论文摘要 | 第1-11页 |
第一部分 Biota orientalis RNase 特异性切割大鼠核糖体 28S RNA中 C4453-A4454 之间的磷酸二酯键导致核糖体失活 | 第11-46页 |
摘要 | 第11页 |
1 引言 | 第11-16页 |
2 材料和方法 | 第16-22页 |
·材料 | 第16页 |
·一般方法 | 第16页 |
·Biota orientalis RNase 作用于核糖体 RNA 的活性分析 | 第16-18页 |
·Biota orientalis RNase 的分离和纯化 | 第18-21页 |
·粗抽提液的制备 | 第18-19页 |
·DEAE-Sephadex A-25 柱层析 | 第19页 |
·CM-Sephadex C-50 柱层析 | 第19-20页 |
·Phenyl-Sepharose CL-4B 柱层析 | 第20页 |
·从活性负染凝胶上回收 Biota orientalis RNase | 第20-21页 |
·体外蛋白质合成的测定 | 第21-22页 |
·Biota orientalis RNase 对兔网织红细胞裂解液中蛋白质合成的影响 | 第21页 |
·Biota orientalis RNase 对 poly(U)指导的聚苯丙氨酸合成的影响 | 第21-22页 |
·总 tRNA、pH 5 酶以及[3H]-苯丙氨酰-tRNA 的制备 | 第21-22页 |
·延伸因子 1 和 2 的纯化 | 第22页 |
·Poly(U)指导的体外蛋白质合成 | 第22页 |
·Biota orientalis RNase 对核糖体与延伸因子的相互作用的影响 | 第22页 |
3 结果 | 第22-37页 |
·Biota orientalis RNase 的分离和纯化 | 第23-27页 |
·Biota orientalis RNase 在核糖体 RNA 上的切割位点 | 第27-28页 |
·Biota orientalis RNase 作用的特异性 | 第28-32页 |
·Biota orientalis RNase 在核糖体上的损伤导致体外蛋白质合成的抑制 | 第32-35页 |
·Biota orientalis RNase对EF-1α依赖的氨酰tRNA结合到核糖体上的影响 | 第35-37页 |
4 讨论 | 第37-39页 |
5 小结 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-46页 |
第二部分 Ricin A 链和 cinnamomin A 链与脂质体膜的相互作用及插入脂双层的比较研究 | 第46-70页 |
摘 要 | 第46页 |
1 引言 | 第46-48页 |
2 材料和方法 | 第48-51页 |
·材料 | 第48-49页 |
·脂质体的制备 | 第49-50页 |
·脂质体聚集 | 第50页 |
·脂质体中 calcein 的渗漏 | 第50页 |
·蛋白质荧光光谱 | 第50页 |
·脂质体对蛋白质降解的保护作用 | 第50-51页 |
·蛋白质被脂质体包裹的蛋白酶降解 | 第51页 |
3 结果 | 第51-61页 |
·Ricin、cinnamomin 或它们的 A、B 链引起脂质体聚集 | 第51-53页 |
·Ricin、cinnamomin 或它们的 A、B 链诱导脂质体渗漏 | 第53-55页 |
·脂质体引起 ricin A 链荧光光谱的变化 | 第55-56页 |
·脂质体对 cinnamomin A 链或 ricin A 链的蛋白酶降解的保护作用 | 第56-58页 |
·脂质体内包裹的蛋白酶对 ricin A 链和 cinnamomin A 链的降解 | 第58-61页 |
4 讨论 | 第61-64页 |
5 小结 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-70页 |
第三部分 化学修饰法研究 cinnamomin A 链中酪氨酸和色氨酸残基在 RNA N-糖苷酶活性中的作用 | 第70-82页 |
摘 要 | 第70页 |
1 引言 | 第70-71页 |
2 材料和方法 | 第71-73页 |
·材料 | 第71页 |
·体外蛋白质合成抑制 | 第71-72页 |
·RNA N-糖苷酶活性测定 | 第72页 |
·N-乙酰咪唑修饰 cinnamomin A 链 | 第72页 |
·羟氨脱乙酰化 | 第72页 |
·N-溴代琥珀酰亚胺修饰 cinnamomin A 链 | 第72-73页 |
·荧光光谱 | 第73页 |
3 结果和讨论 | 第73-78页 |
4 小结 | 第78页 |
参考文献 | 第78-82页 |
附:在学期间撰写的论文 | 第82-83页 |
致谢 | 第83页 |