致谢 | 第1-12页 |
摘要 | 第12-14页 |
Abstract | 第14-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-37页 |
1 昆虫孤雌生殖的种类 | 第16-17页 |
·单倍体孤雌生殖 | 第16-17页 |
·自体融合 | 第17页 |
·无融合生殖 | 第17页 |
·核内有丝分裂 | 第17页 |
2 昆虫孤雌生殖的起源 | 第17-19页 |
·自发起源 | 第17-18页 |
·杂种起源 | 第18页 |
·传播起源 | 第18页 |
·感染起源 | 第18-19页 |
3 昆虫进行孤雌生殖的细胞学基础—中心体的形成 | 第19-21页 |
·中心体 | 第19-20页 |
·中心体在昆虫孤雌生殖中的作用 | 第20-21页 |
4 昆虫的卵巢结构和卵母细胞减数分裂的研究 | 第21-24页 |
·昆虫卵巢的结构类型 | 第21-23页 |
·卵子发生 | 第23-24页 |
5 鞘翅目昆虫染色体的研究 | 第24-25页 |
·鞘翅目昆虫染色体研究方法 | 第24页 |
·鞘翅目昆虫的染色体研究现状 | 第24-25页 |
6 AFLP标记及其在昆虫学研究中的应用 | 第25-30页 |
·AFLP的技术原理 | 第26-28页 |
·AFLP在昆虫遗传学、系统学和分子生物学研究中的应用 | 第28-30页 |
·构建遗传图谱 | 第28页 |
·遗传多样性和亲缘关系研究 | 第28-30页 |
·基因标记及定位 | 第30页 |
·植物抗虫基因的研究 | 第30页 |
7 抑制性消减杂交技术及其在基因克隆上的应用 | 第30-34页 |
8 稻水象甲和地理型孤雌生殖 | 第34-36页 |
·地理型孤雌生殖与多倍体现象 | 第34-35页 |
·稻水象和地理型孤雌生殖 | 第35-36页 |
9 本研究的目的和意义 | 第36-37页 |
第二章 虫口密度对孤雌生殖稻水象甲假死行为的影响 | 第37-49页 |
1 材料与方法 | 第37-39页 |
·寄主植物 | 第38页 |
·供试昆虫 | 第38页 |
·实验设计 | 第38-39页 |
·成虫饲养 | 第38页 |
·取食斑、虫重、假死的测量 | 第38-39页 |
·数据处理 | 第39页 |
2 结果与分析 | 第39-45页 |
·初始密度、当前密度、羽化天数对假死时间的影响 | 第39-40页 |
·虫口密度和羽化天数对假死时间的影响 | 第40-41页 |
·虫口密度和虫龄对刺激次数的影响 | 第41-44页 |
·虫口密度对虫重的影响 | 第44-45页 |
·假死时间、刺激刺激次数和体重的相关性 | 第45页 |
3 讨论 | 第45-49页 |
·虫口密度对假死的影响 | 第45-47页 |
·高龄稻水象甲是否更容易假死? | 第47-48页 |
·假死是否会增加扩散机会? | 第48-49页 |
第三章 孤雌生殖和两性生殖稻水象甲染色体核型分析 | 第49-58页 |
1 材料与方法 | 第49-51页 |
·供试虫源 | 第49页 |
·试剂 | 第49页 |
·配方 | 第49-50页 |
·实验方法 | 第50页 |
·显微镜观察 | 第50-51页 |
·染色体分析 | 第51页 |
2 结果与分析 | 第51-55页 |
·两性生殖型稻水象甲雄虫精母细胞的减数分裂和染色体观察 | 第51-53页 |
·孤雌生殖稻水象甲的染色体观察和核型分析 | 第53-55页 |
1) 卵巢中卵母细胞染色体和卵的染色体观察 | 第53页 |
2) 染色体核型分析 | 第53-55页 |
3 讨论 | 第55-58页 |
第四章 孤雌生殖稻水象甲卵巢结构和卵母细胞分裂的观察 | 第58-66页 |
1 材料与方法 | 第58-61页 |
·试剂 | 第58-59页 |
·供试昆虫 | 第59页 |
·细胞骨架的观察与分析 | 第59-60页 |
·卵巢结构的观察 | 第60-61页 |
·卵巢的透射电镜观察 | 第61页 |
2 结果与分析 | 第61-64页 |
·卵巢结构的观察 | 第61-63页 |
·卵母细胞减数分裂的观察 | 第63-64页 |
3 讨论 | 第64-66页 |
第五章 两种生殖方式稻水象甲地理种群的遗传多态性 | 第66-91页 |
1 材料与方法 | 第67-79页 |
·供试昆虫 | 第67页 |
·试剂 | 第67-69页 |
·实验方法 | 第69-79页 |
·基因组DNA的提取 | 第69-70页 |
·基因组DNA的双酶切 | 第70-71页 |
·接头制作 | 第71页 |
·酶切产物加接头 | 第71-72页 |
·预扩增 | 第72页 |
·选择性扩增 | 第72-74页 |
·凝胶制备 | 第74页 |
·电泳 | 第74页 |
·银染 | 第74-75页 |
·凝胶扫描、分析 | 第75页 |
·聚类分析 | 第75页 |
·特异条带的回收 | 第75-76页 |
·目的片段回收纯化 | 第76-77页 |
·载体连接 | 第77页 |
·感受态细胞的制备 | 第77-78页 |
·转化 | 第78页 |
·挑取阳性克隆 | 第78页 |
·阳性克隆的检测 | 第78-79页 |
·测序 | 第79页 |
2 结果与分析 | 第79-86页 |
·基因组DNA的提取 | 第79-80页 |
·基因池的构建 | 第80页 |
·酶切效果 | 第80页 |
·AFLP分析 | 第80-82页 |
·遗传多态性分析 | 第80-81页 |
·各地理种群遗传相似性分析和聚类分析 | 第81-82页 |
·差异片段序列分析 | 第82-86页 |
·共分离片段的克隆测序 | 第83-84页 |
·序列分析 | 第84-86页 |
1) 能量代谢相关基因 | 第84-85页 |
2) 细胞增殖与分化相关基因 | 第85-86页 |
3) 信号转导途径相关基因 | 第86页 |
4) 功能未知基因 | 第86页 |
3 讨论 | 第86-91页 |
·稻水象甲遗传分化 | 第87-88页 |
·孤雌生殖形成的一些可能的分子机制 | 第88-91页 |
第六章 孤雌生殖与两性生殖稻水象甲卵巢cDNA消减文库的构建与序列分析 | 第91-124页 |
1 材料与方法 | 第92-103页 |
·供试昆虫 | 第92页 |
·试剂 | 第92页 |
·实验方法 | 第92-103页 |
·RNA提取 | 第92-93页 |
·RNA电泳 | 第93页 |
·第一链cDNA合成 | 第93-94页 |
·第一链cDNA合成的纯化 | 第94-95页 |
·第二链cDNA的合成 | 第95-96页 |
·双链cDNA的纯化 | 第96-97页 |
·RsaI酶切 | 第97页 |
·酶切产物的纯化 | 第97-98页 |
·Tester样品酶切产物加接头 | 第98-99页 |
·抑制性消减杂交——第一轮杂交 | 第99页 |
·抑制性消减杂交——第二轮杂交 | 第99-100页 |
·巢式PCR扩增——第一次PCR扩增 | 第100-101页 |
·巢式PCR扩增——第二次PCR扩增 | 第101-102页 |
·T载体连接 | 第102页 |
·转化 | 第102页 |
·挑取阳性克隆 | 第102页 |
·阳性克隆的检测 | 第102页 |
·阳性克隆测序 | 第102页 |
·差减效果检验 | 第102-103页 |
·序列结果分析 | 第103页 |
2 结果与分析 | 第103-119页 |
·总RNA的提取 | 第103-104页 |
·双链cDNA的合成 | 第104-105页 |
·双链cDNA的纯化 | 第105页 |
·孤雌生殖和两性生殖稻水象甲卵巢cDNA的酶切 | 第105-106页 |
·孤雌生殖和两性生殖稻水象甲卵巢cDNA的酶切产物的纯化 | 第106-107页 |
·巢式PCR扩增 | 第107页 |
·消减文库的构建 | 第107-108页 |
·消减结果的验证 | 第108-109页 |
·孤雌生殖相关序列分析 | 第109-119页 |
1) 细胞结构相关基因 | 第109-112页 |
2) 糖、蛋白质合成和代谢相关基因 | 第112-113页 |
3) 细胞内运输机制相关基因 | 第113-114页 |
4) 能量传递相关基因 | 第114-115页 |
5) 转录相关基因 | 第115页 |
6) 细胞信号转导相关基因 | 第115-117页 |
7) 细胞周期蛋白和凋亡相关基因 | 第117-119页 |
8) 功能不明确基因 | 第119页 |
3 讨论 | 第119-124页 |
·细胞结构相关基因 | 第119-120页 |
·糖、蛋白质合成和代谢相关基因 | 第120页 |
·细胞内运输机制相关基因 | 第120页 |
·能量传递相关基因 | 第120-121页 |
·转录相关基因 | 第121页 |
·细胞信号转导相关基因 | 第121-122页 |
·细胞周期蛋白和凋亡相关基因 | 第122-124页 |
第七章 结论和总讨论 | 第124-128页 |
·虫口密度对假死行为的影响 | 第124页 |
·三倍体、孤雌生殖和Wolbachia | 第124-125页 |
·两种生殖方式稻水象甲的地理种群多态性 | 第125页 |
·孤雌生殖形成的可能分子机制 | 第125-126页 |
·本论文的创新之处 | 第126页 |
·今后的研究方向 | 第126-128页 |
参考文献 | 第128-139页 |
附录 | 第139页 |