| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 第一部分 nm23-H1基因的研究概况 | 第9-18页 |
| 一 nm23基因的发现 | 第9-10页 |
| 二 nm23基因的结构 | 第10页 |
| 三 NDPK的结构 | 第10-11页 |
| 四 nm23基因与肿瘤转移 | 第11-12页 |
| 五 nm23／NDPK的生物学功能 | 第12-13页 |
| 六 nm23／NDPK-A与信号转导 | 第13-14页 |
| 七 nm23与基因调控 | 第14-15页 |
| 八 nm23与分化 | 第15-16页 |
| 九 nm23与基因治疗 | 第16-17页 |
| 十 本研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 第二部分 pcDNA3.1-NMH1真核表达载体的构建及检测 | 第18-28页 |
| 一 实验仪器及材料 | 第18-20页 |
| 二 方法 | 第20-24页 |
| (1) 目的基因片段的PCR扩增 | 第20-21页 |
| (2) 碱裂解法分别小量抽提质粒PBV220-NMH1和pcDNA3.1 | 第21-24页 |
| 三 结果 | 第24-28页 |
| 第三部分 nm23-H1基因对人乳腺癌细胞MCF-7S作用的研究 | 第28-33页 |
| 一 主要实验材料 | 第28页 |
| 二 方法 | 第28-30页 |
| (1) 阳离子脂质体介导pcDNA3.1-NMH1转染标准人乳腺癌细胞MCF-7S | 第28-29页 |
| (2) pcDNA3.1-NMH1 MCF-7S细胞生长曲线的测定 | 第29页 |
| (3) pcDNA3.1-NMH1 MCF-7S细胞增殖能力的检测 | 第29-30页 |
| (4) 转nm23-H1基因的MCF-7S细胞转移能力实验 | 第30页 |
| (5) 统计学处理 | 第30页 |
| 三 结果 | 第30-33页 |
| 第四部分 nm23-H1基因对人脐静脉内皮细胞ECV-304作用的研究 | 第33-48页 |
| 一 主要实验材料 | 第33页 |
| 二 主要的试剂配制 | 第33-34页 |
| 三 方法 | 第34-40页 |
| (1) 阳离子脂质体介导pcDNA3.1-NMH1转染标准人脐静脉内皮细胞ECV-304 | 第34-35页 |
| (2) 经筛选后的内皮细胞ECV-304扩增培养及nm23-H1基因RT-PCR检测其表达 | 第35-36页 |
| (3) 免疫组织化学检测nm23-H1在转染后的ECV-304细胞中的表达部位 | 第36-37页 |
| (4) 透射电子显微镜检测nm23-H1对ECV-304细胞的影响 | 第37-38页 |
| (5) pcDNg3.1NMH1 ECV-304细胞生长曲线的测定 | 第38-39页 |
| (6) pcDNA3.1NMH1 ECV-304细胞增殖能力的检测 | 第39页 |
| (7) 转nm23-H1基因的ECV-304细胞转移能力实验 | 第39页 |
| (8) 统计学处理 | 第39-40页 |
| 四 结果 | 第40-48页 |
| 讨论 | 第48-60页 |
| 一 pcDNA3.1(-)基因治疗乳腺癌的可行性 | 第48-49页 |
| 二 真核表达载体的构建 | 第49-50页 |
| 三 真核表达载体的转染及鉴定 | 第50页 |
| 四 两种nm23亚型在肿瘤转移中的作用 | 第50-51页 |
| 五 真核表达载体转染的体外生物学效应分析 | 第51-52页 |
| 六 转nm23-H1基因对细胞线粒体所引起的变化 | 第52页 |
| 七 阳离子脂质体和pcDNA3.1-NMH1共转化作用与基因治疗 | 第52-54页 |
| 八 nm23-H1对肿瘤的侵袭和转移的抑制 | 第54-55页 |
| 九 血管生成与肿瘤侵袭及转移 | 第55-56页 |
| 十 nm23-H1与肿瘤血管生成的调节 | 第56-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 附发表文章 | 第69页 |
