
| ·非折叠蛋白信号 | 第27-28页 |
| 5.研究背景及意义 | 第28-29页 |
| 6.工作假说和研究意义 | 第29-31页 |
| 第二章 研究内容和实验方法 | 第31-47页 |
| 1.试验材料 | 第31页 |
| ·供试菌株 | 第31页 |
| ·基本生长培养基 | 第31页 |
| 2.试验方法 | 第31-47页 |
| ·草菇菌丝的培养 | 第31-33页 |
| ·乳糖诱导表达规律 | 第32-33页 |
| ·共聚焦激光扫描显微镜观察 | 第33页 |
| ·透射电子显微镜观察 | 第33页 |
| ·生物化学分析 | 第33-34页 |
| ·葡聚糖内切酶酶活测定 | 第33-34页 |
| ·半定量PCR(Semi-quantitative PCR) | 第34-38页 |
| ·提取草菇菌丝的总RNA | 第34页 |
| ·酶解总RNA中的DNA | 第34-35页 |
| ·RNA的电泳 | 第35-36页 |
| ·mRNA的反转录 | 第36页 |
| ·模板cDNA的相对定量 | 第36-37页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第37页 |
| ·扩增DNA片段的纯化和回收 | 第37-38页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第38-40页 |
| ·重组葡聚糖内切酶纯化 | 第40-41页 |
| ·葡聚糖内切酶一级抗体的制备、纯化及Western blotting试验 | 第41-43页 |
| ·共聚焦激光扫描显微镜样品的准备 | 第43-44页 |
| ·透射电镜观察样品准备 | 第44-47页 |
| 第三章 结果分析与讨论 | 第47-69页 |
| 1.草菇葡聚糖内切酶基因经乳糖诱导的脉冲转录规律分析 | 第47-52页 |
| ·总RNA的提取 | 第47页 |
| ·RNA的甲醛变性凝胶电泳 | 第47-48页 |
| ·选择oligo(dT)_(18)作为锚定引物 | 第48页 |
| ·gpd基因和egl基因引物 | 第48页 |
| ·半定量PCR的有效性分析 | 第48-50页 |
| ·gpd基因和egl基因在最佳循环数条件下的PCR扩增 | 第50-52页 |
| ·gpd基因和egl基因序列 | 第52页 |
| 2.重组葡聚糖内切酶的纯化 | 第52-55页 |
| 3.葡聚糖内切酶亲和层析柱化一级抗体 | 第55-56页 |
| 4.葡聚糖内切酶Western blotting结果 | 第56-57页 |
| 5.葡聚糖内切酶共聚焦激光扫描显微镜观察 | 第57-60页 |
| 6.葡聚糖内切酶透射电镜结果 | 第60-64页 |
| 7.讨论 | 第64-66页 |
| 8.结论 | 第66-69页 |
| 参考文献 | 第69-79页 |
| 附录1 供试培养基 | 第79-80页 |
| 附录2 试验试剂 | 第80-83页 |
| 附录3 使用仪器 | 第83-84页 |
| 附录4 文中所用缩写 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第86页 |
