缩略语表 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-14页 |
英文摘要 | 第14-20页 |
前言和文献回顾 | 第20-51页 |
正文 | 第51-99页 |
第一部分 靶向核糖核酸酶抗乙肝病毒作用进一步检测 | 第51-63页 |
1 材料和方法 | 第52-56页 |
·材料 | 第52页 |
·方法 | 第52-56页 |
·细胞培养 | 第52页 |
·2.2.15细胞转染 | 第52-53页 |
·转染效率的检测 | 第53页 |
·RT-PCR检测转染基因的表达 | 第53-54页 |
·转染后2.2.15细胞内HBeAg含量测定 | 第54页 |
·转染后2.2.15细胞内HBsAg含量测定 | 第54页 |
·转染后2.2.15细胞上清中HBeAg含量测定 | 第54-55页 |
·荧光定量PCR测定HBV拷贝数 | 第55-56页 |
·统计分析 | 第56页 |
2 结果 | 第56-60页 |
·转染效率的检测 | 第56-57页 |
·RT-PCR表达鉴定 | 第57页 |
·转染后2.2.15细胞内HBeAg含量测定 | 第57-58页 |
·转染后2.2.15细胞内HBsAg含量测定 | 第58-59页 |
·固相放免测定转染后上清中HBeAg含量 | 第59-60页 |
·荧光定量PCR测定转染后上清中HBV拷贝数 | 第60页 |
3 讨论 | 第60-63页 |
第二部分 靶向核糖核酸酶抗乙肝病毒机制的初步探索 | 第63-99页 |
1 HBV靶向核糖核酸酶的原核表达、纯化和复性 | 第63-72页 |
·材料和方法 | 第63-68页 |
·材料 | 第63-64页 |
·方法 | 第64-68页 |
·pET32a(+)/TR原核表达载体的构建 | 第64页 |
·蛋白表达纯化 | 第64-68页 |
·纯化蛋白的复性 | 第68页 |
·结果 | 第68-72页 |
·重组载体的酶切鉴定 | 第68页 |
·pET32a(+)/TR的原核表达 | 第68-71页 |
·pET32a(+)/TR的纯化和复性 | 第71-72页 |
2 对照蛋白的原核表达、纯化和复性 | 第72-85页 |
·材料和方法 | 第72-77页 |
·材料 | 第72页 |
·方法 | 第72-77页 |
·对照蛋白原核表达载体的构建 | 第72页 |
·对照蛋白的表达和鉴定 | 第72-74页 |
·对照蛋白的纯化和复性 | 第74-76页 |
·TR,TRmut及hEDN蛋白定量和纯度分析 | 第76页 |
·复性后hEDN核糖核酸酶活性分析 | 第76-77页 |
·结果 | 第77-85页 |
·对照蛋白原核表达载体的构建和鉴定 | 第77页 |
·对照蛋白的诱导表达 | 第77-81页 |
·对照蛋白的纯化和复性 | 第81-83页 |
·TR,TRmut及hEDN蛋白定量和纯度分析 | 第83页 |
·hEDN复性效果分析 | 第83-85页 |
3 TR的抗乙肝病毒机制的初步分析 | 第85-95页 |
·材料和方法 | 第85-90页 |
·材料 | 第85页 |
·方法 | 第85-90页 |
·TR核糖核酸酶活性分析 | 第85-87页 |
·TR核糖核酸酶活性的定性分析 | 第85-87页 |
·TR核糖核酸酶活性的定量分析 | 第87页 |
·TR靶向性分析 | 第87-90页 |
·细胞外实验分析TR靶向性 | 第87-90页 |
·细胞内实验分析TR的靶向性 | 第90页 |
·结果 | 第90-95页 |
·HBV TR核糖核酸酶活性的定性分析 | 第90-91页 |
·TR,TRmut及hEDN核糖核酸酶活性的定量分析 | 第91-93页 |
·TR靶向性分析 | 第93-95页 |
·细胞外实验分析TR靶向性 | 第93-94页 |
·细胞内实验分析TR靶向性 | 第94-95页 |
4 讨论 | 第95-99页 |
小结 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-103页 |
个人简历和研究成果 | 第103-105页 |
致谢 | 第105页 |