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稻水象甲地理型孤雌生殖的研究

致谢第1-12页
摘要第12-14页
Abstract第14-16页
第一章 文献综述第16-37页
 1 昆虫孤雌生殖的种类第16-17页
   ·单倍体孤雌生殖第16-17页
   ·自体融合第17页
   ·无融合生殖第17页
   ·核内有丝分裂第17页
 2 昆虫孤雌生殖的起源第17-19页
   ·自发起源第17-18页
   ·杂种起源第18页
   ·传播起源第18页
   ·感染起源第18-19页
 3 昆虫进行孤雌生殖的细胞学基础—中心体的形成第19-21页
   ·中心体第19-20页
   ·中心体在昆虫孤雌生殖中的作用第20-21页
 4 昆虫的卵巢结构和卵母细胞减数分裂的研究第21-24页
   ·昆虫卵巢的结构类型第21-23页
   ·卵子发生第23-24页
 5 鞘翅目昆虫染色体的研究第24-25页
   ·鞘翅目昆虫染色体研究方法第24页
   ·鞘翅目昆虫的染色体研究现状第24-25页
 6 AFLP标记及其在昆虫学研究中的应用第25-30页
   ·AFLP的技术原理第26-28页
   ·AFLP在昆虫遗传学、系统学和分子生物学研究中的应用第28-30页
     ·构建遗传图谱第28页
     ·遗传多样性和亲缘关系研究第28-30页
     ·基因标记及定位第30页
     ·植物抗虫基因的研究第30页
 7 抑制性消减杂交技术及其在基因克隆上的应用第30-34页
 8 稻水象甲和地理型孤雌生殖第34-36页
   ·地理型孤雌生殖与多倍体现象第34-35页
   ·稻水象和地理型孤雌生殖第35-36页
 9 本研究的目的和意义第36-37页
第二章 虫口密度对孤雌生殖稻水象甲假死行为的影响第37-49页
 1 材料与方法第37-39页
   ·寄主植物第38页
   ·供试昆虫第38页
   ·实验设计第38-39页
     ·成虫饲养第38页
     ·取食斑、虫重、假死的测量第38-39页
     ·数据处理第39页
 2 结果与分析第39-45页
   ·初始密度、当前密度、羽化天数对假死时间的影响第39-40页
   ·虫口密度和羽化天数对假死时间的影响第40-41页
   ·虫口密度和虫龄对刺激次数的影响第41-44页
   ·虫口密度对虫重的影响第44-45页
   ·假死时间、刺激刺激次数和体重的相关性第45页
 3 讨论第45-49页
   ·虫口密度对假死的影响第45-47页
   ·高龄稻水象甲是否更容易假死?第47-48页
   ·假死是否会增加扩散机会?第48-49页
第三章 孤雌生殖和两性生殖稻水象甲染色体核型分析第49-58页
 1 材料与方法第49-51页
   ·供试虫源第49页
   ·试剂第49页
   ·配方第49-50页
   ·实验方法第50页
   ·显微镜观察第50-51页
   ·染色体分析第51页
 2 结果与分析第51-55页
   ·两性生殖型稻水象甲雄虫精母细胞的减数分裂和染色体观察第51-53页
   ·孤雌生殖稻水象甲的染色体观察和核型分析第53-55页
   1) 卵巢中卵母细胞染色体和卵的染色体观察第53页
   2) 染色体核型分析第53-55页
 3 讨论第55-58页
第四章 孤雌生殖稻水象甲卵巢结构和卵母细胞分裂的观察第58-66页
 1 材料与方法第58-61页
   ·试剂第58-59页
   ·供试昆虫第59页
   ·细胞骨架的观察与分析第59-60页
   ·卵巢结构的观察第60-61页
   ·卵巢的透射电镜观察第61页
 2 结果与分析第61-64页
   ·卵巢结构的观察第61-63页
   ·卵母细胞减数分裂的观察第63-64页
 3 讨论第64-66页
第五章 两种生殖方式稻水象甲地理种群的遗传多态性第66-91页
 1 材料与方法第67-79页
   ·供试昆虫第67页
   ·试剂第67-69页
   ·实验方法第69-79页
     ·基因组DNA的提取第69-70页
     ·基因组DNA的双酶切第70-71页
     ·接头制作第71页
     ·酶切产物加接头第71-72页
     ·预扩增第72页
     ·选择性扩增第72-74页
     ·凝胶制备第74页
     ·电泳第74页
     ·银染第74-75页
     ·凝胶扫描、分析第75页
     ·聚类分析第75页
     ·特异条带的回收第75-76页
     ·目的片段回收纯化第76-77页
     ·载体连接第77页
     ·感受态细胞的制备第77-78页
     ·转化第78页
     ·挑取阳性克隆第78页
     ·阳性克隆的检测第78-79页
     ·测序第79页
 2 结果与分析第79-86页
   ·基因组DNA的提取第79-80页
   ·基因池的构建第80页
   ·酶切效果第80页
   ·AFLP分析第80-82页
     ·遗传多态性分析第80-81页
     ·各地理种群遗传相似性分析和聚类分析第81-82页
   ·差异片段序列分析第82-86页
     ·共分离片段的克隆测序第83-84页
     ·序列分析第84-86页
    1) 能量代谢相关基因第84-85页
    2) 细胞增殖与分化相关基因第85-86页
    3) 信号转导途径相关基因第86页
    4) 功能未知基因第86页
 3 讨论第86-91页
   ·稻水象甲遗传分化第87-88页
   ·孤雌生殖形成的一些可能的分子机制第88-91页
第六章 孤雌生殖与两性生殖稻水象甲卵巢cDNA消减文库的构建与序列分析第91-124页
 1 材料与方法第92-103页
   ·供试昆虫第92页
   ·试剂第92页
   ·实验方法第92-103页
     ·RNA提取第92-93页
     ·RNA电泳第93页
     ·第一链cDNA合成第93-94页
     ·第一链cDNA合成的纯化第94-95页
     ·第二链cDNA的合成第95-96页
     ·双链cDNA的纯化第96-97页
     ·RsaI酶切第97页
     ·酶切产物的纯化第97-98页
     ·Tester样品酶切产物加接头第98-99页
     ·抑制性消减杂交——第一轮杂交第99页
     ·抑制性消减杂交——第二轮杂交第99-100页
     ·巢式PCR扩增——第一次PCR扩增第100-101页
     ·巢式PCR扩增——第二次PCR扩增第101-102页
     ·T载体连接第102页
     ·转化第102页
     ·挑取阳性克隆第102页
     ·阳性克隆的检测第102页
     ·阳性克隆测序第102页
     ·差减效果检验第102-103页
     ·序列结果分析第103页
 2 结果与分析第103-119页
   ·总RNA的提取第103-104页
   ·双链cDNA的合成第104-105页
   ·双链cDNA的纯化第105页
   ·孤雌生殖和两性生殖稻水象甲卵巢cDNA的酶切第105-106页
   ·孤雌生殖和两性生殖稻水象甲卵巢cDNA的酶切产物的纯化第106-107页
   ·巢式PCR扩增第107页
   ·消减文库的构建第107-108页
   ·消减结果的验证第108-109页
   ·孤雌生殖相关序列分析第109-119页
   1) 细胞结构相关基因第109-112页
   2) 糖、蛋白质合成和代谢相关基因第112-113页
   3) 细胞内运输机制相关基因第113-114页
   4) 能量传递相关基因第114-115页
   5) 转录相关基因第115页
   6) 细胞信号转导相关基因第115-117页
   7) 细胞周期蛋白和凋亡相关基因第117-119页
   8) 功能不明确基因第119页
 3 讨论第119-124页
   ·细胞结构相关基因第119-120页
   ·糖、蛋白质合成和代谢相关基因第120页
   ·细胞内运输机制相关基因第120页
   ·能量传递相关基因第120-121页
   ·转录相关基因第121页
   ·细胞信号转导相关基因第121-122页
   ·细胞周期蛋白和凋亡相关基因第122-124页
第七章 结论和总讨论第124-128页
   ·虫口密度对假死行为的影响第124页
   ·三倍体、孤雌生殖和Wolbachia第124-125页
   ·两种生殖方式稻水象甲的地理种群多态性第125页
   ·孤雌生殖形成的可能分子机制第125-126页
   ·本论文的创新之处第126页
   ·今后的研究方向第126-128页
参考文献第128-139页
附录第139页

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