中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩略词简表 | 第6-10页 |
第一章 前言 | 第10-15页 |
·背景 | 第10-14页 |
·DNA 甲基化与基因转录调控 | 第10页 |
·DNA 甲基化与肿瘤 | 第10-11页 |
·Fascin 与肿瘤 | 第11-12页 |
·Fascin 基因的转录调控机制 | 第12-14页 |
·本项研究课题的基金来源及相关课题情况 | 第14页 |
·本项研究课题的研究意义 | 第14页 |
·研究目标与研究内容 | 第14-15页 |
·研究目标 | 第14页 |
·研究内容 | 第14-15页 |
第二章 材料方法 | 第15-28页 |
·实验材料 | 第15页 |
·食管癌细胞系 | 第15页 |
·培养基 | 第15页 |
·食管癌组织 | 第15页 |
·质粒和菌株 | 第15页 |
·PCR 试剂、酶等 | 第15页 |
·实验方法 | 第15-28页 |
·生物信息学预测 | 第15-16页 |
·细胞培养 | 第16页 |
·感受态细胞的制备 | 第16页 |
·pBF-74/Fi2671 和pP/Fi2671 质粒的构建 | 第16-20页 |
·pBF-74/Fi2671 系列缺失子的构建 | 第20-21页 |
·瞬时转染 | 第21-23页 |
·双荧光素酶报告基因检测 | 第23-24页 |
·基因组DNA 提取和甲基化修饰 | 第24-26页 |
·亚硫酸氢盐修饰基因组测序法(BGS) | 第26页 |
·甲基化特异性PCR(MSP) | 第26-28页 |
第三章 结果 | 第28-45页 |
·Fascin 基因存在CpG 岛 | 第28-29页 |
·Fascin 基因启动子区的CpG 岛在食管癌细胞系中呈非甲基化状态 | 第29-33页 |
·Fascin 基因启动子区的CpG 岛在食管癌组织中呈非甲基化状态 | 第33-36页 |
·Fascin 基因+168/+2638 片段的克隆与鉴定 | 第36页 |
·Fascin 基因+168/+2638 片段的活性鉴定 | 第36-38页 |
·Fascin 基因+560/+859 区域在食管癌中超甲基化 | 第38页 |
·5-aza-2’-deoxycytidine 处理后对调控序列活性的影响 | 第38-45页 |
第四章 讨论 | 第45-47页 |
·Fascin 基因过表达与启动子低甲基化的关系 | 第45页 |
·Fascin 基因启动子下游存在沉默子 | 第45页 |
·Fascin 基因在食管癌过表达受反式激活调控 | 第45-46页 |
·结论 | 第46-47页 |
总结与展望 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
附录 1 载体图 | 第52-54页 |
附录 2 甲基化分析的引物序列 | 第54-55页 |
硕士期间发表论文情况 | 第55-56页 |
个人简介 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |