中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
前言 | 第10-19页 |
实验器材和试剂 | 第19-22页 |
第一章 溶血素的克隆表达与纯化 | 第22-39页 |
一、实验方法 | 第22-31页 |
1 溶血素基因片断的克隆 | 第22-26页 |
2 溶血素基因片断与pUCmT-vector的连接及转化 | 第26-28页 |
3 溶血素的表达 | 第28-30页 |
4 重组溶血素的纯化 | 第30-31页 |
二、实验结果与讨论 | 第31-38页 |
1 溶血素基因片断的克隆 | 第32-33页 |
2 重组溶血素蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第33-36页 |
3 重组蛋白的纯化 | 第36-38页 |
三、小结 | 第38-39页 |
第二章 溶血素活性的初步研究 | 第39-51页 |
一、实验方法 | 第39-41页 |
1.溶血活性实验 | 第39页 |
2 鞘磷酯酶的验证 | 第39-41页 |
二、实验结果与讨论 | 第41-50页 |
1 溶血素的溶血活性的验证 | 第41-43页 |
2 鞘磷脂酶类溶血素的验证 | 第43-50页 |
三、小结 | 第50-51页 |
第三章 溶血素在钩端螺旋体内的转录表达情况的考察 | 第51-69页 |
一、实验方法 | 第51-59页 |
1 钩端螺旋体溶血素基因转录情况的考察 | 第51-54页 |
2 溶血素抗体的制备 | 第54-55页 |
3 酶联免疫吸附反应(ELISA) | 第55-56页 |
4 WESTERN BLOT检验溶血素的表达 | 第56-59页 |
二、实验结果与讨论 | 第59-68页 |
1 钩端螺旋体总RNA的抽提 | 第59页 |
2 用RT-PCR方法检测溶血素基因的转录情况 | 第59-60页 |
3 抗兔血清的滴度确定 | 第60-65页 |
4 Western Blot印记检验溶血素的表达情况 | 第65-68页 |
三、实验小结 | 第68-69页 |
结论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-73页 |
致谢 | 第73页 |