| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-32页 |
| 1．1 蔷薇科经济植物 | 第14-16页 |
| 1．2 蔷薇科植物的经济意义 | 第16-17页 |
| 1．3 蔷薇科作物生产现状 | 第17页 |
| 1．4 蔷薇科经济植物主要病毒的研究进展 | 第17-26页 |
| 1．4．1 李属坏死环斑病毒 | 第18-20页 |
| 1．4．2 苹果茎沟病毒 | 第20-22页 |
| 1．4．3 苹果花叶病毒 | 第22-23页 |
| 1．4．4 洋李矮缩病毒 | 第23-24页 |
| 1．4．5 侵染蔷薇科木本植物的其它病毒 | 第24-26页 |
| 1．5 植物病毒研究的方法学 | 第26-31页 |
| 1．5．1 生物学方法 | 第26-27页 |
| 1．5．2 电子显微镜技术 | 第27页 |
| 1．5．3 血清学方法 | 第27-28页 |
| 1．5．4 分子生物学方法 | 第28-31页 |
| 1．5．4．1 病毒dsRNA分析 | 第28-29页 |
| 1．5．4．2 PCR和RT-PCR技术 | 第29页 |
| 1．5．4．3 核酸杂交方法 | 第29-30页 |
| 1．5．4．4 基因芯片方法 | 第30页 |
| 1．5．4．5 异源双链泳动分析法 | 第30-31页 |
| 1．6 本研究的目的和意义 | 第31-32页 |
| 1．6．1 研究内容 | 第31页 |
| 1．6．2 预期目标 | 第31-32页 |
| 第二章 蔷薇科植物病毒的多样性研究 | 第32-43页 |
| 2．1 材料与方法 | 第32-35页 |
| 2．1．1 毒源采集与保存 | 第32页 |
| 2．1．2 病毒双链RNA提取与病毒基因组分分析 | 第32-33页 |
| 2．1．3 感病植物的组织病变观察 | 第33-34页 |
| 2．1．4 ELISA实验步骤 | 第34页 |
| 2．1．5 寄主反应测定 | 第34页 |
| 2．1．6 总RNA提取 | 第34-35页 |
| 2．1．7 RT-PCR检测 | 第35页 |
| 2．2 结果与分析 | 第35-42页 |
| 2．2．1 蔷薇科植物病毒病田间症状 | 第35-36页 |
| 2．2．2 dsRNA分析结果 | 第36-38页 |
| 2．2．3 ELISA检测结果 | 第38-39页 |
| 2．2．4 寄主反应测定结果 | 第39-40页 |
| 2．2．5 病变组织观察 | 第40页 |
| 2．2．6 RT-PCR检测结果 | 第40-42页 |
| 2．3 小结 | 第42-43页 |
| 第三章 李属坏死环斑病毒分子克隆与序列分析 | 第43-63页 |
| 3．1 材料与方法 | 第44-48页 |
| 3．1．1 病毒分离物 | 第44页 |
| 3．1．2 酶与试剂 | 第44页 |
| 3．1．3 引物设计 | 第44页 |
| 3．1．4 病毒RNA模板的制备 | 第44页 |
| 3．1．5 RT-PCR和cDNA合成 | 第44-45页 |
| 3．1．6 PCR反应和目标片段的扩增 | 第45页 |
| 3．1．7 PCR产物回收 | 第45-46页 |
| 3．1．8 RNA玻片杂交 | 第46页 |
| 3．1．9 DNA片段的连接 | 第46-47页 |
| 3．1．10 感受态细胞的制备 | 第47页 |
| 3．1．11 重组质粒的转化 | 第47页 |
| 3．1．12 重组质粒DNA的制备(碱裂解法) | 第47-48页 |
| 3．1．13 重组质粒的鉴定 | 第48页 |
| 3．1．13．1 重组质粒的酶切鉴定 | 第48页 |
| 3．1．13．2 菌液PCR鉴定 | 第48页 |
| 3．1．14 DNA测序和序列同源性比较 | 第48页 |
| 3．2 结果分析 | 第48-61页 |
| 3．2．1 PNRSV部分序列的cDNA的克隆 | 第48-50页 |
| 3．2．2 不同PNRSV分离物的序列分析 | 第50-51页 |
| 3．2．3 PNRSV分离物CP基因序列酶切位点分析 | 第51页 |
| 3．2．4 不同PNRSV分离物CP核苷酸序列同源性比较 | 第51-55页 |
| 3．2．5 不同PNRSV分离物CP氨基酸序列同源性比较 | 第55-59页 |
| 3．2．6 PNRSV分离物序列末端分析 | 第59-60页 |
| 3．2．7 玻片杂交结果 | 第60-61页 |
| 3．3 小结 | 第61-63页 |
| 第四章 侵染苹果的两种病毒的分子鉴定与检测 | 第63-81页 |
| 4．1 材料与方法 | 第64-67页 |
| 4．1．1 病毒分离物 | 第64页 |
| 4．1．2 酶与试剂 | 第64页 |
| 4．1．3 引物设计 | 第64-65页 |
| 4．1．4 总RNA模板的制备 | 第65页 |
| 4．1．5 RT-PCR和cDNA合成 | 第65-66页 |
| 4．1．6 PCR反应和目标片段的扩增 | 第66-67页 |
| 4．1．7 PCR产物回收 | 第67页 |
| 4．1．8 DNA片段的连接 | 第67页 |
| 4．1．9 感受态细胞的制备 | 第67页 |
| 4．1．10 重组质粒的转化 | 第67页 |
| 4．1．11 重组质粒DNA的制备(碱裂解法) | 第67页 |
| 4．1．12 重组质粒的鉴定 | 第67页 |
| 4．1．12．1 重组质粒的酶切鉴定 | 第67页 |
| 4．1．12．2 菌液PCR鉴定 | 第67页 |
| 4．1．13 DNA测序和序列同源性比较 | 第67页 |
| 4．1．14 RNA玻片杂交 | 第67页 |
| 4．2 结果分析 | 第67-80页 |
| 4．2．1 ASGV和ASPV部分序列的cDNA的克隆 | 第67-69页 |
| 4．2．2 ASGV和ApMV分离物的序列分析 | 第69-70页 |
| 4．2．3 不同ASGV分离物CP核苷酸序列同源性比较 | 第70-71页 |
| 4．2．4 不同ASGV分离物CP氨基酸序列同源性比较 | 第71-73页 |
| 4．2．5 不同ApMV分离物CP核苷酸序列同源性比较 | 第73-76页 |
| 4．2．6 不同ApMV分离物CP氨基酸序列同源性比较 | 第76页 |
| 4．2．7 两种病毒的玻片杂交结果 | 第76-80页 |
| 4．3 小结 | 第80-81页 |
| 第五章 侵染甜樱桃的洋李矮缩病毒 | 第81-93页 |
| 5．1 材料与方法 | 第81-84页 |
| 5．1．1 病毒分离物 | 第81页 |
| 5．1．2 酶与试剂 | 第81-82页 |
| 5．1．3 引物设计 | 第82页 |
| 5．1．4 ELISA检测 | 第82页 |
| 5．1．5 总RNA模板的制备 | 第82页 |
| 5．1．6 RT-PCR和cDNA合成 | 第82页 |
| 5．1．7 PCR反应和目标片段的扩增 | 第82-83页 |
| 5．1．8 PCR产物回收 | 第83页 |
| 5．1．9 DNA片段的连接 | 第83页 |
| 5．1．10 感受态细胞的制备 | 第83页 |
| 5．1．11 重组质粒的转化 | 第83页 |
| 5．1．12 重组质粒 DNA的制备(碱裂解法) | 第83页 |
| 5．1．13 重组质粒的鉴定 | 第83-84页 |
| 5．1．13．1 重组质粒的酶切鉴定 | 第83-84页 |
| 5．1．13．2 菌液PCR鉴定 | 第84页 |
| 5．1．14 DNA测序和序列同源性比较 | 第84页 |
| 5．2 结果分析 | 第84-92页 |
| 5．2．1 PDV序列的cDNA的克隆 | 第84-85页 |
| 5．2．2 PDV分离物的序列分析 | 第85-86页 |
| 5．2．3 不同PDV分离物CP核苷酸序列同源性比较 | 第86-87页 |
| 5．2．4 不同PDV分离物CP氨基酸序列同源性比较 | 第87-92页 |
| 5．3 小结 | 第92-93页 |
| 总讨论 | 第93-96页 |
| 参考文献 | 第96-102页 |
| 附件 | 第102-104页 |
