| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-41页 |
| 1 昆虫的胚胎发育 | 第12-20页 |
| ·概述 | 第12-13页 |
| ·果蝇胚胎发育的研究进展 | 第13-16页 |
| ·家蚕胚胎发育的研究进展 | 第16-20页 |
| 2 昆虫的生殖细胞发育 | 第20-27页 |
| ·原始生殖细胞的产生 | 第20-25页 |
| ·生殖干细胞的发育 | 第25-27页 |
| 3 生殖细胞发育相关基因的研究进展 | 第27-32页 |
| ·vasa 基因的研究 | 第27-29页 |
| ·achi 基因的研究 | 第29-32页 |
| 4 研究目的和意义 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-41页 |
| 第二章 材料与方法 | 第41-56页 |
| 1 一般材料 | 第41-46页 |
| ·载体与菌种 | 第41页 |
| ·细胞 | 第41页 |
| ·生物材料 | 第41页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第41页 |
| ·其它试剂 | 第41-42页 |
| ·主要实验试剂的配制 | 第42-46页 |
| 2 实验常用仪器设备 | 第46页 |
| 3 常用实验方法 | 第46-55页 |
| ·碱裂解法制备质粒DNA | 第46-47页 |
| ·基因组DNA 提取 | 第47-48页 |
| ·PCR 扩增 | 第48页 |
| ·酶切反应 | 第48-49页 |
| ·连接反应 | 第49页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第49页 |
| ·连接产物的转化 | 第49页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第49-50页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第50页 |
| ·分离回收目的片段 | 第50页 |
| ·SDS-PAGE 蛋白质电泳 | 第50-51页 |
| ·SDS-PAGE 凝胶的染色和脱色 | 第51页 |
| ·Western blotting | 第51-52页 |
| ·B mN 细胞的转染 | 第52-53页 |
| ·载体在家蚕组织中的转染 | 第53页 |
| ·总RNA 的提取 | 第53页 |
| ·RNA 反转录成cDNA | 第53页 |
| ·纯化过柱 | 第53-54页 |
| ·多克隆抗体的制作 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-56页 |
| 第三章 家蚕 vasa 样基因启动子的克隆与活性分析 | 第56-68页 |
| 1 材料与方法 | 第57-59页 |
| ·试剂材料 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-64页 |
| ·PCR 扩增、克隆及序列测定 | 第59页 |
| ·由Bmvlg 启动子驱动报告基因DsRed 的瞬时表达载体的构建 | 第59-60页 |
| ·Bmvlg 启动子序列分析 | 第60-62页 |
| ·Bmvlg 启动子区域的单链二级结构分析 | 第62-63页 |
| ·vasa-like 基因启动子序列同源性比较 | 第63页 |
| ·瞬时表达载体在家蚕BmN 细胞、家蚕组织和蚕卵中的瞬时表达 | 第63-64页 |
| 3 讨论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| 第四章 家蚕 vasa 样基因表达的可变剪接 | 第68-77页 |
| 1 材料与方法 | 第69-70页 |
| ·试剂材料 | 第69页 |
| ·实验方法 | 第69-70页 |
| 2 结果与分析 | 第70-74页 |
| ·完整Bmvlg ORF 的克隆与分析 | 第70-71页 |
| ·Bmvlg 的可变剪接 | 第71-74页 |
| 3 讨论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-77页 |
| 第五章 家蚕 achi 基因 cDNA 的克隆与初步分析 | 第77-92页 |
| 1 材料与方法 | 第78-79页 |
| ·试剂材料 | 第78页 |
| ·实验方法 | 第78-79页 |
| 2 结果与分析 | 第79-90页 |
| ·Bmachi 的电子克隆 | 第79-80页 |
| ·Bmachi ORF 的PCR 扩增 | 第80-81页 |
| ·Bmachi ORF 的克隆与鉴定与分析 | 第81-83页 |
| ·Bmachi ORF 的分析 | 第83页 |
| ·Bmachi 的高级结构分析 | 第83-84页 |
| ·BmAchi 的信号肽序列分析 | 第84-85页 |
| ·Achi 的同源性比较 | 第85-87页 |
| ·Bmachi 的可变剪接 | 第87-89页 |
| ·achi 的进化分析 | 第89-90页 |
| 3 讨论 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-92页 |
| 第六章 家蚕 achi 的原核表达和多克隆抗体的制备 | 第92-102页 |
| 1 材料与方法 | 第93-95页 |
| ·试剂材料 | 第93页 |
| ·实验方法 | 第93-95页 |
| 2 结果与分析 | 第95-98页 |
| ·家蚕achi 基因重组表达载体的鉴定 | 第95页 |
| ·BmAchi 重组蛋白的诱导表达 | 第95-96页 |
| ·BmAchi 蛋白的过柱纯化 | 第96-97页 |
| ·Western blotting 检测BmAchi 抗体的特异性 | 第97页 |
| ·家蚕雌雄性腺组织的western blotting 检测 | 第97-98页 |
| 3 讨论 | 第98-100页 |
| ·原核表达重组蛋白的纯化 | 第98-99页 |
| ·BmAchi 重组蛋白的多克隆抗体制作 | 第99-100页 |
| ·家蚕雌雄性腺组织的western blotting 检测 | 第100页 |
| 参考文献 | 第100-102页 |
| 第七章 家蚕 achi 基因的 RNAi 初步研究 | 第102-107页 |
| 1 材料与方法 | 第103页 |
| ·试剂材料 | 第103页 |
| ·实验方法 | 第103页 |
| 2 结果与分析 | 第103-104页 |
| 3 讨论 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-107页 |
| 结论 | 第107-108页 |
| 1 结论 | 第107页 |
| 2 有待进一步研究的问题 | 第107-108页 |
| 附录 | 第108-117页 |
| 1 载体图谱 | 第108-110页 |
| T 载体——pUCm-T | 第108页 |
| T 载体——pMDTM18-T | 第108-109页 |
| 原核表达载体——pET-28a(+) | 第109页 |
| pSK 载体——pBluescriptⅡKS/SK(+) | 第109-110页 |
| 2 测序图谱（部分序列） | 第110-116页 |
| Bmvlg 启动子（EU360451） | 第110页 |
| Bmvlg cDNA 基因（FJ542314） | 第110-111页 |
| Bmvlg cDNA 基因（FJ542312） | 第111页 |
| Bmvlg cDNA 基因（FJ542313） | 第111-112页 |
| Bmvlg cDNA 基因（FJ502825） | 第112页 |
| Bmachi cDNA 基因（FJ643616） | 第112-113页 |
| Bmachi cDNA 基因（FJ502823） | 第113页 |
| Bmachi cDNA 基因（FJ502824） | 第113-114页 |
| Bmachi cDNA 基因（可变剪接之一）(FJ913885) | 第114页 |
| Bmachi cDNA 基因（可变剪接之二）(FJ913886) | 第114-115页 |
| Bmachi cDNA 基因（可变剪接之三）(GQ120180) | 第115-116页 |
| 3 缩略词表 | 第116-117页 |
| 资助项目 | 第117-118页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119页 |
