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植酸酶phyA基因转化毕赤酵母的筛选及工程菌培养基研究

中文摘要第1-4页
一、 前言第4-14页
二、 试验材料及仪器第14-17页
三、 试验方法第17-26页
四、 结果第26-38页
 (一) 植酸酶基因pPIC9K-phyA重组质粒转化毕赤巴斯德酵母的条件筛选第26-27页
  1. 电击转化条件筛选第26-27页
  2. 转化结果第27页
 (二) 重组转化子的筛选第27-29页
  1. 转化子甲醇利用型的平板筛选第27页
  2. 转化子的诱导表达及植酸酶活性测定第27-28页
  3. 植酸酶工程菌产酶曲线的测定第28-29页
  4. 植酸酶工程菌遗传稳定性检测第29页
 (三) 植酸酶phyA基因工程菌DNA水平的鉴定第29-32页
  1. 酵母总DNA的抽提第29页
  2. 斑点杂交第29页
  3. PCR扩增反应第29-32页
  4. Southern blotting分析第32页
 (四) 植酸酶phyA基因工程菌的培养基研究第32-38页
  1. 麦芽汁和麦芽高温浸提培养基第32-33页
  2. 细胞增殖第33-34页
  3. 诱导产酶第34-36页
  4. 细胞浓度第36页
  5. 培养基培养工程菌的产酶曲线第36页
  6. 培养基成本的核算第36-38页
五、 讨论第38-42页
六、 结论第42-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-50页
英文摘要第50页

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