中文摘要 | 第1-8页 |
1 前言 | 第8-26页 |
1.1 研究目的和意义 | 第8页 |
1.2 文献综述 | 第8-26页 |
1.2.1 植物遗传转化方法 | 第8-12页 |
1.2.2 植物抗真菌基因工程研究进展 | 第12-15页 |
1.2.3 几丁质酶基因及其在抗真菌酶基因工程中的应用 | 第15-18页 |
1.2.4 转基因植株检测方法 | 第18-21页 |
1.2.5 黄瓜组织培养及遗传转化研究进展 | 第21-26页 |
2 材料与方法 | 第26-34页 |
2.1 黄瓜再生体系建立 | 第26-28页 |
2.1.1 试验材料 | 第26页 |
2.1.2 试验方法 | 第26-28页 |
2.1.2.1 无菌苗获得 | 第26页 |
2.1.2.2 不定芽诱导 | 第26-27页 |
2.1.2.3 胚性愈伤组织诱导 | 第27页 |
2.1.2.4 植株再生 | 第27页 |
2.1.2.5 驯化移栽 | 第27-28页 |
2.2 黄瓜遗传转化体系建立 | 第28-29页 |
2.2.1 试验材料 | 第28页 |
2.2.1.1 植物材料 | 第28页 |
2.2.1.2 菌株 | 第28页 |
2.2.2 试验方法 | 第28-29页 |
2.2.2.1 转化受体材料获得 | 第28页 |
2.2.2.2 菌株活化 | 第28-29页 |
2.2.2.3 遗传转化主要影响因素探讨 | 第29页 |
2.2.2.4 农杆菌介导遗传转化 | 第29页 |
2.2.2.5 卡那霉素筛选浓度确定 | 第29页 |
2.2.2.6 植株再生 | 第29页 |
2.3 PCR检测 | 第29-33页 |
2.3.1 试验材料 | 第29页 |
2.3.2 试验方法 | 第29-33页 |
2.3.2.1 植物微量DNA提取 | 第29-31页 |
2.3.2.2 质粒DNA提取 | 第31-32页 |
2.3.2.3 PCR扩增 | 第32-33页 |
2.4 统计分析方法 | 第33-34页 |
3 结果与讨论 | 第34-44页 |
3.1 黄瓜再生体系建立 | 第34-37页 |
3.1.1 影响黄瓜再生频率的因素 | 第34-35页 |
3.1.2 PGR对芽伸长的影响 | 第35-36页 |
3.1.3 蔗糖浓度及PGR配比对胚胎发生的影响 | 第36-37页 |
3.1.4 植株再生 | 第37页 |
3.2 黄瓜遗传转化体系建立 | 第37-41页 |
3.2.1 卡那霉素筛选浓度确定 | 第37-38页 |
3.2.2 影响遗传转化主要因素探讨 | 第38-41页 |
3.2.2.1 预培养 | 第38-39页 |
3.2.2.2 共培养培养基 | 第39页 |
3.2.2.3 pH值 | 第39-40页 |
3.2.2.4 处理方式 | 第40-41页 |
3.2.2.5 侵染时间 | 第41页 |
3.2.3 植株再生 | 第41页 |
3.3 转基因植株检测 | 第41-44页 |
3.3.1 以引物Ⅱ进行PCR扩增检测目的基因 | 第41-42页 |
3.3.2 以引物Ⅰ进行PCR扩增检测目的基因 | 第42-44页 |
4 结论 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
图版说明 | 第53-54页 |
图版 | 第54-57页 |