绪论 | 第1-12页 |
文献综述 | 第12-28页 |
1 历史回顾 | 第12-13页 |
2 病毒的分类 | 第13-14页 |
3 病毒的结构 | 第14-16页 |
4 病毒的基因 | 第16-18页 |
5 病毒的进化 | 第18-19页 |
6 类ALV内源性反录病毒 | 第19-20页 |
7 流行病学 | 第20-21页 |
8 病毒的致病性 | 第21-22页 |
9 病毒复制与致瘤机制 | 第22-25页 |
10 ALV-J诊断 | 第25-26页 |
11 ALV-J控制 | 第26-28页 |
研究一 J亚群禽白血病病毒的分离、鉴定及其部分基因特性分析 | 第28-62页 |
1 材料和方法 | 第28-32页 |
·样品 | 第28页 |
·细胞 | 第28-29页 |
·抗ALV-J单克隆抗体 | 第29页 |
·ALV-J特异性引物 | 第29页 |
·病毒分离 | 第29页 |
·间接免疫荧光反应 | 第29页 |
·模板DNA制备及PCR | 第29-30页 |
·PCR反应Ⅰ产物克隆 | 第30页 |
·PCR产物DNA的定序 | 第30页 |
·序列分析 | 第30-31页 |
·负染色电镜观察 | 第31页 |
·回归感染动物实验 | 第31页 |
·组织切片 | 第31页 |
·引用序列 | 第31-32页 |
2 结果 | 第32-56页 |
·血清学检测和病理学观察 | 第32页 |
·病毒分离及其PCR检测 | 第32-33页 |
·间接免疫荧光反应 | 第33-34页 |
·PCR反应Ⅰ产物的克隆 | 第34页 |
·病毒粒子负染色电镜观察 | 第34页 |
·PCR反应Ⅰ产物测序结果及同源性分析 | 第34-39页 |
·分离毒株回归感染动物 | 第39-45页 |
·分离毒株的部分基因分析 | 第45-56页 |
3 讨论 | 第56-62页 |
研究二 J亚群禽白血病病毒IMC_(10200)株膜表面糖蛋白gp85基因的克隆与表达 | 第62-70页 |
1 材料及方法 | 第62-65页 |
·ALV-J病毒与特异性单克隆抗体 | 第62页 |
·昆虫细胞及杆状病毒Bac-to-Bac表达系统 | 第62页 |
·gp85基因的克隆 | 第62-63页 |
·重组转移载体的构建 | 第63页 |
·重组杆状病毒表达DNA载体的制备 | 第63-64页 |
·重组杆状病毒DNA转染Sf9细胞 | 第64页 |
·间接免疫荧光反应 | 第64页 |
·Western blotting | 第64-65页 |
2 结果 | 第65-68页 |
·gp85基因的克隆 | 第65页 |
·重组转移载体的酶切鉴定 | 第65-66页 |
·转座效果及重组Bacmid DNA的分离提取效果 | 第66-67页 |
·gp85基因在Sf9细胞中表达的鉴定 | 第67页 |
·Western blotting | 第67-68页 |
3 讨论 | 第68-70页 |
研究三 鸡内源性类J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆及分析 | 第70-98页 |
1 材料和方法 | 第70-74页 |
·实验材料 | 第71页 |
·预备试验 | 第71-72页 |
·基因组DNA提取 | 第72页 |
·内源性类ALV-J gp85及ALV-J特异性引物PCR | 第72页 |
·目的基因克隆 | 第72-73页 |
·DNA测序和分析 | 第73页 |
·内源性类ALV-J gp85基因的尝试性表达 | 第73页 |
·引用基因序列 | 第73-74页 |
2 结果 | 第74-87页 |
·预选样品DNA | 第74页 |
·类ALV-J gp85内源性序列的PCR | 第74页 |
·ALV-J特异性PCR | 第74-76页 |
·类ALV-J gp85内源性序列基因克隆及酶切鉴定 | 第76-77页 |
·重组转移载体的构建及酶切鉴定 | 第77页 |
·转座及重组Bacmid DNA的分离提取 | 第77页 |
·WLC2 gp85在Sf9细胞中尝试性表达的观察 | 第77-79页 |
·内源性类ALV-J gp85基因的测序结果 | 第79页 |
·内源性类ALV-J gp85基因分析 | 第79-87页 |
·内源性类ALV-J gp85基因与已发表EAV-HP结果的比较分析 | 第87页 |
3 讨论 | 第87-98页 |
主要成果 | 第98-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-111页 |
作者简介 | 第111页 |