中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-12页 |
Ⅰ 文献综述 | 第12-26页 |
1 辣椒离体培养的研究进展 | 第12-15页 |
1.1 幼苗外植体器官再生 | 第12-13页 |
1.2 原生质体培养 | 第13-14页 |
1.3 花药培养 | 第14-15页 |
2 辣椒抗病基因工程研究中的主要问题与对策 | 第15-20页 |
2.1 辣椒抗病基因工程研究进展 | 第15-16页 |
2.2 辣椒抗病基因工程研究中存在的主要问题 | 第16-18页 |
2.3 对策和今后研究重点 | 第18-20页 |
3 几丁质酶和葡聚糖酶及其在植物抗病基因工程中的应用 | 第20-26页 |
3.1 几丁质酶和β-1,3-葡聚精酶的分类 | 第21-22页 |
3.2 几丁质酶和葡聚糖酶的生化特性 | 第22页 |
3.3 几丁质酶和葡聚糖酶与植物防卫反应 | 第22-23页 |
3.4 几丁质酶与葡聚糖酶在植物抗病基因工程中的应用 | 第23-24页 |
3.5 结语 | 第24-26页 |
Ⅱ 辣椒子叶高效植株再生体系的建立 | 第26-42页 |
材料与方法 | 第26-30页 |
1 材料 | 第26-29页 |
1.1 甜(辣)椒品种 | 第26页 |
1.2 培养基 | 第26-29页 |
2 方法 | 第29-30页 |
2.1 培养无菌苗 | 第29页 |
2.2 不定芽的诱导和分化 | 第29页 |
2.3 不定芽的伸长 | 第29页 |
2.4 生根 | 第29页 |
2.5 再生苗的移栽 | 第29-30页 |
结果与分析 | 第30-38页 |
1 不定芽的诱导与分化 | 第30-34页 |
1.1 辣椒基因型对子叶不定芽分化的影响 | 第30-31页 |
1.2 不同苗龄对子叶外植体不定芽分化的影响 | 第31页 |
1.3 激素及其配比对子叶不定芽分化的影响 | 第31-32页 |
1.4 DJ添加物与AgNO_3对子叶不定芽分化的作用 | 第32-33页 |
1.5 维生素对子叶不定芽分化的影响 | 第33-34页 |
1.6 高效芽分化培养基上芽分化情况 | 第34页 |
2 不定芽的伸长 | 第34-37页 |
2.1 芽分化培养基上不定芽伸长情况 | 第34-35页 |
2.2 GA_3对不定芽伸长的影响 | 第35-36页 |
2.3 有机成分及AgNO_3对不定芽伸长的作用 | 第36页 |
2.4 辣椒基因型对不定芽伸长的影响 | 第36-37页 |
3 生根及移栽成苗 | 第37-38页 |
讨论 | 第38-42页 |
1 关于DJ添加物对芽分化和芽伸长的促进作用 | 第38-39页 |
2 关于激素的使用 | 第39页 |
3 关于材料基因型对植株再生的影响 | 第39-40页 |
4 关于AgNO_3的作用 | 第40页 |
5 关于基本培养基的改进 | 第40页 |
6 关于一种培养基上成芽的探讨 | 第40页 |
7 关于所建立的辣椒子叶高效植株再生体系的评价 | 第40-42页 |
Ⅲ 辣椒子叶高效遗传转化体系的建立 | 第42-69页 |
材料与方法 | 第42-51页 |
1 材料 | 第42-46页 |
1.1 质粒及农杆菌菌株 | 第42页 |
1.2 受体品种 | 第42-43页 |
1.3 试验用培养基 | 第43页 |
1.4 基因枪微弹轰击试验用仪器和试剂 | 第43-44页 |
1.5 PCR分子检测所用引物、主要仪器和试剂 | 第44-46页 |
2 方法 | 第46-51页 |
2.1 农杆菌转染 | 第46页 |
2.2 基因枪微弹轰击 | 第46-48页 |
2.3 基因枪法结合农杆菌法转化 | 第48页 |
2.4 再生与选择 | 第48-49页 |
2.5 外植体的Km抗性水平 | 第49页 |
2.6 PCR检测 | 第49-51页 |
结果与分析 | 第51-56页 |
1 外植体Km抗性水平测定 | 第51页 |
2 农杆菌转染 | 第51-55页 |
2.1 感染前外植体预培养 | 第51-52页 |
2.2 农杆菌不同接种时间 | 第52页 |
2.3 感染后外植体共培养 | 第52-53页 |
2.4 共培养后的延迟选择 | 第53-54页 |
2.5 农杆菌转染子叶外植体再生植株获得 | 第54页 |
2.6 耐卡那霉素再生植株PCR检测 | 第54-55页 |
3 基因枪微弹轰击 | 第55页 |
4 基因枪法结合农杆菌法转化辣椒子叶 | 第55-56页 |
4.1 转化及外植体培养 | 第55-56页 |
4.2 耐卡那霉素再生植株PCR检测 | 第56页 |
讨论 | 第56-59页 |
1 关于抗生素Km的使用浓度和使用方法 | 第56-57页 |
2 关于转化及转化体培养条件的优化 | 第57页 |
3 关于转化方法的探讨 | 第57-58页 |
4 关于所建立的高效转化体系的评价 | 第58-59页 |
图版1-24 | 第59-69页 |
Ⅳ 几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因导入辣椒 | 第69-87页 |
材料和方法 | 第69-78页 |
1 材料 | 第69-72页 |
1.1 植物材料 | 第69页 |
1.2 供试质粒和农杆菌菌株 | 第69-70页 |
1.3 主要药品试剂 | 第70-72页 |
1.4 培养基 | 第72页 |
2 方法 | 第72-78页 |
2.1 植物材料培养 | 第72-73页 |
2.2 农杆菌培养及菌液准备 | 第73页 |
2.3 转化 | 第73页 |
2.4 PCR检测 | 第73页 |
2.5 PCR-Southern印迹 | 第73-77页 |
2.6 Southern杂交 | 第77-78页 |
结果与分析 | 第78-85页 |
1 农杆菌介导法导入几丁质酶基因和葡聚糖酶基因 | 第78-83页 |
1.1 转几丁质酶基因/葡聚糖酶基因再生植株的获得 | 第78页 |
1.2 转几丁质酶基因再生植株的获得 | 第78页 |
1.3 耐卡那霉素再生植株分子检测 | 第78-83页 |
2 基因枪+农杆菌法导入几丁质酶基因 | 第83-85页 |
2.1 耐卡那霉素再生植株的获得 | 第83页 |
2.2 耐卡那霉素再生植株的分子检测 | 第83-85页 |
讨论 | 第85-87页 |
1 关于辣椒导入几丁质酶基因和葡聚糖酶基因 | 第85页 |
2 关于不同分子检测手段的评价 | 第85页 |
3 关于假转化和假阳性再生株 | 第85-86页 |
4 关于遗传转化体系的评价 | 第86页 |
5 关于后期工作 | 第86-87页 |
Ⅴ 结论 | 第87-89页 |
1 辣椒子叶高效植株再生体系的建立 | 第87页 |
2 辣椒子叶高效遗传转化体系的建立 | 第87-88页 |
3 几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因导入辣椒 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-98页 |
附录1 | 第98-100页 |
致 谢 | 第100-102页 |
作者简历 | 第102页 |