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两种双壳贝类和光棘球海胆微卫星标记的分离及特性研究

中文摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一章 文献综述第11-33页
 第一节 DNA 分子遗传学标记概论第11-23页
   ·限制性片段长度多态性(RFLP)第12-14页
   ·随机扩增多态性DNA(RAPD)第14-16页
   ·扩增片段长度多态性(AFLP)第16-18页
   ·简单序列重复间区的DNA 序列(ISSR)第18-19页
   ·单链构象多态性(SSCP)第19-20页
   ·单核苷酸多态性(SNP)第20-21页
   ·表达序列标签(EST)第21-23页
 第二节 微卫星分子标记概述第23-29页
   ·SSR 标记的原理第23-24页
   ·SSR 标记的特点第24页
   ·SSR 标记的应用第24-26页
   ·国内外水产动物SSR 标记的开发现状第26-28页
   ·SSR 标记的不足之处和发展前景第28-29页
 第三节 微卫星分子标记的开发方法第29-32页
   ·经典法第29页
   ·富集法第29-30页
     ·杂交选择法第29页
     ·引物延伸法第29-30页
     ·FIASCO 法第30页
   ·省略筛库法第30页
   ·ISSR 片段扩增法第30页
   ·数据库检索法第30-32页
 第四节 本研究的总体设计和研究策略第32-33页
第二章 西施舌和魁蚶微卫星磁珠杂交筛选法的构建第33-49页
 前言第33-35页
 第一节 材料与方法第35-40页
   ·实验材料第35页
   ·实验方法第35-40页
     ·样品处理第35页
     ·DNA 提取第35-36页
     ·磁珠杂交筛选第36-38页
       ·DNA 酶切第36页
       ·接头连接第36页
       ·DNA 片段的胶回收第36-37页
       ·磁珠杂交富集第37页
       ·衔接头PCR 反应第37-38页
       ·PCR 产物纯化第38页
     ·TA 克隆及PCR 筛选第38-39页
       ·制备大肠杆菌感受态细胞第38页
       ·连接转化反应第38-39页
       ·PCR 筛选第39页
     ·测序第39-40页
 第二节 实验结果第40-46页
   ·样品DNA 酶切和接头连接结果第40-41页
   ·磁珠杂交结果第41页
   ·蓝白斑筛选第41-42页
   ·PCR 筛选结果第42页
   ·测序结果第42-46页
 第三节 讨论第46-49页
   ·限制性内切酶的选择第46页
   ·杂交探针的选择第46页
   ·杂交条件对筛选结果的影响第46-47页
   ·磁珠杂交筛选法的富集效率第47-49页
第三章 光棘球海胆 EST-SSR 的分离第49-54页
 前言第49-51页
 第一节 EST-SSR 筛选方法第51页
 第二节 EST-SSR 筛选结果第51-53页
 第三节 讨论第53-54页
第四章 西施舌、魁蚶与光棘球海胆的微卫星多态性检测第54-69页
 前言第54-55页
 第一节 材料与方法第55-60页
   ·实验材料第55页
   ·实验方法第55-60页
     ·样品处理第55页
       ·西施舌和魁蚶样品处理第55页
       ·光棘球海胆样品处理第55页
     ·DNA 提取第55-56页
       ·西施舌和魁蚶DNA 提取第55-56页
       ·光棘球海胆DNA 提取第56页
     ·设计引物第56-57页
     ·引物筛选第57页
     ·多态性检测第57-59页
       ·群体样品PCR 扩增第57-58页
       ·变性聚丙烯酰胺凝胶板的制备第58页
       ·电泳第58页
       ·银染显色第58-59页
     ·结果记录及数据分析第59-60页
 第二节 实验结果第60-66页
   ·引物琼脂糖凝胶检测第60-61页
   ·引物多态性检测第61页
   ·多态性微卫星引物的筛选结果第61-66页
     ·西施舌多态性微卫星引物的筛选结果第61-62页
     ·魁蚶多态性微卫星引物的筛选结果第62页
     ·光棘球海胆多态性微卫星引物的筛选结果第62-66页
 第三节 讨论第66-69页
   ·引物设计参数第66页
   ·微卫星多态性检测选择非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第66-67页
   ·EST-SSR 的内含子第67页
   ·来自基因组与来自ESTs 的微卫星标记比较第67页
   ·无效等位基因第67-68页
   ·“结巴”带第68-69页
参考文献第69-80页
致谢第80-81页
硕士就读期间已发表的文章第81页

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