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辣椒高效离体再生与遗传转化体系建立及抗病转基因研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-12页
Ⅰ 文献综述第12-26页
 1 辣椒离体培养的研究进展第12-15页
  1.1 幼苗外植体器官再生第12-13页
  1.2 原生质体培养第13-14页
  1.3 花药培养第14-15页
 2 辣椒抗病基因工程研究中的主要问题与对策第15-20页
  2.1 辣椒抗病基因工程研究进展第15-16页
  2.2 辣椒抗病基因工程研究中存在的主要问题第16-18页
  2.3 对策和今后研究重点第18-20页
 3 几丁质酶和葡聚糖酶及其在植物抗病基因工程中的应用第20-26页
  3.1 几丁质酶和β-1,3-葡聚精酶的分类第21-22页
  3.2 几丁质酶和葡聚糖酶的生化特性第22页
  3.3 几丁质酶和葡聚糖酶与植物防卫反应第22-23页
  3.4 几丁质酶与葡聚糖酶在植物抗病基因工程中的应用第23-24页
  3.5 结语第24-26页
Ⅱ 辣椒子叶高效植株再生体系的建立第26-42页
 材料与方法第26-30页
  1 材料第26-29页
   1.1 甜(辣)椒品种第26页
   1.2 培养基第26-29页
  2 方法第29-30页
   2.1 培养无菌苗第29页
   2.2 不定芽的诱导和分化第29页
   2.3 不定芽的伸长第29页
   2.4 生根第29页
   2.5 再生苗的移栽第29-30页
 结果与分析第30-38页
  1 不定芽的诱导与分化第30-34页
   1.1 辣椒基因型对子叶不定芽分化的影响第30-31页
   1.2 不同苗龄对子叶外植体不定芽分化的影响第31页
   1.3 激素及其配比对子叶不定芽分化的影响第31-32页
   1.4 DJ添加物与AgNO_3对子叶不定芽分化的作用第32-33页
   1.5 维生素对子叶不定芽分化的影响第33-34页
   1.6 高效芽分化培养基上芽分化情况第34页
  2 不定芽的伸长第34-37页
   2.1 芽分化培养基上不定芽伸长情况第34-35页
   2.2 GA_3对不定芽伸长的影响第35-36页
   2.3 有机成分及AgNO_3对不定芽伸长的作用第36页
   2.4 辣椒基因型对不定芽伸长的影响第36-37页
  3 生根及移栽成苗第37-38页
 讨论第38-42页
  1 关于DJ添加物对芽分化和芽伸长的促进作用第38-39页
  2 关于激素的使用第39页
  3 关于材料基因型对植株再生的影响第39-40页
  4 关于AgNO_3的作用第40页
  5 关于基本培养基的改进第40页
  6 关于一种培养基上成芽的探讨第40页
  7 关于所建立的辣椒子叶高效植株再生体系的评价第40-42页
Ⅲ 辣椒子叶高效遗传转化体系的建立第42-69页
 材料与方法第42-51页
  1 材料第42-46页
   1.1 质粒及农杆菌菌株第42页
   1.2 受体品种第42-43页
   1.3 试验用培养基第43页
   1.4 基因枪微弹轰击试验用仪器和试剂第43-44页
   1.5 PCR分子检测所用引物、主要仪器和试剂第44-46页
  2 方法第46-51页
   2.1 农杆菌转染第46页
   2.2 基因枪微弹轰击第46-48页
   2.3 基因枪法结合农杆菌法转化第48页
   2.4 再生与选择第48-49页
   2.5 外植体的Km抗性水平第49页
   2.6 PCR检测第49-51页
 结果与分析第51-56页
  1 外植体Km抗性水平测定第51页
  2 农杆菌转染第51-55页
   2.1 感染前外植体预培养第51-52页
   2.2 农杆菌不同接种时间第52页
   2.3 感染后外植体共培养第52-53页
   2.4 共培养后的延迟选择第53-54页
   2.5 农杆菌转染子叶外植体再生植株获得第54页
   2.6 耐卡那霉素再生植株PCR检测第54-55页
  3 基因枪微弹轰击第55页
  4 基因枪法结合农杆菌法转化辣椒子叶第55-56页
   4.1 转化及外植体培养第55-56页
   4.2 耐卡那霉素再生植株PCR检测第56页
 讨论第56-59页
  1 关于抗生素Km的使用浓度和使用方法第56-57页
  2 关于转化及转化体培养条件的优化第57页
  3 关于转化方法的探讨第57-58页
  4 关于所建立的高效转化体系的评价第58-59页
 图版1-24第59-69页
Ⅳ 几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因导入辣椒第69-87页
 材料和方法第69-78页
  1 材料第69-72页
   1.1 植物材料第69页
   1.2 供试质粒和农杆菌菌株第69-70页
   1.3 主要药品试剂第70-72页
   1.4 培养基第72页
  2 方法第72-78页
   2.1 植物材料培养第72-73页
   2.2 农杆菌培养及菌液准备第73页
   2.3 转化第73页
   2.4 PCR检测第73页
   2.5 PCR-Southern印迹第73-77页
   2.6 Southern杂交第77-78页
 结果与分析第78-85页
  1 农杆菌介导法导入几丁质酶基因和葡聚糖酶基因第78-83页
   1.1 转几丁质酶基因/葡聚糖酶基因再生植株的获得第78页
   1.2 转几丁质酶基因再生植株的获得第78页
   1.3 耐卡那霉素再生植株分子检测第78-83页
  2 基因枪+农杆菌法导入几丁质酶基因第83-85页
   2.1 耐卡那霉素再生植株的获得第83页
   2.2 耐卡那霉素再生植株的分子检测第83-85页
 讨论第85-87页
  1 关于辣椒导入几丁质酶基因和葡聚糖酶基因第85页
  2 关于不同分子检测手段的评价第85页
  3 关于假转化和假阳性再生株第85-86页
  4 关于遗传转化体系的评价第86页
  5 关于后期工作第86-87页
Ⅴ 结论第87-89页
 1 辣椒子叶高效植株再生体系的建立第87页
 2 辣椒子叶高效遗传转化体系的建立第87-88页
 3 几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因导入辣椒第88-89页
参考文献第89-98页
附录1第98-100页
致  谢第100-102页
作者简历第102页

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