| 缩略语表 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 文献回顾 | 第18-31页 |
| (一) 宫颈癌化疗敏感性相关基因的研究进展 | 第18-24页 |
| (二) NDRG2 的研究现状 | 第24-31页 |
| 正文 | 第31-97页 |
| 第一部分NDRG2 参与肿瘤细胞DNA损伤应激反应 | 第31-44页 |
| 1. 实验材料和主要仪器 | 第32-34页 |
| ·试剂和细胞系 | 第32-33页 |
| ·RT-PCR引物 | 第33页 |
| ·仪器 | 第33-34页 |
| 2. 实验方法 | 第34-38页 |
| ·细胞培养及顺铂药物刺激 | 第34页 |
| ·半定量RT-PCR | 第34-36页 |
| ·Western Blot | 第36-38页 |
| 3. 实验结果 | 第38-41页 |
| ·在mRNA水平，NDRG2 基因随顺铂刺激时间的延长而呈现峰值曲线样变化 | 第38-41页 |
| ·在蛋白质水平，NDRG2 基因随顺铂刺激时间的延长而呈现峰值曲线样变化 | 第41页 |
| 4. 讨论 | 第41-44页 |
| 第二部分 NDRG2 参与了Hela细胞对顺铂化疗敏感性的调节 | 第44-61页 |
| 1. 实验材料和主要仪器 | 第44-45页 |
| ·试剂和细胞系 | 第44-45页 |
| ·Real-time PCR引物 | 第45页 |
| ·仪器 | 第45页 |
| 2. 实验方法 | 第45-49页 |
| ·稳转细胞系NDRG2 表达水平鉴定 | 第45-47页 |
| ·Real-time PCR | 第46页 |
| ·Western Blot | 第46-47页 |
| ·四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞对顺铂的5096抑制浓度 | 第47页 |
| ·平板克隆形成实验检测细胞在顺铂作用下的克隆率 | 第47-48页 |
| ·流式细胞术检测细胞在顺铂作用下的凋亡率 | 第48-49页 |
| 3. 实验结果 | 第49-55页 |
| ·在mRNA水平，NDRG2 下调稳转细胞系Hela-nd1925iRNA及G7 细胞NDRG2 表达水平均较对照Hela-pSilencer明显降低 | 第49页 |
| ·在蛋白水平，NDRG2 下调稳转细胞系Hela-nd1925iRNA及G7 细胞NDRG2 表达水平均较对照Hela-pSilencer明显降低 | 第49-51页 |
| ·四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT比色法）结果显示抑制NDRG2 表达可以降低Hela细胞在顺铂作用下的体外存活率 | 第51-52页 |
| ·抑制NDRG2 表达可以降低宫颈癌Hela细胞在顺铂作用下的克隆形成能力 | 第52-55页 |
| ·抑制NDRG2 表达可以增加顺铂诱导的Hela细胞凋亡率 | 第55页 |
| 4. 讨论 | 第55-61页 |
| 第三部分 siRNA瞬时转染验证NDRG2 参与了Hela细胞对顺铂化疗敏感性的调节 | 第61-74页 |
| 1. 实验材料和主要仪器 | 第61-64页 |
| ·试剂和细胞系 | 第61-62页 |
| ·人NDRG2 基因特异性siRNA oligomer由美国Invitrogen 公司设 计并合成 NDRG2-HSS126268: | 第62页 |
| ·RT-PCR引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成 NDRG2: | 第62-64页 |
| ·仪器 | 第64页 |
| 2. 实验方法 | 第64-67页 |
| ·细胞培养及瞬时转染 | 第64-65页 |
| ·半定量RT-PCR | 第65页 |
| ·Western Blot | 第65页 |
| ·四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞对顺铂的5096抑制浓度 | 第65-67页 |
| 3. 实验结果 | 第67-72页 |
| ·在mRNA水平，化学合成的三对NDRG2 基因特异性siRNA oligomer均可使Hela细胞的NDRG2 表达明显降低 | 第67页 |
| ·在蛋白水平，化学合成的三对NDRG2 基因特异性siRNA oligomer均可使Hela细胞的NDRG2 表达降低 | 第67-70页 |
| ·四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT比色法）结果显示抑制NDRG2 表达可以降低Hela细胞在顺铂作用下的体外存活率 | 第70-72页 |
| 4. 讨论 | 第72-74页 |
| 第四部分 NDRG2 参与Hela细胞对顺铂化疗敏感性的调节机制的探讨 | 第74-84页 |
| 1. 实验材料和主要仪器 | 第74-76页 |
| ·试剂和细胞系 | 第74-75页 |
| ·RT-PCR引物由北京奥科生物工程技术服务有限公司合成 | 第75页 |
| ·仪器 | 第75-76页 |
| 2. 实验方法 | 第76页 |
| ·细胞培养及瞬时转染 | 第76页 |
| ·半定量RT-PCR | 第76页 |
| ·Western Blot | 第76页 |
| 3. 实验结果 | 第76-78页 |
| ·稳定转染细胞系与亲本细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的变化 | 第76-77页 |
| ·Hela、 Hela-nd1925iRNA细胞对于顺铂作用不同时相 P53 蛋白表达水平的变化 | 第77-78页 |
| ·在蛋白水平，化学合成的三对NDRG2 基因特异性siRNA oligomer均可使Hela细胞的P53 表达增高 | 第78页 |
| ·稳定转染细胞系与亲本细胞HPV18E6 RNA表达水平的变化 | 第78页 |
| 4. 讨论 | 第78-84页 |
| 小结 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-97页 |
| 个人简历和研究成果 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
