湖南省柑橘类病毒的检测与分子分型研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-27页 |
| 1 类病毒研究进展 | 第10-17页 |
| ·类病毒的发现 | 第10-11页 |
| ·类病毒的结构 | 第11-12页 |
| ·一级结构 | 第11页 |
| ·二级结构 | 第11-12页 |
| ·类病毒的复制 | 第12-14页 |
| ·类病毒的位置 | 第12-13页 |
| ·类病毒的复制 | 第13-14页 |
| ·类病毒的分类 | 第14-16页 |
| ·类病毒的病害 | 第16页 |
| ·类病毒的防治 | 第16-17页 |
| ·类病毒的传播 | 第16页 |
| ·类病毒的防治 | 第16-17页 |
| 2 柑橘类病毒研究进展 | 第17-23页 |
| ·柑橘类病毒 | 第17页 |
| ·柑橘裂皮病类病毒(CEVd) | 第17-21页 |
| ·发生与危害 | 第17-18页 |
| ·病原 | 第18页 |
| ·致病机理 | 第18-19页 |
| ·株系分化 | 第19页 |
| ·寄主范围、症状表现及其传播途径 | 第19页 |
| ·检测及脱毒 | 第19-20页 |
| ·防治措施 | 第20-21页 |
| ·柑橘类病毒CVdⅠ | 第21-22页 |
| ·柑橘类病毒CVdⅡ(HSVd) | 第22页 |
| ·柑橘类病毒CVdⅢ | 第22页 |
| ·柑橘类病毒CVd-Ⅳ | 第22-23页 |
| ·柑橘类病毒CVd-OS | 第23页 |
| ·柑橘类病毒应用 | 第23页 |
| 3 植物类病毒检测技术研究进展 | 第23-26页 |
| ·生物学检测 | 第23-24页 |
| ·电子显微镜观察 | 第24页 |
| ·分子生物学检测 | 第24-25页 |
| ·RT-PCR检测 | 第24页 |
| ·mRT-PCR检测 | 第24-25页 |
| ·分子杂交检测 | 第25页 |
| ·电泳检测 | 第25-26页 |
| 4 研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 柑橘类病毒的调查与分子分型 | 第27-44页 |
| 1 材料与方法 | 第27-30页 |
| ·材料 | 第27-30页 |
| ·植物材料 | 第27-29页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第29-30页 |
| ·引物的设计与合成 | 第30页 |
| 2 方法 | 第30-33页 |
| ·柑橘核酸RNA的提取 | 第30-31页 |
| ·用于RT-PCR分析的RNA提取 | 第30-31页 |
| ·用于sPAGE垂直电泳的类病毒总RNA的提取 | 第31页 |
| ·柑橘类病毒的RT-PCR扩增检测 | 第31-32页 |
| ·柑橘类病毒的sPAGE检测 | 第32-33页 |
| ·柑橘类病毒的生物学检测 | 第33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-40页 |
| ·柑橘RNA的提取 | 第33-34页 |
| ·柑橘类病毒的RT-PCR分析 | 第34-37页 |
| ·RT-PCR检测CEVd | 第34页 |
| ·RT-PCR检测CVd-Ⅰ(CBLVd) | 第34-35页 |
| ·RT-PCR检测CVd-Ⅱ(HSVd) | 第35-36页 |
| ·RT-PCR检测CVd-Ⅲ | 第36-37页 |
| ·RT-PCR检测CVd-Ⅳ及其他柑橘类病毒 | 第37页 |
| ·生物学检测 | 第37-38页 |
| ·柑橘类病毒的sPAGE检测 | 第38-40页 |
| 3 讨论 | 第40-44页 |
| 第三章 柑橘类病毒全序列克隆及序列分析 | 第44-54页 |
| 1 材料与方法 | 第44-46页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·试剂及仪器 | 第44页 |
| ·RT-PCR扩增产物的纯化 | 第44-45页 |
| ·纯化产物的克隆、测序 | 第45-46页 |
| ·PCR扩增片段的克隆 | 第45-46页 |
| ·鉴定携带重组质粒的克隆 | 第46页 |
| ·阳性克隆测序 | 第46页 |
| ·生物信息学分析 | 第46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-53页 |
| ·柑橘类病毒的序列同源性分析 | 第46-53页 |
| ·柑橘裂皮病(CEVd)的克隆及序列分析 | 第46-47页 |
| ·柑橘CVdⅡ型类病毒的克隆及序列分析 | 第47-50页 |
| ·柑橘CVdⅢ型类病毒的克隆及序列分析 | 第50-53页 |
| 3 讨论 | 第53-54页 |
| ·类病毒的克隆 | 第53页 |
| ·类病毒序列分析 | 第53-54页 |
| 第四章 柑橘类病毒的纯化及初步矮化试验 | 第54-58页 |
| 1 材料与方法 | 第54页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·柑橘类病毒的保存与纯化 | 第54页 |
| ·柑橘类病毒的矮化 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-56页 |
| ·柑橘类病毒接种纯化 | 第54-55页 |
| ·柑橘类病毒初步矮化试验 | 第55-56页 |
| 3 讨论 | 第56-58页 |
| ·接种试验 | 第56页 |
| ·纯化途径 | 第56页 |
| ·矮化试验 | 第56-58页 |
| 全文总结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 附录 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 个人简历 | 第69-70页 |
