1 引言 | 第1-37页 |
·绵羊肺腺瘤病(OPA)概述 | 第13-23页 |
·OPA的发现 | 第13页 |
·OPA的流行病学 | 第13-15页 |
·OPA的临床症状与病理变化 | 第15-16页 |
·OPA病原的确立 | 第16-18页 |
·OPA的诊断与防治 | 第18-19页 |
·OPA的发病机理 | 第19-22页 |
·目前急需解决的问题 | 第22-23页 |
·绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)的分子生物学 | 第23-35页 |
·JSRV的分类地位 | 第23页 |
·JSRV的形态和理化性质 | 第23-25页 |
·JSRV的细胞嗜性 | 第25页 |
·毒株分类 | 第25-26页 |
·JSRV基因组结构 | 第26-27页 |
·JSRV的基因及其编码的蛋白 | 第27-30页 |
·JSRV的复制、蛋白质的合成和形态发生 | 第30-33页 |
·JSRV 受体 | 第33页 |
·JSRV 内源性病毒 | 第33-34页 |
·绵羊肺腺瘤(OPA)与人的细支气管肺泡癌(BAC) | 第34-35页 |
·结语 | 第35-37页 |
2 研究一 绵羊肺腺瘤病毒NM株的分离与电镜观察 | 第37-44页 |
摘要 | 第37-38页 |
·材料 | 第38页 |
·方法 | 第38-39页 |
·病毒悬液的制备 | 第38页 |
·电镜样品的制备 | 第38页 |
·绵羊胚胎肺原代细胞的培养 | 第38-39页 |
·病毒的分离 | 第39页 |
·培养液电镜负染色材料和透射电镜材料的制备与观察 | 第39页 |
·含有JSRV接种物的培养细胞PCR检测 | 第39页 |
·结果 | 第39-42页 |
·电镜负染色技术观察结果 | 第39-40页 |
·培养的胚胎肺细胞 | 第40-41页 |
·超薄切片的电镜观察 | 第41页 |
·含有JSRV接种物的培养细胞经PCR检测结果 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-44页 |
3 研究二 绵羊肺腺瘤病毒中国NM株前病毒基因组的克隆与全序列分析 | 第44-93页 |
摘要 | 第44-46页 |
·材料 | 第46-47页 |
·病毒材料、质粒和菌株 | 第46-47页 |
·分子生物学试剂 | 第47页 |
·引物设计 | 第47页 |
·方法 | 第47-51页 |
·含JSRV的肺肿瘤细胞总DNA的提取 | 第47-48页 |
·JSRV基因组的分段扩增 | 第48页 |
·JSRV基因组的克隆 | 第48-49页 |
·重组子阳性质粒鉴定 | 第49-50页 |
·测序 | 第50页 |
·引用序列说明 | 第50-51页 |
·结果 | 第51-90页 |
·含JSRV的肺肿瘤细胞总DNA的提取 | 第51页 |
·JSRV基因组分段扩增结果 | 第51-52页 |
·重组质粒的鉴定 | 第52-57页 |
·JSRV-NM株前病毒基因组全序列 | 第57-61页 |
·JSRV-NM株前病毒基因组核苷酸序列与国外代表株序列的比较分析 | 第61页 |
·JSRV-NM株前病毒基因组氨基酸序列与国外代表株序列的比较分析 | 第61-63页 |
·JSRV-NM株前病毒基因组分子结构特征 | 第63-90页 |
·讨论 | 第90-93页 |
4 研究三 绵羊肺腺瘤病毒JSRV-2基因探针的制备与原位杂交检测 | 第93-101页 |
摘要 | 第93-94页 |
·材料 | 第94页 |
·实验材料 | 第94页 |
·实验用主要试剂 | 第94页 |
·方法 | 第94-96页 |
·DIG标记DNA探针的制备 | 第94-95页 |
·原位杂交处理 | 第95-96页 |
·实验结果 | 第96-99页 |
·标记DNA探针长度的检测 | 第96-97页 |
·探针的特异性与灵敏度的检测 | 第97页 |
·原位杂交检测结果 | 第97-99页 |
·讨论 | 第99-101页 |
5 研究四 绵羊肺腺瘤病毒NM株囊膜(env)基因的定向克隆与融合表达 | 第101-111页 |
摘要 | 第101-102页 |
·材料与方法 | 第102-105页 |
·质粒与菌株 | 第102-103页 |
·工具酶和相关试剂 | 第103页 |
·模板DNA的提取 | 第103页 |
·PCR反应体系 | 第103-104页 |
·PCR产物的纯化 | 第104页 |
·克隆载体的构建与鉴定 | 第104-105页 |
·表达载体的构建 | 第105页 |
·诱导表达 | 第105页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第105页 |
·结果 | 第105-109页 |
·env基因的克隆结果 | 第105-106页 |
·重组表达质粒的构建 | 第106-109页 |
·env基因在大肠杆菌BL21的表达 | 第109页 |
·讨论 | 第109-111页 |
6 结论与展望 | 第111-113页 |
致谢 | 第113-114页 |
参考文献 | 第114-127页 |
作者简介 | 第127页 |