中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-33页 |
第一节 DNA 分子遗传学标记概论 | 第11-23页 |
·限制性片段长度多态性(RFLP) | 第12-14页 |
·随机扩增多态性DNA(RAPD) | 第14-16页 |
·扩增片段长度多态性(AFLP) | 第16-18页 |
·简单序列重复间区的DNA 序列(ISSR) | 第18-19页 |
·单链构象多态性(SSCP) | 第19-20页 |
·单核苷酸多态性(SNP) | 第20-21页 |
·表达序列标签(EST) | 第21-23页 |
第二节 微卫星分子标记概述 | 第23-29页 |
·SSR 标记的原理 | 第23-24页 |
·SSR 标记的特点 | 第24页 |
·SSR 标记的应用 | 第24-26页 |
·国内外水产动物SSR 标记的开发现状 | 第26-28页 |
·SSR 标记的不足之处和发展前景 | 第28-29页 |
第三节 微卫星分子标记的开发方法 | 第29-32页 |
·经典法 | 第29页 |
·富集法 | 第29-30页 |
·杂交选择法 | 第29页 |
·引物延伸法 | 第29-30页 |
·FIASCO 法 | 第30页 |
·省略筛库法 | 第30页 |
·ISSR 片段扩增法 | 第30页 |
·数据库检索法 | 第30-32页 |
第四节 本研究的总体设计和研究策略 | 第32-33页 |
第二章 西施舌和魁蚶微卫星磁珠杂交筛选法的构建 | 第33-49页 |
前言 | 第33-35页 |
第一节 材料与方法 | 第35-40页 |
·实验材料 | 第35页 |
·实验方法 | 第35-40页 |
·样品处理 | 第35页 |
·DNA 提取 | 第35-36页 |
·磁珠杂交筛选 | 第36-38页 |
·DNA 酶切 | 第36页 |
·接头连接 | 第36页 |
·DNA 片段的胶回收 | 第36-37页 |
·磁珠杂交富集 | 第37页 |
·衔接头PCR 反应 | 第37-38页 |
·PCR 产物纯化 | 第38页 |
·TA 克隆及PCR 筛选 | 第38-39页 |
·制备大肠杆菌感受态细胞 | 第38页 |
·连接转化反应 | 第38-39页 |
·PCR 筛选 | 第39页 |
·测序 | 第39-40页 |
第二节 实验结果 | 第40-46页 |
·样品DNA 酶切和接头连接结果 | 第40-41页 |
·磁珠杂交结果 | 第41页 |
·蓝白斑筛选 | 第41-42页 |
·PCR 筛选结果 | 第42页 |
·测序结果 | 第42-46页 |
第三节 讨论 | 第46-49页 |
·限制性内切酶的选择 | 第46页 |
·杂交探针的选择 | 第46页 |
·杂交条件对筛选结果的影响 | 第46-47页 |
·磁珠杂交筛选法的富集效率 | 第47-49页 |
第三章 光棘球海胆 EST-SSR 的分离 | 第49-54页 |
前言 | 第49-51页 |
第一节 EST-SSR 筛选方法 | 第51页 |
第二节 EST-SSR 筛选结果 | 第51-53页 |
第三节 讨论 | 第53-54页 |
第四章 西施舌、魁蚶与光棘球海胆的微卫星多态性检测 | 第54-69页 |
前言 | 第54-55页 |
第一节 材料与方法 | 第55-60页 |
·实验材料 | 第55页 |
·实验方法 | 第55-60页 |
·样品处理 | 第55页 |
·西施舌和魁蚶样品处理 | 第55页 |
·光棘球海胆样品处理 | 第55页 |
·DNA 提取 | 第55-56页 |
·西施舌和魁蚶DNA 提取 | 第55-56页 |
·光棘球海胆DNA 提取 | 第56页 |
·设计引物 | 第56-57页 |
·引物筛选 | 第57页 |
·多态性检测 | 第57-59页 |
·群体样品PCR 扩增 | 第57-58页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶板的制备 | 第58页 |
·电泳 | 第58页 |
·银染显色 | 第58-59页 |
·结果记录及数据分析 | 第59-60页 |
第二节 实验结果 | 第60-66页 |
·引物琼脂糖凝胶检测 | 第60-61页 |
·引物多态性检测 | 第61页 |
·多态性微卫星引物的筛选结果 | 第61-66页 |
·西施舌多态性微卫星引物的筛选结果 | 第61-62页 |
·魁蚶多态性微卫星引物的筛选结果 | 第62页 |
·光棘球海胆多态性微卫星引物的筛选结果 | 第62-66页 |
第三节 讨论 | 第66-69页 |
·引物设计参数 | 第66页 |
·微卫星多态性检测选择非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第66-67页 |
·EST-SSR 的内含子 | 第67页 |
·来自基因组与来自ESTs 的微卫星标记比较 | 第67页 |
·无效等位基因 | 第67-68页 |
·“结巴”带 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
硕士就读期间已发表的文章 | 第81页 |