| 第一部分 花分生组织特征基因RA68的分离和特性分析 | 第1-62页 |
| 1 前言 | 第10-23页 |
| 1． 1． 开花时间基因和花分生组织特征基因 | 第11-21页 |
| 1． 1． 1 开花时间基因 | 第11-16页 |
| 1． 1． 1． 1 开花抑制途径 | 第11-13页 |
| 1． 1． 1． 2 自主促进途径 | 第13-14页 |
| 1． 1． 1． 3 光周期促进途径 | 第14-15页 |
| 1． 1． 1． 4 春化促进途径 | 第15-16页 |
| 1． 1． 2 花分生组织特征基因 | 第16-19页 |
| 1． 1． 2． 1 拟南芥中的花分生组织特征基因 | 第16-18页 |
| 1． 1． 2． 2 水稻中的花分生组织特征基因 | 第18-19页 |
| 1． 1． 3 开花时间基因和分生组织特征基因之间的联系 | 第19-21页 |
| 1． 2 课题设计的基本思路 | 第21-22页 |
| 1． 3 本课题研究技术路线 | 第22-23页 |
| 2． 材料和方法 | 第23-37页 |
| 2． 1． 实验材料和试剂 | 第23页 |
| 2． 1． 1． 植物材料 | 第23页 |
| 2． 1． 2． 菌种 | 第23页 |
| 2． 1． 3． 载体 | 第23页 |
| 2． 1． 4． 主要试剂 | 第23页 |
| 2． 2． 实验方法 | 第23-37页 |
| 2． 2． 1． 大肠杆菌的转化 | 第23-24页 |
| 2． 2． 2． 不同mRNA的减法杂交 | 第24页 |
| 2． 2． 3． RA68 cDNA的克隆 | 第24页 |
| 2． 2． 4． RA68 5′端cDNA的分离 | 第24-26页 |
| 2． 2． 5． RA68基因及其蛋白产物的分析 | 第26-27页 |
| 2． 2． 6． 植物总DNA的提取 | 第27页 |
| 2． 2． 7． RNA的提取 | 第27-28页 |
| 2． 2． 8． Southern杂交分析 | 第28-29页 |
| 2． 2． 9． Northern杂交分析 | 第29页 |
| 2． 2． 10． RA68反义基因表达载体的构建 | 第29页 |
| 2． 2． 11． 农杆菌的转化 | 第29-30页 |
| 2． 2． 12． 水稻愈伤组织的诱导与遗传转化 | 第30-31页 |
| 2． 2． 13． RA68-GFP表达载体的构建 | 第31页 |
| 2． 2． 14． RA68-GFP洋葱表皮细胞转化 | 第31-32页 |
| 2． 2． 15． 原位杂交分析 | 第32-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-52页 |
| 3． 1． RA68 cDNA的克隆 | 第37-38页 |
| 3． 2． RA68蛋白的氨基酸组成和结构分析 | 第38-40页 |
| 3． 3． RA68基因的拷贝数分析 | 第40页 |
| 3． 4． RA68基因的器官特异性表达 | 第40-41页 |
| 3． 5 RA68 mRNA的原位杂交分析 | 第41-44页 |
| 3． 6 RA68蛋白的洋葱表皮细胞亚细胞定位 | 第44-45页 |
| 3． 7 基于RA68反义RNA的knock-down实验 | 第45-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 6 参考文献 | 第55-62页 |
| 第二部分 OsUBP1的克隆和特性分析 | 第62-104页 |
| 1 前言 | 第62-74页 |
| 1． 1 去泛肽酶的结构特点和作用机制 | 第63-65页 |
| 1． 2 去泛肽酶的功能 | 第65-70页 |
| 1． 2． 1 生化功能 | 第65-68页 |
| 1． 2． 1． 1 加工泛肽基因产物 | 第65页 |
| 1． 2． 1． 2 对以异肽键连接的泛肽进行加工 | 第65-67页 |
| 1． 2． 1． 3 酯酶和酰胺酶活性 | 第67-68页 |
| 1． 2． 2 生理和生物学功能 | 第68-70页 |
| 1． 2． 2． 1 细胞周期调控 | 第68页 |
| 1． 2． 2． 2 发育和分化 | 第68-69页 |
| 1． 2． 2． 3 染色体结构和转录调控 | 第69-70页 |
| 1． 2． 2． 4 神经功能与疾病 | 第70页 |
| 1． 3 去泛肽酶的调控 | 第70-71页 |
| 1． 4 泛肽类似蛋白和相应的加工酶 | 第71页 |
| 1． 5 展望 | 第71-73页 |
| 1． 6 本工作研究背景和技术路线 | 第73-74页 |
| 2 材料方法 | 第74-77页 |
| 2． 1． 实验材料和试剂 | 第74页 |
| 2． 1． 1． 植物材料 | 第74页 |
| 2． 1． 2． 菌种 | 第74页 |
| 2． 1． 3． 载体 | 第74页 |
| 2． 1． 4． 主要试剂 | 第74页 |
| 2． 2． 实验方法 | 第74-77页 |
| 2． 2． 1 大肠杆菌的转化 | 第74页 |
| 2． 2． 2 OsUBP1 3′端cDNA的分离 | 第74-75页 |
| 2． 2． 3 OsUBP1 RT-PCR | 第75页 |
| 2． 2． 4 OsUBP1 的Southern杂交 | 第75页 |
| 2． 2． 5 反义OsUBP1 RNA表达载体的构建 | 第75-76页 |
| 2． 2． 6 表达载体导入农杆菌 | 第76页 |
| 2． 2． 7 水稻愈伤组织的诱导及遗传转化 | 第76页 |
| 2． 2． 8 原位杂交 | 第76-77页 |
| 3 结果与分析 | 第77-92页 |
| 3． 1 OsUBP1 cDNA的克隆 | 第77-78页 |
| 3． 2 OsUBP1 的表达模式 | 第78-80页 |
| 3． 3 OsUBP1 在转录过程中存在复杂的可变剪接现象 | 第80-82页 |
| 3． 4 OsUBP1 不同转录本推测蛋白的结构域分析 | 第82-83页 |
| 3． 5 OsUBP1 蛋白的氨基酸组成和结构分析 | 第83-86页 |
| 3． 6 OsUBP1 基因的拷贝数分析 | 第86-87页 |
| 3． 7 颖花中OsUBP1 mRNA的原位杂交分析 | 第87-89页 |
| 3． 8 反义OsUBP1 RNA转基因水稻的获得与表型分析 | 第89-92页 |
| 3． 8． 1 反义OsUBP1 RNA表达载体的构建 | 第89-90页 |
| 3． 8． 2 TO代转反义OsUBP1 水稻植株的鉴定 | 第90-91页 |
| 3． 8． 3 TO代反义转基因植株的表型分析 | 第91-92页 |
| 4 讨论 | 第92-95页 |
| 5 结论 | 第95-96页 |
| 6 参考文献 | 第96-104页 |
| 博士期间发表和待发表论文 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105页 |
