| 英文缩略词表 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-14页 |
| 英文摘要 | 第14-19页 |
| 前言 | 第19-24页 |
| 实验材料 | 第24-26页 |
| 一.实验所用细胞 | 第24页 |
| 二.实验所用质粒DNA | 第24-25页 |
| 三.主要试剂药品 | 第25-26页 |
| 四.主要仪器设备 | 第26页 |
| 实验方法 | 第26-46页 |
| 一.质粒DNA的制备 | 第26-34页 |
| 1.所用试液的配制 | 第26-28页 |
| 2.大肠杆菌DH5α感受态的制备 | 第28-29页 |
| 3.大肠杆菌DH5α的转化与培养 | 第29-30页 |
| 4.质粒DNA的扩增与提取 | 第30-32页 |
| 5.质粒DNA的纯化 | 第32-33页 |
| 6.质粒DNA的酶切分析和电泳鉴定 | 第33-34页 |
| 二.细胞培养技术 | 第34-35页 |
| 1.细胞培养用液的配制 | 第34页 |
| 2.细胞复苏 | 第34-35页 |
| 3.细胞传代 | 第35页 |
| 4.细胞冻存 | 第35页 |
| 三.细胞分组转染 | 第35-37页 |
| 1.细胞转染用液的配制 | 第35-36页 |
| 2.磷酸钙-DNA共沉淀物的制备 | 第36页 |
| 3.细胞分组转染培养 | 第36-37页 |
| 四.细胞收集与计数 | 第37-38页 |
| 1.收集细胞 | 第37-38页 |
| 2.细胞显微镜下计数 | 第38页 |
| 五.细胞转染效率的测定 | 第38-39页 |
| 1.所用试剂的配制 | 第38页 |
| 2.细胞转染效率的测定 | 第38-39页 |
| 六.细胞活化及细胞裂解液的制备 | 第39-42页 |
| 1.所用溶液的配制 | 第39-41页 |
| 2.细胞活化及细胞裂解液的制备 | 第41-42页 |
| 七.cAMP浓度的测定 | 第42-46页 |
| 1.所用试液的配制 | 第42页 |
| 2.~3H-cAMP的纯化及其纯度控制 | 第42-43页 |
| 3.标准cAMP的倍释及标准曲线的绘制 | 第43-44页 |
| 4.结合蛋白的制备及其结合力的测定 | 第44-45页 |
| 5.cAMP的测定程序 | 第45-46页 |
| 八.结果的统计学处理及AC活性分析 | 第46页 |
| 实验结果 | 第46-63页 |
| 一.RGS4对阿片受体偶联的AC活性的影响 | 第46-50页 |
| 1.RGS4对μ-受体偶联的AC活性的影响 | 第46-48页 |
| 2.RGS4对δ-受体偶联的AC活性的影响 | 第48-50页 |
| 二.GAIP对阿片受体偶联的AC活性的影响 | 第50-53页 |
| 1.GAIP对μ-受体偶联的AC活性的影响 | 第50-51页 |
| 2.GAIP对δ-受体偶联的AC活性的影响 | 第51-53页 |
| 三.RGS1对阿片受体偶联的AC活性的影响 | 第53-55页 |
| 1.RGS1对μ-受体偶联的AC活性的影响 | 第53页 |
| 2.RGS1对δ-受体偶联的AC活性的影响 | 第53-55页 |
| 四.RGS2对阿片受体偶联的AC活性的影响 | 第55-56页 |
| 1.RGS2对μ-受体偶联的AC活性的影响 | 第55-56页 |
| 2.RGS2对δ-受体偶联的AC活性的影响 | 第56页 |
| 五.RGS9对阿片受体偶联的AC活性的影响 | 第56-58页 |
| 1.RGS9对μ-受体偶联的AC活性的影响 | 第56-58页 |
| 2.RGS9对δ-受体偶联的AC活性的影响 | 第58页 |
| 六.RGS10对阿片受体偶联的AC活性的影响 | 第58-60页 |
| 1.RGS10对μ-受体偶联的AC活性的影响 | 第58-60页 |
| 2.RGS10对δ-受体偶联的AC活性的影响 | 第60页 |
| 七.RGS4对阿片受体突变体激活时AC活性的影响 | 第60-61页 |
| 1.RGS4对μ-δ6受体偶联的AC活性的影响 | 第60页 |
| 2.RGS4对δ-μ6受体偶联的AC活性的影响 | 第60-61页 |
| 八.GAIP对阿片受体突变体激活时AC活性的影响 | 第61-63页 |
| 1.GAIP对μ-δ6受体偶联的AC活性的影响 | 第61-62页 |
| 2.GAIP对δ-μ6受体偶联的AC活性的影响 | 第62-63页 |
| 讨论与结论 | 第63-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 综述Ⅰ.RGS蛋白的结构及其在G蛋白信号转导中的作用与调节 | 第79-113页 |
| 一.RGS蛋白的结构与同源关系 | 第83-86页 |
| 1.RGS domain | 第83-85页 |
| 2.RGS domain侧翼结构 | 第85页 |
| 3.RGS-Gα复合物的晶体结构 | 第85-86页 |
| 二.RGS蛋白的GAP活性及效应机制 | 第86-96页 |
| 1.RGS蛋白与Gα亚单位的相互作用 | 第87-88页 |
| 2.RGS蛋白作用的选择性 | 第88-89页 |
| 3.RGS蛋白作用的主要原理 | 第89-90页 |
| 4.RGS蛋白的GAP活性及其动力学研究 | 第90-91页 |
| 5.RGS蛋白GAP活性的分子机制 | 第91-93页 |
| 6.RGS蛋白GAP活性的调节效应 | 第93-95页 |
| 7.RGS蛋白与Gβγ的关系 | 第95-96页 |
| 三.RGS蛋白结构与功能的调节 | 第96-99页 |
| 1.RGS蛋白合成的调节 | 第96-97页 |
| 2.RGS蛋白稳定性的调节 | 第97-98页 |
| 3.RGS蛋白及Gα亚单位的共价修饰 | 第98-99页 |
| 4.其它胞内分子对RGS蛋白的调节作用 | 第99页 |
| 5.RGS蛋白的膜定位及其与受体的相互作用 | 第99页 |
| 四.RGS蛋白与非Gα分子的作用 | 第99-104页 |
| 1.PDZ domain、PTB domain和GoLoco motif的作用 | 第100-101页 |
| 2.GGL domain和DEP domain的作用 | 第101-102页 |
| 3.DH domain和PH domain的作用 | 第102页 |
| 4.Cysteine ring和Polybasic track | 第102-103页 |
| 5.其它结构域的作用 | 第103-104页 |
| 五.参考文献 | 第104-113页 |
| 综述Ⅱ.阿片受体及其信号转导与耐受成瘾机制的研究 | 第113-139页 |
| 一.阿片受体特性及结构与功能的研究 | 第116-121页 |
| 1.阿片受体的生物学特性 | 第116-117页 |
| 2.阿片受体多样性研究 | 第117页 |
| 3.阿片受体的分离纯化 | 第117-118页 |
| 4.阿片受体的克隆 | 第118-119页 |
| 5.阿片受体的选择性配体 | 第119-120页 |
| 6.阿片受体的广泛生理效应 | 第120页 |
| 7.阿片受体结构与功能的关系 | 第120-121页 |
| 二.阿片受体信号转导的分子基础 | 第121-125页 |
| 1.阿片受体与G蛋白α亚单位之间的偶联作用 | 第121-123页 |
| 2.阿片受体作用的主要效应体系 | 第123-125页 |
| 三.阿片受体作用的调节与耐受成瘾的关系 | 第125-130页 |
| 1.受体下调 | 第126-127页 |
| 2.脱敏 | 第127-128页 |
| 3.受体磷酸化 | 第128页 |
| 4.Gs偶联的兴奋性受体的作用 | 第128-129页 |
| 5.内源性抗阿片肽的作用 | 第129-130页 |
| 四.参考文献 | 第130-139页 |
| 致谢 | 第139页 |
