蒙古绵羊原始生殖细胞用于胚胎干细胞培养的研究
| 1 引言 | 第1-15页 |
| ·干细胞研究现状 | 第7-9页 |
| ·胚胎干细胞的研究进展 | 第9-11页 |
| ·胚胎干细胞的概念及研究状况 | 第9-10页 |
| ·国内胚胎干细胞研究的现状 | 第10页 |
| ·绵羊ES细胞的研究状况 | 第10页 |
| ·胚胎干细胞的研究意义 | 第10-11页 |
| ·原始生殖细胞的生物学来源及其特性 | 第11-15页 |
| ·原始生殖细胞的分离 | 第12-13页 |
| ·酶消化法 | 第13页 |
| ·机械法 | 第13页 |
| ·EDTA法 | 第13页 |
| ·原始生殖细胞的培养 | 第13-14页 |
| ·PGCs的纯化 | 第14-15页 |
| ·原始生殖细胞用于建立类细胞的概况 | 第15页 |
| 2 实验材料与方法 | 第15-20页 |
| ·实验材料 | 第15-16页 |
| ·材料 | 第15页 |
| ·实验药品与试剂 | 第15-16页 |
| ·仪器设备 | 第16页 |
| ·实验方法 | 第16-20页 |
| ·溶液的配制 | 第16-17页 |
| ·绵羊胚胎成纤维细胞的分离培养 | 第17页 |
| ·绵羊胚胎成纤维细胞的传代培养 | 第17-18页 |
| ·绵羊PGCs的培养和ES细胞的分离与克隆 | 第18页 |
| ·绵羊胚胎干细胞的传代培养 | 第18-19页 |
| ·AKP染色 | 第19页 |
| ·绵羊胚胎干细胞H.E | 第19页 |
| ·电镜超薄切片制备步骤 | 第19-20页 |
| ·核型分析 | 第20页 |
| ·绵羊ES细胞的冷冻保存 | 第20页 |
| ·绵羊胚胎干细胞的解冻和培养 | 第20页 |
| 3 实验结果 | 第20-22页 |
| ·绵羊胚胎成纤维细胞的分离培养 | 第20-21页 |
| ·原代培养 | 第20-21页 |
| ·继代培养 | 第21页 |
| ·绵羊PGCs的分离与培养 | 第21页 |
| ·胚胎干细胞的培养 | 第21页 |
| ·类ES细胞的鉴定 | 第21-22页 |
| ·染色鉴定 | 第21-22页 |
| ·类ES细胞集落的光镜切片观察 | 第22页 |
| ·透射电镜观察 | 第22页 |
| ·绵羊类胚胎干细胞核型的鉴定 | 第22页 |
| ·绵羊类胚胎干细胞的冷冻保存 | 第22页 |
| 4 讨论 | 第22-26页 |
| ·早期胚胎选择和PGCs的分离 | 第22-23页 |
| ·消化组织细胞胰蛋白酶作用的时间 | 第23页 |
| ·绵羊胚胎干细胞分离的影响因素 | 第23-24页 |
| ·关于绵羊胚胎干细胞冷冻保存 | 第24-25页 |
| ·关于胚胎干细胞凋亡 | 第25-26页 |
| 5 结论 | 第26-27页 |
| 致谢 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-32页 |
| 附图及附图说明 | 第32-45页 |
| 作者简介 | 第45页 |
