中文摘要 | 第1-4页 |
一、 前言 | 第4-14页 |
二、 试验材料及仪器 | 第14-17页 |
三、 试验方法 | 第17-26页 |
四、 结果 | 第26-38页 |
(一) 植酸酶基因pPIC9K-phyA重组质粒转化毕赤巴斯德酵母的条件筛选 | 第26-27页 |
1. 电击转化条件筛选 | 第26-27页 |
2. 转化结果 | 第27页 |
(二) 重组转化子的筛选 | 第27-29页 |
1. 转化子甲醇利用型的平板筛选 | 第27页 |
2. 转化子的诱导表达及植酸酶活性测定 | 第27-28页 |
3. 植酸酶工程菌产酶曲线的测定 | 第28-29页 |
4. 植酸酶工程菌遗传稳定性检测 | 第29页 |
(三) 植酸酶phyA基因工程菌DNA水平的鉴定 | 第29-32页 |
1. 酵母总DNA的抽提 | 第29页 |
2. 斑点杂交 | 第29页 |
3. PCR扩增反应 | 第29-32页 |
4. Southern blotting分析 | 第32页 |
(四) 植酸酶phyA基因工程菌的培养基研究 | 第32-38页 |
1. 麦芽汁和麦芽高温浸提培养基 | 第32-33页 |
2. 细胞增殖 | 第33-34页 |
3. 诱导产酶 | 第34-36页 |
4. 细胞浓度 | 第36页 |
5. 培养基培养工程菌的产酶曲线 | 第36页 |
6. 培养基成本的核算 | 第36-38页 |
五、 讨论 | 第38-42页 |
六、 结论 | 第42-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
英文摘要 | 第50页 |